【正文】 產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)性。實(shí)驗(yàn)證明，當(dāng)退火的溫度高于配方的最大濃縮液玻璃化轉(zhuǎn)變溫度Tg39。然后解除真空，降低擱板溫度到結(jié)晶溫度以下進(jìn)行凍結(jié)。他們?cè)谘芯恐邪l(fā)現(xiàn)，冰晶成核溫度從本質(zhì)上來說是隨機(jī)的、不穩(wěn)定的，不容易控制，但是受溶液中的微粒含量和是否存在冰晶成核體等影響因素。在全域過冷結(jié)晶中，凍結(jié)速率和冰晶成核溫度是重要的參數(shù)。　　此外，為了獲得均勻一致、表面光滑、穩(wěn)定的蛋白質(zhì)藥品，配方中必須含有填充劑、賦形劑、穩(wěn)定劑等保護(hù)劑，這些保護(hù)劑對(duì)實(shí)現(xiàn)藥品的玻璃化凍結(jié)有重大的影響。 　　冷凍干燥過程中的凍結(jié)過程非常重要，因?yàn)樵趦鼋Y(jié)中形成的冰晶形態(tài)和大小以及玻璃化程度不僅影響后繼的干燥速率，而且影響凍干藥品的質(zhì)量。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)在冷凍干燥過程中失去水分后，保護(hù)劑的羥基能替代蛋白質(zhì)表面的水的羥基，使蛋白質(zhì)表面形成一層假定的水化膜，這樣可保護(hù)氫鍵的聯(lián)結(jié)位置不直接暴露在周圍環(huán)境中，穩(wěn)定蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)，防止蛋白質(zhì)因凍干而變性，使其即使在低溫冷凍和干燥失水的情況下，仍保持蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的完整性。在有起穩(wěn)定作用的保護(hù)劑存在的條件下，蛋白質(zhì)優(yōu)先與水作用（優(yōu)先水合），而保護(hù)劑優(yōu)先被排斥在蛋白質(zhì)區(qū)域外（優(yōu)先排斥）。截止2000年2月，美國FDA已批準(zhǔn)的生物技術(shù)藥共計(jì)76個(gè)。　　叔丁醇自身在凍結(jié)中形成針狀結(jié)晶，能改變?nèi)苜|(zhì)的結(jié)晶方式，利于升華。其特點(diǎn)如下：　　凝固點(diǎn)高。叔丁醇水共溶劑系統(tǒng)為水溶性的蛋白質(zhì)多肽溶于油溶液提供了一種新的藥物傳遞辦法。還有一種方法是形成水包油的乳劑再除去有機(jī)溶劑。同時(shí)，在析出結(jié)晶這個(gè)相分離的過程中，磷脂作為一種表面活性劑，吸附在兩相的界面上，降低表面張力，即磷脂包裹的叔丁醇分散在糖基質(zhì)中，最終形成一種類似乳劑的狀態(tài)。對(duì)抗生素頭孢噻吩鈉的研究發(fā)現(xiàn)，加入少量的叔丁醇可以使很難結(jié)晶的藥物得到針狀的結(jié)晶?！　≡鋈茈y溶性藥物 Aldipine是一種從海洋生物中提取的抗癌活性物質(zhì)，其相對(duì)分子質(zhì)量為1109，在水中幾乎不溶。叔丁醇水共溶劑就是其中最常見的，以它為溶劑進(jìn)行冷凍干燥的工藝可以用于多種制劑的制備，具有多方面優(yōu)勢(shì)。最終板層溫度是成品水分含量的一個(gè)主要決定因素，其數(shù)值不能超過制品的最高允許溫度，對(duì)于蛋白質(zhì)藥物其最高允許溫度一般應(yīng)低于40℃，對(duì)于絕大多數(shù)動(dòng)物用疫苗，最終板層溫度應(yīng)該在25℃35℃之間。近年來發(fā)現(xiàn)，在凍干配方中加入5%左右叔丁醇后，凍結(jié)時(shí)會(huì)形成針狀結(jié)晶，冰晶升華后留下了管狀通道，使水蒸氣阻力大大減小，升華速率顯著提高，節(jié)省了時(shí)間和能耗。左右。在升華干燥過程中，制品吸收熱量后所含水分在真空下升華成水蒸氣，消耗大量熱能，使得制品溫度較板層溫度低十幾甚至幾十度。但也有降溫更慢和更快的事例，如紅細(xì)胞和倉鼠細(xì)胞的最佳冷卻速率超過50℃/min，℃/min。 當(dāng)初始濃度為A的溶液（A點(diǎn)）從室溫開始冷卻時(shí)，隨著溫度的下降，溶液過冷到B點(diǎn)后將開始析出冰，結(jié)晶潛熱的釋放又使溶液局部溫度升高。近年來，人們已經(jīng)逐漸地認(rèn)識(shí)到，凡是成功的低溫保存，細(xì)胞內(nèi)的水均以玻璃態(tài)的形式被固化，在胞內(nèi)不出現(xiàn)晶態(tài)的冰。 1 產(chǎn)品預(yù)凍 制品的玻璃化玻璃化的作用。此法又稱“部分玻璃化法”。20世紀(jì)60年代，人們成功地保存了哺乳動(dòng)物的某些細(xì)胞，其降溫程序是：以1℃/min降到15℃，然后以45℃/min降到79℃，這一程序與前面所提及的“兩步法”是一致的。待成品中看不到冰時(shí)，則可認(rèn)為一次干燥已完畢，此時(shí)制品溫度迅速上升，接近板溫，制品中最初水分的90%以上已被除去。有人認(rèn)為，在多數(shù)情況下，塌陷溫度Tc要比玻璃化轉(zhuǎn)變溫度Tg高20176。對(duì)于多數(shù)制品的冷凍干燥，冷阱表面溫度在40—50℃之間已能滿足要求。但慢凍時(shí)，溶質(zhì)可能發(fā)生遷移，以至于在表面形成一層硬殼，阻止升華進(jìn)行。制品水分過低，菌體表面親水基團(tuán)失去保護(hù)，會(huì)直接與氧接觸，影響菌體的存活率。通常情況下，水是惟一的溶劑，但有時(shí)候藥物在萃取和結(jié)晶過程中殘留的有機(jī)溶劑，也可能會(huì)被帶入到最后的凍干溶液中，這樣會(huì)導(dǎo)致一些新的變化，含少量有機(jī)溶劑的溶液的凍干工藝引起人們的關(guān)注，并被深入研究。目前，采用此凍干工藝生產(chǎn)的前列腺素E無菌粉末制劑已在國外上市。這是因?yàn)?，叔丁醇的加入?huì)改變水的結(jié)晶狀態(tài)，進(jìn)而也會(huì)使溶在水中的藥物結(jié)晶狀態(tài)發(fā)生改變。在凍干過程中，磷脂的叔丁醇溶液先析出結(jié)晶，這種結(jié)晶的形成被黏度較大的糖溶液限制，只能形成較小的粒徑。通常的做法是，將高分子共聚物和藥物共溶于水中，此法對(duì)于很多水溶性差的藥物來說，會(huì)造成載藥量減少，并且由于高分子材料自身的水溶性較差，很多時(shí)候需要將兩者共同溶于有機(jī)溶劑中，然后用水透析出去?！　〉鞍踪|(zhì)肽類的口服給藥一直是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)與難點(diǎn)。其中，叔丁醇被認(rèn)為是最適合制劑的凍干溶劑。在凍干過程中，大部分叔丁醇可在一次干燥階段升華，在制劑中殘留量很低。從國家藥品監(jiān)督管理局?jǐn)?shù)據(jù)庫得知，目前國內(nèi)已有注射用重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子、注射用重組人干擾素α2b、凍干鼠表皮生長(zhǎng)因子、外用凍干重組人表皮生長(zhǎng)因子、注射用重組鏈激酶、注射用重組人白介素注射用重組人生長(zhǎng)激素、注射用A群鏈球菌、注射用重組人干擾素α2b、凍干人凝血因子VⅢ、凍干人纖維蛋白原、間苯三酚口服凍干片等凍干藥品獲準(zhǔn)上市。優(yōu)先作用是指蛋白質(zhì)優(yōu)先與水或水溶液中的保護(hù)劑作用。許多研究者認(rèn)為由于蛋白質(zhì)分子中存在大量氫鍵，結(jié)合水通過氫鍵與蛋白質(zhì)分子聯(lián)結(jié)。尤其在干燥過程中，藥品微粒不能粘在基質(zhì)上，逸出的水蒸氣會(huì)把這些微粒帶到小瓶的塞子上，有時(shí)甚至?xí)У秸婵帐耶?dāng)中?！　∪蜻^冷結(jié)晶是指全部藥液處于相同或相近的過冷度下進(jìn)行凍結(jié)的方式?！　ames A Searles等人認(rèn)為冰晶成核溫度是全域過冷結(jié)晶的重要因素，因?yàn)樗巧A速率的主要決定因素。擱板溫度為+10℃的條件下，讓溶液開始表面凍結(jié)，形成1～3mm左右的冰晶薄層。但是無論采用哪種凍結(jié)方式，藥品溶液必須部分或全部實(shí)現(xiàn)玻璃化凍結(jié)，以保護(hù)藥品藥性。此外，凍結(jié)濃縮液中也會(huì)有一部分水來不及析出，使其達(dá)不到最大濃縮狀態(tài)。James A Searles等人研究認(rèn)為不同的成核溫度產(chǎn)生不同的冰晶形態(tài)和粒徑大小，繼而導(dǎo)致升華干燥的速率的不均勻。干燥過程占據(jù)了藥品冷凍干燥過程的大部分能耗，因此采取有效措施提高干燥速率顯得非常有意義。為了提高經(jīng)濟(jì)性，在升華干燥過程中應(yīng)至少低于藥品溫度20℃；在解吸干燥過程中，對(duì)于那些要求很低殘余水分的配方，冷阱溫度要求更低。若壓強(qiáng)過低，則對(duì)傳熱不利，藥品不易獲得熱量，升華速率反而降低，而且對(duì)設(shè)備的要求也更高，增加了成本。如： 酸性物質(zhì)：谷氨酸、天冬氨酸、乳酸； 中性物質(zhì)：葡萄糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、山梨醇； 堿性物質(zhì)：精氨酸、組氨酸。 產(chǎn)品的自身氧化可消耗凍干樣品內(nèi)部和環(huán)境中的氧；放入電子或氫離子，可阻斷凍干樣品中氧化鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，抑制氧化酶活性，防止樣品在冷凍干燥及儲(chǔ)藏過程中氧化變質(zhì)。甘露醇無菌濾液穩(wěn)定，不易被氧化，可提供支持結(jié)構(gòu)，并且不與活性組分發(fā)生反應(yīng)；山梨醇是甘露醇的同分異構(gòu)體，但其溶解度比甘露醇大，在常溫下呈粘稠的透明狀液體，有旋光性，略有甜味，具有吸濕性，高溫下不穩(wěn)定，在冷凍干燥配方中，山梨醇常用作填充劑。低濃度甘氨酸可通過抑制10或100mmol/L磷酸緩沖鹽結(jié)晶所致PH值的改變而阻止蛋白質(zhì)藥物變性，并且能升高成品的塌陷（崩解）溫度，阻止因塌陷而引起的蛋白質(zhì)藥物的破壞。叔丁醇是一種小分子醇，與水完全互溶，具有低毒性、高蒸汽壓。限制蛋白質(zhì)分子擴(kuò)散的機(jī)理認(rèn)為，許多保護(hù)劑都能夠提高溶液的粘度，抑制活性分子的擴(kuò)散。當(dāng)冷凍干燥時(shí)，保護(hù)劑可與生物大分子的失水部位形成氫鍵，替代保持生物大分子凍干損傷。低溫、干燥保護(hù)劑的選擇 糖類是生物制品冷凍干燥過程中使用最頻繁的保護(hù)劑，一般不選用還原性糖，因?yàn)樗赡芘c蛋白質(zhì)之間發(fā)生非酶褐變反應(yīng)；某些鹽類也要用作生物制品在冷凍干燥過程中的保護(hù)劑；某些聚合物，因其能提高玻璃化轉(zhuǎn)變溫度，而常被用作保護(hù)劑。穿心蓮性寒、味苦，能清熱解毒，消炎止痛。個(gè)別有白細(xì)胞銳減、過敏性休克、藥疹、抽搐、瘙癢、高熱、寒顫、呼吸困難、紫癜等。右旋糖酐40（注射級(jí)，漯河華穎藥業(yè)有限公司）。（2）按千支計(jì)算，在無菌室（百級(jí)）配料間內(nèi)，精密稱取經(jīng)計(jì)算后處方量的穿琥寧精制品，%碳酸氫鈉（注射級(jí)）溶液500ml，至溶解澄清。 注射用穿琥寧 我公司在市場(chǎng)上購買的某制藥公司生產(chǎn)的0205031批，微黃色凍干塊狀物。雌雄各半，每個(gè)批號(hào)藥物隨機(jī)分為6組，每組10只。）、（177。