【正文】 即：強(qiáng)玻璃和弱玻璃。在玻璃化轉(zhuǎn)變溫度以下進(jìn)行降溫，弱玻璃粘度的增加，比強(qiáng)玻璃來的快。因此，賦形劑形成弱玻璃要比形成強(qiáng)玻璃的保護(hù)效果好得多。蔗糖和海藻糖就是因?yàn)槟軌蛐纬梢环N弱玻璃而具有很好的保護(hù)作用。水替代假說 由于蛋白質(zhì)分子中存在大量的氫鍵，結(jié)合水通過氫鍵與蛋白質(zhì)分子連接。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)在冷凍干燥過程中推動水分后，保護(hù)劑的羥基能夠替代蛋白質(zhì)表面上水的羥基，使蛋白質(zhì)表面形成一層“水合層”，這樣就可以保護(hù)氫鍵的聯(lián)結(jié)位置不直接暴露在周圍環(huán)境中，從而保持了蛋白質(zhì)天然結(jié)構(gòu)和功能的完整性。當(dāng)冷凍干燥時，保護(hù)劑可與生物大分子的失水部位形成氫鍵，替代保持生物大分子凍干損傷。（三）儲藏過程中的保護(hù)機(jī)理 干燥過程中出現(xiàn)的引起蛋白質(zhì)變質(zhì)的時間尺度為小時，而對于儲藏而言，時間尺度為月或年。在正確的冷凍干燥工藝中，要求產(chǎn)品溫度接近于其玻璃化轉(zhuǎn)變溫度，而在正確的儲藏條件下，環(huán)境溫度應(yīng)當(dāng)比其玻璃化轉(zhuǎn)變溫度低得多，以獲得很長的松馳時間。三、耐熱凍干保護(hù)劑配方需要注意的問題 確定最優(yōu)的pH值 生物制品中的活性成分（如蛋白質(zhì)）只有在很小的PH值范圍內(nèi)才是穩(wěn)定的，并且不同的PH環(huán)境會影響蛋白質(zhì)的溶解性。最優(yōu)的PH環(huán)境有利于蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性和它在溶液中的溶解性，冷凍干燥配方的PH對凍干生物制品長期儲藏的穩(wěn)定性也會帶來很大影響。另外，酸堿度會影響固體狀態(tài)下蛋白質(zhì)的物理和化學(xué)的穩(wěn)定性。緩沖劑的選擇 許多緩沖劑能夠用于生物制品耐熱保護(hù)劑配方中，但是并非每一種緩沖劑都能夠用于任何溶液；對PH值敏感的蛋白質(zhì)溶液，就應(yīng)當(dāng)避免使用磷酸鈉緩沖液，這是由于在凍結(jié)過程中，Na2HPO4易于優(yōu)先結(jié)晶，使得溶液的PH降低，最終引起蛋白質(zhì)變性；正確選擇緩沖劑的濃度也是很重要的。填充劑的選擇 填充劑有相當(dāng)好的溶解性，與生物制品中活性組分相容，沒有或者只有很小的毒性，具有較高的共晶溫度。低溫、干燥保護(hù)劑的選擇 糖類是生物制品冷凍干燥過程中使用最頻繁的保護(hù)劑，一般不選用還原性糖，因?yàn)樗赡芘c蛋白質(zhì)之間發(fā)生非酶褐變反應(yīng)；某些鹽類也要用作生物制品在冷凍干燥過程中的保護(hù)劑；某些聚合物，因其能提高玻璃化轉(zhuǎn)變溫度，而常被用作保護(hù)劑。但是，聚合物與蛋白質(zhì)分子形成氫鍵的能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于糖類，所以常常采用聚合物和糖聯(lián)合使用，當(dāng)然，這種方式并不是對每一種蛋白質(zhì)都是有效的。超濾技術(shù)應(yīng)用于穿琥寧凍干粉針的研究【關(guān)鍵詞】 超濾技術(shù) 【摘要】 目的 提高穿琥寧凍干粉針質(zhì)量。方法采用“高純度穿琥寧生產(chǎn)工藝”專利超濾技術(shù)生產(chǎn)穿琥寧凍干粉針并與其它廠家同類產(chǎn)品進(jìn)行動物急性毒性試驗(yàn)比較。結(jié)果超濾技術(shù)生產(chǎn)的注射用穿琥寧ld50 明顯高于其它廠家生產(chǎn)的同規(guī)格產(chǎn)品，單次靜脈給藥的ld50 達(dá)到910mg/kg，而國家標(biāo)準(zhǔn)說明書中的ld50 為675mg/kg，文獻(xiàn)資料報道穿琥寧注射劑的單次靜脈給藥的ld50 為580～620mg/kg。結(jié)論超濾技術(shù)可以大大降低注射用穿琥寧產(chǎn)品的毒性，提高臨床安全性。注射用穿琥寧是采用爵床科植物穿心蓮提取物―穿心蓮內(nèi)酯經(jīng)酯化、脫水、成鹽而制成的脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯單鉀鹽，加入ph調(diào)節(jié)劑、碳酸氫鈉等藥用輔料經(jīng)冷凍干燥而制成的供肌肉注射或靜脈滴注用的無菌凍干粉針。用于病毒性肺炎、病毒性上呼吸道感染等。穿心蓮性寒、味苦，能清熱解毒，消炎止痛。可用于急性細(xì)菌性痢疾、急性胃腸炎、扁桃體炎、咽喉炎等。我國科研工作者于70年代初對穿心蓮提取物成分進(jìn)行了深入研究，結(jié)果表明，有效成分為其二萜類內(nèi)酯化合物。因二萜類內(nèi)酯化合物均難溶于水，無法滿足臨床需要，通過在內(nèi)酯結(jié)構(gòu)中引入不同的親水基團(tuán)，增加內(nèi)酯的水溶性，目前已制成了多種穿心蓮內(nèi)酯針劑，穿琥寧即是抗炎解熱作用最強(qiáng)者，目前在臨床上已得到廣泛應(yīng)用，1992年被國家中醫(yī)藥管理局批準(zhǔn)為全國中醫(yī)院急診科（室）首批必備中藥之一。我們通過北京圖書館對近年在醫(yī)藥刊物發(fā)表的有關(guān)穿琥寧86 篇論文進(jìn)行分析，在24篇專題報道不良反應(yīng)的文章中，除1篇只寫“使用穿琥寧”外，其余23篇所報道的全部是水針劑。專家認(rèn)為:穿琥寧水針劑不穩(wěn)定，因穿琥寧為一個二萜類內(nèi)酯化合物，而且分子中有一共軛雙鍵，因而化學(xué)活性高，易發(fā)生水解反應(yīng)和氧化反應(yīng)，生產(chǎn)中還要進(jìn)行高溫滅菌，這又促進(jìn)了分解反應(yīng)。純凈穿琥寧水溶液微黃略顯綠色，但國內(nèi)市場上穿琥寧水針劑的色澤深，有的甚至變成了黃色或棕黃色。穿琥寧水針劑的毒副反應(yīng)主要為嬰幼兒泄瀉，發(fā)生率為22%。個別有白細(xì)胞銳減、過敏性休克、藥疹、抽搐、瘙癢、高熱、寒顫、呼吸困難、紫癜等。為了提高穿琥寧凍干粉針劑的質(zhì)量，本試驗(yàn)研究了“高純度穿琥寧生產(chǎn)工藝”專利超濾技術(shù)，應(yīng)用于該產(chǎn)品生產(chǎn)并與其它廠家同類產(chǎn)品進(jìn)行的動物急性毒性試驗(yàn)情況。1 生產(chǎn)工藝 儀器 882型切向流超濾器，cl25蠕動泵（軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院）。millipore超濾膜堆（截留分子量:5000）。lgj5型冷凍干燥機(jī)。西林瓶洗、烘、灌聯(lián)動生產(chǎn)線。 藥品與試劑穿琥寧（注射級，成都天臺山制藥有限公司）。碳酸氫鈉（注射級，上海虹光化工廠）。右旋糖酐40（注射級，漯河華穎藥業(yè)有限公司）。活性炭（針用，上?；钚蕴繌S）。滅菌注射用水（本廠生產(chǎn)）。乙醇（藥用，南陽天冠集團(tuán)酒精廠）。鹽酸、氫氧化鈉均為分析純試劑。 生產(chǎn)工藝（應(yīng)用超濾技術(shù)）（1）在無菌室（百級）配料間內(nèi)，將穿琥寧（原料藥）溶于50%乙醇，%～1%活性炭（注射級），在25～30℃溫度下，用鹽酸調(diào)ph為 ～，攪拌30min，吸附原料在生產(chǎn)過程中因暴露空氣而帶進(jìn)的熱源物質(zhì)，充分回流，使色澤下降兩個色級。用分子截留量5000的超濾膜進(jìn)行超濾，將5000以上分子量的大分子植物蛋白截留下來。超濾液經(jīng)重結(jié)晶后用無熱原注射用水淋洗、濾干，進(jìn)入配料工序。（2）按千支計(jì)算，在無菌室（百級）配料間內(nèi)，精密稱取經(jīng)計(jì)算后處方量的穿琥寧精制品，%碳酸氫鈉（注射級）溶液500ml，至溶解澄清。加10%右旋糖酐40（注射級）溶液 500ml，加無熱原滅菌注射用水至3000ml，混合均勻，177。取半成品檢驗(yàn)，定裝量，除菌過濾后，凍干，封口即得。2 急性毒性試驗(yàn)根據(jù)國家藥品監(jiān)督管理局《化學(xué)藥品和治療用生物制品研究指導(dǎo)原則》中化學(xué)藥品單次給藥的毒性研究（即急性毒性試驗(yàn)）指導(dǎo)原則，對注射用穿琥寧進(jìn)行了急性毒性試驗(yàn)，觀察受試藥物一次給予動物后所產(chǎn)生的急性毒性反應(yīng)和死亡情況。 試驗(yàn)樣品 注射用穿琥寧 我公司應(yīng)用超濾技術(shù)試制生產(chǎn)的20020322，微黃色凍干塊狀物。臨用前以氯化鈉注射液稀釋至所需濃度。 注射用穿琥寧 我公司受黑龍江某制藥公司委托加工生產(chǎn)的200101163批，微黃色凍干塊狀物。臨用前以氯化鈉注射液稀釋至所需濃度。 注射用穿琥寧 我公司在市場上購買的某制藥公司生產(chǎn)的0205031批，微黃色凍干塊狀物。臨用前以氯化鈉注射液稀釋至所需濃度。 試驗(yàn)動物 昆明種小鼠，購自河南省實(shí)驗(yàn)動物中心，合格證號:醫(yī)動字第99012號。動物飼料購自河南省實(shí)驗(yàn)動物中心，為標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料。 試驗(yàn)方法與結(jié)果（1）試驗(yàn)室溫度:（20177。1）℃。（2）在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上取健康小鼠180只，體重（177。）g。雌雄各半，每個批號藥物隨機(jī)分為6組，每組10只。高低劑量的比值設(shè)定為1:。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果，將受試藥物配制成不同濃度，、、。、 、。、、 ，靜脈給藥，給藥速度為5s，給藥后即刻觀察，記錄動物的反應(yīng)和死亡情況。給藥后自高劑量組開始，部分動物出現(xiàn)靜伏少動、抽搐、四肢癱軟等現(xiàn)象，并呈抑制狀態(tài)死亡，動物可隨受試藥物濃度的不同，出現(xiàn)的反應(yīng)程度和死亡時間不同。死亡多發(fā)生在給藥后的 30min～48h內(nèi)，對死亡鼠立即進(jìn)行尸檢，肉眼觀察各主要臟器，未見明顯異常。對各組存活鼠逐日觀察1星期，動物的外觀行為、食欲、糞便未見明顯異常，試驗(yàn)結(jié)束時，存活動物體重分別增長至（177。）、（177。）、（177。）g。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用bliss機(jī)率單位計(jì)算ld 50 值及可信限，結(jié)果見表3。測得注射用穿琥寧靜脈給予小鼠的ld 50 值分別為:，其95%～。批號20010163為 ，其95%～。，其95%可信限為 ～。3 討論采用超濾技術(shù)生產(chǎn)的注射用穿琥寧ld 50 明顯高于其它廠家生產(chǎn)的同規(guī)格產(chǎn)品，單次靜脈給藥的ld 50達(dá)到910mg/kg，而國家標(biāo)準(zhǔn)說明書中的ld 50為675mg/kg［8］，文獻(xiàn)資料報道穿琥寧注射劑的單次靜脈給藥的ld50達(dá)到580～620mg/kg［2］，因此，大大降低了注射用穿琥寧產(chǎn)品的毒性，提高了本品在臨床上使用的安全性。