第七章可見分光光度法-資料下載頁
2025-08-01 12:47本頁面
【正文】 顯色反應(yīng)如何選擇？ 5． 吸光度測量條件如何選擇？ 6．光度分析法中，參比溶液應(yīng)如何選擇？ 7．示差光度法的測定原理是什么？如何用示差光度法進(jìn)行定量分析？ 答案 51 ：當(dāng)一束平行的單色光通過液層厚度為 b的有色溶液時(shí) ， 溶液的吸光度 A與液層的厚度 b和溶液的濃度c成正比 。 即 A= lg(I0 / I) = εbc ： 摩爾吸光系數(shù) ε在數(shù)值上等于 1molL1吸光物質(zhì)在 1cm光程中的吸光度 。 它是吸光物質(zhì)在特定波長下的一個(gè)特征常數(shù) 。 其單位為 L mol1 cm1。 由于 ε值與入射光波長有關(guān) ， 故表示 ε時(shí) ， 應(yīng)注明所用入射光波長 。 在分析化學(xué)中 ， ε值的大小反應(yīng)了： （ 1）吸光物質(zhì)對某一特定波長光吸光能力大小的量度 。 ε值越大 ， 該吸光物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng) 。 （ 2） 衡量光度分析方法靈敏度的重要指標(biāo) ， ε值越大 ， 方法的靈敏度越高 。 52 ：以入射光波長作橫坐標(biāo) ， 用分光光度計(jì)測量每一波長下物質(zhì)對光的吸光度作縱坐標(biāo)所繪制的曲線 ，稱為吸收曲線 。 其作用是：選擇入射光波長 ， 在此波長下測量吸光度 ， 則分析的靈敏度最高 。 因此 ，吸收曲線是吸光光度法中選擇測定波長的重要依據(jù) 。 在某特定波長下 ， 用分光光度計(jì)測量一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度 ， 然后以濃度為橫坐標(biāo) ，對應(yīng)的吸光度值為縱坐標(biāo)所繪制的曲線 ， 稱為標(biāo)準(zhǔn)曲線 （ 亦稱工作曲線 ） 。 它是作為待測物質(zhì)定量分析的依據(jù) 。 如果在相同條件下測得待測試液的吸光度值 ， 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上就可查得待測試液的濃度 ， 這就是標(biāo)準(zhǔn)曲線法 。 53 ：顯色反應(yīng)的選擇原則是： （ 1） 選擇生成的有色物質(zhì) （ MR） 的 ε較大的 顯色反應(yīng)； （ 2） 顯色劑 （ R）在測定波長處無吸收 ， 即 ε盡可能??； （ 3） 反應(yīng)生成的有色物質(zhì) （ MR） 的組成要恒定 ， 化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定 。 ：吸光度測量條件包括三個(gè)主要方面： （ 1） 入射光波長的選擇： 入射光的波長應(yīng)根據(jù)吸收曲線選擇 λmax為宜 。 因在此波長處 ε值最大 ， 使測定具有較高的靈敏度 。 （ 2） 參比溶液的 選擇： 在吸光度的測量中 ， 由于比色皿的反射以及溶劑 、 試劑等對光的吸收 ， 使得 54 測得的吸光度值不能真實(shí)地反映待測物質(zhì)對光的吸收 ， 也就不能真實(shí)地反映待測物質(zhì)的濃度 。 為了校正上述影響需要正確選擇 參比溶液 。 通過調(diào)節(jié)儀器使參比溶液的吸光度為零 （ A= 0） ,或透光度 T= 100% 。借此消除上述影響 。 （ 3） 吸光度讀數(shù)范圍的選擇 吸光度值太大或太小時(shí) ，讀數(shù)波動(dòng)所引起的吸光度讀數(shù)誤差較大 ， 為了減小讀數(shù)誤差 ， 應(yīng)使測量的吸光度值控制在 A= ～ （ 或透光度 T在 75%～ 10%） 范圍之內(nèi) 。 可以采用以下措施： （ a） 控制溶液的濃度 ， 如改變試樣的稱量 ，或改變?nèi)芤旱南♂尪鹊龋?（ b） 選擇不同厚度的比色皿 ， 以改變光程的長度 。 55 ： 參比溶液的 選擇原則如下： （ 1） 若僅待測物 （ M） 與顯色劑 （ R） 的反應(yīng)產(chǎn)物（ MR） 有吸收 ， 可用蒸餾水作 參比溶液 。 （ 2） 若待測物 （ M） 無吸收 ， 而顯色劑 （ R） 或其它試劑 （ R′） 有吸收 ， 則用不加試樣的空白溶液作參比溶液 。 （ 3） 若試樣中的其它組分有吸收 （ 待測物 M之外的組分 ， 如 N） ， 但不與顯色劑反應(yīng) ， 當(dāng)顯色劑無吸收時(shí) ， 可用試樣溶液作參比溶液；當(dāng)顯色劑有吸收時(shí) ，可在試液中加入適當(dāng)掩蔽劑將待測組分掩蔽后再加顯色劑 ， 以此溶液作參比溶液 。 總之 ， 選擇 參比溶液的 原則是：應(yīng)使測得的試液的吸光度能真正反映待測物的濃度 。 56 ：示差光度法是用一個(gè)比被測試液濃度 （ cx） 稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液 （ cs） 作參比溶液與試液進(jìn)行比較 。以 cs作參比溶液 ， 調(diào)節(jié)儀器透光度讀數(shù)為 100%（ A= 0） ， 測得的吸光度是試液與參比溶液的吸光度差值 （ 稱為相對吸光度 ） ， 即 ΔA=εb(cx cs)= εbΔc 。 由此可知 ， 被測試液與參比溶液的吸光度差值 （ ΔA） 與兩溶液濃度之差 (Δc)成正比 ， 這就是示差光度法的基本原理 。 示差光度法常采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量分析 。 以上述濃度為 cs的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液 ， 測定一系列 Δc已知的標(biāo)準(zhǔn)溶液的相對吸光度 ΔA， 繪制 ΔA~Δc工作曲線 ， 再測未知液的相對吸光度 ΔA， 由工作曲線查出相應(yīng)的 Δc， 經(jīng)換算 cx= cs+Δc， 即為所求 。
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