核酸的結(jié)構(gòu)與功能-資料下載頁
2025-08-15 22:23本頁面
【正文】 dsDNA ssDNA ? DNA是線性高分子 ， 在機(jī)械作用力下容易斷裂 一、核酸的一般理化性質(zhì) 核酸在波長(zhǎng) 260nm 處有強(qiáng)烈的吸收，是由 堿基的共軛雙鍵 所決定的。這一特性常用作核酸的定性和定量分析。 ?DNA或 RNA的定量 A260 = 相當(dāng)于 50μg/ml 雙鏈 DNA(dsDNA) 40μg/ml 單鏈 DNA (ssDNA or RNA) 20μg/ml 寡核苷酸 ?確定樣品中核酸的純度 純 DNA: A260/A280 = 純 RNA: A260/A280 = ? 紫外吸收的應(yīng)用 二、 DNA的變性 在某些理化因素作用下， DNA雙鏈解開成兩條單鏈 的過程。 ? 定義 DNA變性的本質(zhì)是雙鏈間氫鍵的斷裂。 協(xié)同性的 DNA解鏈 高溫或極端的 pH ? DNA的變性 ? 部分變性 DNA的電鏡圖像 ?增色效應(yīng) (hyperchromic effect)： DNA變性時(shí)其溶液 OD260增高 的現(xiàn)象 。 ? DNA解鏈時(shí)的 紫 外吸收變化 ? DNA的解 鏈 曲線 連續(xù)加熱 DNA的過程中以溫度相對(duì)于A260值作圖 ， 所得的曲線稱為 解鏈曲線 。 解鏈過程中 ， 紫外吸光度的變化達(dá)到最大變化值的一半時(shí)所對(duì)應(yīng)的溫度 。 解鏈溫度 (melting temperature， Tm) ? G+C 含量越高 ， 解鏈溫度就越高 。 ? 解鏈 曲線 的變化 三、 DNA的復(fù)性與分子雜交 ?當(dāng)變性條件緩慢地除去后 ， 兩條解離的互補(bǔ)鏈可重新配對(duì) ， 恢復(fù)原來的雙螺旋結(jié)構(gòu) ， 這一現(xiàn)象稱為 DNA復(fù)性 (renaturation) 。 ?減色效應(yīng)： DNA復(fù)性時(shí) ， 其溶液 OD260降低 。 ?熱變性的 DNA經(jīng)緩慢冷卻后即可復(fù)性 ， 這一過程稱為 退火 (annealing) 。 ?不同種類的 DNA單鏈分子或 RNA分子放在同一溶液中 ， 只要兩種單鏈分子之間存在著一定程度的堿基配對(duì)關(guān)系 ， 在適宜的條件可以在不同的分子間形成 雜化雙鏈 (heteroduplex)。 ?這種雜化雙鏈可以在不同的 DNA與 DNA之間形成 ， 也可以在 DNA和 RNA分子間或者 RNA與RNA分子間形成 。 這種現(xiàn)象稱為核酸分子雜交 。 ? 核酸分子雜交 (hybridization) ? 核酸分子雜交 ?研究 DNA分子中某一種基因的位置 。 ?監(jiān)定兩種核酸分子間的序列相似性 。 ?檢測(cè)某些專一序列在待檢樣品中存在與否 。 ? 核酸分子雜交的應(yīng)用 目錄 小結(jié) ? 核酸的化學(xué)組成 ? 核苷酸 基本單位 ? 堿基 (嘌呤、嘧啶 )— 戊糖 — 磷酸 ? 一級(jí)結(jié)構(gòu) :堿基順序 ? 連接鍵 ? 兩端 ? 方向 目錄 DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu) 雙螺旋結(jié)構(gòu) 1 . D o u b le h e li x 外觀 ： 雙股鏈、反平行、右螺旋、大小溝 。直徑 2 . 3 7 n m 、 3 . 5 4 n m 螺距 。3. 穩(wěn)定因素 ：橫向氫鍵 A － T 兩條、 G － C 三條，縱向 堿基堆積力 更重要DNA 結(jié)構(gòu)要點(diǎn)結(jié)構(gòu)要點(diǎn) ：：2. 主、側(cè)鏈 ：主鏈 — 磷酸戊糖、螺旋外側(cè) 、戊糖平面平行假想軸。側(cè)鏈 — 內(nèi)側(cè)堿基互補(bǔ)、 堿基平面垂直假象軸。目錄 ? DNA高級(jí)結(jié)構(gòu) — 超螺旋結(jié)構(gòu) ? DNA功能 ? mRNA的結(jié)構(gòu)與功能 ? 單鏈、種類多 mRNA 、 tRNA 、 rRNA結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)及功能 ? 核酸的理化性質(zhì) 目錄 ? 紫外吸收 ? DNA變性 :定義、變性的實(shí)質(zhì)、增色效應(yīng)、解鏈曲線、 Tm 、 Tm與堿基組成的關(guān)系 ? DNA復(fù)性、雜交的概念
教學(xué)教案相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1