35-dna的重組-資料下載頁
2025-01-15 01:12本頁面
【正文】 座子 (transposon) 。 位于不同位點的兩個拷貝轉(zhuǎn)座子之間可以發(fā)生交互重組，從而造成基因組不同形式的重排。 由轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的基因移位或重排稱為轉(zhuǎn)座重組。 目 錄 （一）細(xì)菌的轉(zhuǎn)座因子 ? 插入序列 是最簡單的轉(zhuǎn)座子，除了含有轉(zhuǎn)座所需基因外不攜帶任何標(biāo)記基因。 ? 插入序列 (IS)組成 ： ①兩端具有 反向重復(fù)序列 ，長度為 15~25bp，是 轉(zhuǎn)座酶識別位點 。②在靶部位兩側(cè)產(chǎn)生的正向重復(fù)序列，一般為 5bp和 9bp。 ③一個轉(zhuǎn)座酶（ transposase)編碼基因，能表達(dá)轉(zhuǎn)座酶引起轉(zhuǎn)座。 有兩類：一類是 插入序列 (insertion sequences, IS)， 另一類是： 復(fù)雜的轉(zhuǎn)座子 (Tn)。 ： IR Transposase Gene IR 目 錄 轉(zhuǎn)座子除了含有編碼轉(zhuǎn)座功能有關(guān)的基因外，還攜帶有抗性基因或其他標(biāo)記基因。 轉(zhuǎn)座子按其結(jié)構(gòu)分為兩類： 組合因子 和 復(fù)合因子 ⑴組合因子 ：由個別模件組合而成，包括兩個插入序列作為兩臂，中間為標(biāo)記基因，構(gòu)成一個轉(zhuǎn)座單位。兩個插入序列以正向或反向位于兩端，序列可以不完全相同，有時只有一個有轉(zhuǎn)座活性，另一個已失去活性。 ISL ISR 標(biāo)記基因 兩臂正向 ISL ISR 兩臂反向 標(biāo)記基因 目 錄 ⑵復(fù)合因子（復(fù)合型轉(zhuǎn)座子） ? 復(fù)合型轉(zhuǎn)座子含有 轉(zhuǎn)座酶基因 、 解離酶基因 以及標(biāo)記基因 ，無插入序列。 ? Tn3（ TnA家族）的結(jié)構(gòu) ： 兩端為 38bp的反向重復(fù)，其兩側(cè)為 5bp的靶序列， tnpA編碼轉(zhuǎn)座酶， tnpR編碼的蛋白質(zhì)可以作為解離酶（使轉(zhuǎn)座子與受體 DNA形成的共整合體重組和解離），也可以作為阻遏蛋白調(diào)節(jié) tnpA和 tnpR兩個基因的表達(dá)， res為解離的控制位點， TnpR蛋白結(jié)合于 res位點上發(fā)揮調(diào)控作用。 IR IR res tnpA tnpR ampR 轉(zhuǎn)錄單位 轉(zhuǎn)座酶 解離酶 目 錄 ⑴ 轉(zhuǎn)座形式：有兩種： ① 保守性轉(zhuǎn)座： ②復(fù)制性轉(zhuǎn)座： 轉(zhuǎn)座子從原來位置上切下來轉(zhuǎn)到新的位置，兩條鏈均被保留。 轉(zhuǎn)座子與 DNA靶部位分別切割并連接成中間體后進行復(fù)制 ， 使原來位置和新的靶部位各有一個轉(zhuǎn)座子，其一條鏈?zhǔn)窃瓉淼?，另一條鏈?zhǔn)切潞铣傻? ⑵轉(zhuǎn)座的過程： 由轉(zhuǎn)座酶識別轉(zhuǎn)座子的末端反向重復(fù)序列并在其3?端切開，同時 轉(zhuǎn)座酶識別靶部位并交錯切開單鏈，其 5?端與轉(zhuǎn)座子的 3?端連接，形成 Shapiro中間體。然后進入 保守性轉(zhuǎn)座或復(fù)制性轉(zhuǎn)座。 目 錄 轉(zhuǎn)座子 靶部位 末端切開單鏈 交錯切開單鏈 轉(zhuǎn)座子末端切開 原來轉(zhuǎn)座 子被切除 修復(fù) 轉(zhuǎn)座子插入新位點 轉(zhuǎn)座子 復(fù)制 轉(zhuǎn)座子間 發(fā)生重組 新插入的轉(zhuǎn)座子 原來的轉(zhuǎn)座子 靶部位末端與轉(zhuǎn)座子末端連接 Shapiro中間體 目 錄 ⑶ 轉(zhuǎn)座的效應(yīng) ? 不同類型的轉(zhuǎn)座子可用不同的方式轉(zhuǎn)座，轉(zhuǎn)座因子插入基因后可使基因失活，也可引起染色體的斷裂、重復(fù)、缺失、倒位、易位等變化，是導(dǎo)致基因突變和重排的重要原因。 ? 轉(zhuǎn)座子自發(fā)插入細(xì)菌的操縱子時，可阻斷所在基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯。 ? 轉(zhuǎn)座子可通過干擾宿主基因與其調(diào)控元件之間的關(guān)系或轉(zhuǎn)座子本身的作用影響臨近基因的表達(dá)，改變宿主的表型。 目 錄 （二）真核生物的轉(zhuǎn)座因子 ? 真核生物的轉(zhuǎn)座因子與原核生物轉(zhuǎn)座因子非常相似，同樣由轉(zhuǎn)座酶識別兩端的反向重復(fù)序列和靶位點，插入轉(zhuǎn)座子后經(jīng)修復(fù)形成兩側(cè)正向重復(fù)序列 ? 但二者在結(jié)構(gòu)和性質(zhì)上也有差別：原核生物因無細(xì)胞核，轉(zhuǎn)錄和翻譯同步進行；真核生物因核膜相隔，轉(zhuǎn)錄和翻譯在空間和時間上均不相同。原核生物的轉(zhuǎn)座酶主要作用于產(chǎn)生該酶的轉(zhuǎn)座因子，表現(xiàn)出順式顯性。真核生物的轉(zhuǎn)座酶可以作用于任何末端具有該酶所識別的反向重復(fù)順序的 DNA，使其轉(zhuǎn)移到相應(yīng)的靶位點。 目 錄 演講完畢，謝謝觀看！
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