基因工程、克隆技術(shù)-資料下載頁(yè)
2024-09-20 20:51本頁(yè)面
【正文】 _的表現(xiàn)。 (4)在培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后，原生質(zhì)體會(huì)再生出細(xì)胞壁。可以取樣，通過(guò) __________________________實(shí)驗(yàn)來(lái)鑒別細(xì)胞壁是否已經(jīng)再生。 (5)請(qǐng)說(shuō)明運(yùn)用植物體細(xì)胞雜交法的最大好處：_____________________________________________________________。 纖維素酶、果膠酶 誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 融合細(xì)胞 愈傷組織 幼苗 ―― →脫分化 ―― →再分化 植物細(xì)胞具有全能性 植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原 可以克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 聽(tīng)課心得 審題關(guān)鍵： “ 酶 ” 、 “ 聚乙二醇 ” 、 “ 文字和箭頭 ” 、 “ 細(xì)胞壁 ” 命題來(lái)源 ：植物體細(xì)胞雜交。 思路分析： (1)若去掉細(xì)胞壁而獲得原生質(zhì)體，需用纖維素酶和果膠酶來(lái)處理。 (2)用聚乙二醇處理原生質(zhì)體，可以誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。 (3)④⑤ 分別為脫分化和再分化過(guò)程，能夠形成一個(gè)完整植株，體現(xiàn)出植物細(xì)胞的全能性。 (4)可以通過(guò)質(zhì)壁分離與復(fù)原實(shí)驗(yàn)來(lái)鑒別原生質(zhì)體是否再生出細(xì)胞壁。 (5)植物體細(xì)胞雜交的最大好處在于可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。 【 例 2】 (濰坊質(zhì)檢 )人 CD20單克隆抗體是治療一些惡性腫瘤的特效藥 物，目前主要是通過(guò)培養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的方式生產(chǎn)。我國(guó)科學(xué)家已經(jīng) 培育出世界上第一頭轉(zhuǎn)入了 CD20抗體基因的轉(zhuǎn)基因牛，可以從它產(chǎn) 的牛奶中直接提取 CD20抗體。這項(xiàng)技術(shù)成熟后，有望使這一特效藥 的生產(chǎn)成本降至現(xiàn)在的 1/10。請(qǐng)回答： (1)單克隆抗體的制備過(guò)程需先將 ____________________和 ______________融合，這一過(guò)程的誘導(dǎo)方法與植物體細(xì)胞雜交不同的 是 _________________。 (2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要在含 __________________混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn) 行，培養(yǎng)液中通常需加入 ________________等一些天然成分。 (3)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的核心是 ______________________。該過(guò)程用到的工 具酶有 ________________________和 ________________。 經(jīng)過(guò)免疫的 B淋巴細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 用滅活的病毒誘導(dǎo) 95%空氣加 5%CO2 血清、血漿 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 限制性核酸內(nèi)切酶 (限制酶 ) DNA連接酶 聽(tīng)課心得 審題關(guān)鍵： “ 單克隆抗體 ” 、 “ 植物體細(xì)胞雜交 ” 、 “ 混合氣體 ” 、“ 天然成分 ” 、 “ 核心 ” 、 “ 工具酶 ” 命題來(lái)源 ：?jiǎn)慰寺】贵w、植物體細(xì)胞雜交、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)基因。 思路分析： 單克隆抗體的制備首先是將經(jīng)過(guò)免疫的 B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，其誘導(dǎo)方法與植物體細(xì)胞雜交不同的是用滅活的病毒誘導(dǎo)。動(dòng)物體細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)、溫度和 pH以及氣體環(huán)境。氣體環(huán)境必須是含 95%的空氣加 5%的 CO2， O2是細(xì)胞代謝所必需的， CO2是維持培養(yǎng)液的 pH。在使用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，由于人們對(duì)一些細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒(méi)有完全搞清楚，因此通常需加入血清、血漿等一些天然成分。轉(zhuǎn)基因技術(shù)的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，用到的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和 DNA連接酶。
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