【正文】 者涂片，在光學(xué)顯微鏡下觀察。 47．如何從植物組織器官或愈傷組織分離出單細胞？ 將植物組織器官等外植體接種到固體培養(yǎng)基上，讓其形成質(zhì)地疏松的愈傷組織，再將愈傷組織放入液體培養(yǎng)基中，經(jīng)搖床振蕩使細胞分散，然后用鎳絲網(wǎng)過濾，去除細胞團，過濾后離心使分離的細胞沉淀而收集。 48．在植物單細胞培養(yǎng)中，如何進行液體淺層培養(yǎng)？ 將細胞以一定的密度懸浮在液體培養(yǎng)基中，隨后用吸管將懸浮液移到平皿中使之形成一個淺層，然后再用石蠟?zāi)し庾∑矫筮M行培養(yǎng)。 49．在植物單細胞培養(yǎng)中，如何進行微滴培養(yǎng)？ 將一小滴的單細胞懸浮液滴在潔凈的培養(yǎng)皿或平板上，用甘油和石蠟?zāi)っ芊夂筮M行培養(yǎng)。 50．在植物單細胞培養(yǎng)中，如何進行平板培養(yǎng)？ ～3%瓊脂或瓊脂糖加熱融化后冷卻至～45℃（不燙手，但尚未凝固），迅速與等體積的細胞懸浮液均勻混合，并平鋪一薄層在培養(yǎng)皿底部，單離的細胞包埋于培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 51．從細胞水平篩選突變體，較之整體植物有哪些優(yōu)點？ 首先，它可在小規(guī)模的實驗室中同時對大量細胞進行選擇，節(jié)省人力、物力，而且不受環(huán)境條件的影響；其次，所獲得的突變體不會出現(xiàn)嵌合體，遺傳穩(wěn)定，易于鑒定。 52．化學(xué)和物理法誘導(dǎo)DNA直接轉(zhuǎn)化的方法有哪些？ （1）聚乙二醇(PEG)法； （2）脂質(zhì)體法； （3）電擊法； （4）超聲波法； （5）顯微注射法； （6）激光微束法； （7）基因槍法。 53．目前認(rèn)為轉(zhuǎn)基因植物的證據(jù)有哪些？ 要有嚴(yán)格的對照（包括陽性及陰性對照）；轉(zhuǎn)化當(dāng)代要提供外源基因整合和表達的分子生物學(xué)證據(jù)，物理數(shù)據(jù)（Southern雜交，Northern雜交，Western雜交等）與表型數(shù)據(jù)（酶活力分析或其他）；提供外源基因控制的表型性狀證據(jù)（如抗蟲、抗病等）；根據(jù)該植物的繁殖方式提供遺傳證據(jù)，有性繁殖需有目的基因控制的表型性狀傳遞給后代的證據(jù)，無性繁殖需有繁殖一代穩(wěn)定遺傳的證據(jù)。 分子標(biāo)記輔助育種：借助與目標(biāo)基因緊密連鎖的遺傳標(biāo)記基因的基因型分析，鑒定分離群體中含有目標(biāo)基因的個體，以提高選擇效率。 54．種質(zhì)系統(tǒng)介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)化方法有哪些？ （1）花粉管通道法 （2）生殖細胞浸泡法 （3）胚囊、子房注射法 55．試述種質(zhì)系統(tǒng)介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)化的特點。 轉(zhuǎn)化的DNA可以是裸露的，也可以重組在質(zhì)粒DNA上；轉(zhuǎn)化過程不是依靠物理化學(xué)過程，而是依靠生物自身的種質(zhì)系統(tǒng)或細胞結(jié)構(gòu)功能來實現(xiàn)；植物整體水平上的轉(zhuǎn)化；方法簡便易行，并與常規(guī)育種緊密結(jié)合；不需要植物組織、細胞、原生質(zhì)體等離體培養(yǎng)過程。 56．品種審定的主要任務(wù)有哪些？ 根據(jù)品種區(qū)域試驗或生產(chǎn)試驗的情況，準(zhǔn)確地評定新育成的茶樹品種在生產(chǎn)上的利用價值、經(jīng)濟效益；確定其推廣價值、適應(yīng)地區(qū)及相應(yīng)的栽培技術(shù)；對新品種的示范、繁育、推廣工作提出建議。 57．福鼎大白茶的品種登記號為“GS13001—1985”，請說明其字母或數(shù)字表示的含義。 G為“國”的漢語拼音的第一個字母，表示屬國家級品種；S為“審”的漢語拼音的第一個字母，表示屬審（認(rèn)）定通過的品種；“13”為全國農(nóng)作物品種審定委員會對作物的編號，代表茶樹；“001”是序號；“1985”表示公布年號。 58．與無性繁殖相比，有性繁殖有哪些特點？ （1）后代出現(xiàn)性狀分離，建立有隔離措施的專用采種園或兼用采種園可減輕性狀分離的程度； （2）實生苗對不良環(huán)境和病蟲害有較強的抵抗能力； （3）方法簡便、成本低； （4）有些品種結(jié)實率較低，有的甚至不結(jié)實，難以滿足有性繁殖的需要。 59．與有性繁殖相比，無性繁殖方法有哪些特點？ （1）后代可保持母本各種性狀； （2）后代之間各種性狀整齊純一。因而有利于采摘，鮮葉原料適于制茶，品質(zhì)好。有利于茶園管理，便于機械化操作； （3）花工多、成本較高； （4）母樹的病蟲害容易傳播給后代，抗逆能力比實生苗弱。 五、思考題： 1. 制定茶樹育種目標(biāo)的基本原則有哪些？ 2. 茶樹品種具有哪幾個方面的屬性？ 3．茶樹單無性系和雙無性系品種在遺傳背景上有何區(qū)別？4．你認(rèn)為我國目前茶樹育種工作存在的主要問題及發(fā)展趨勢有哪些？ 5. 你認(rèn)為在茶樹中開展基因工程育種的優(yōu)越性和難點有哪些？ 6．根據(jù)其來源茶樹種質(zhì)資源可分為哪些類別？各具有哪些特點？ 7．目前茶樹種質(zhì)資源主要以何種方式保存？為什么？ 8．茶樹地方品種有哪些特點？ 9．離體保存種質(zhì)資源有哪些優(yōu)缺點？ 10．試述種質(zhì)資源的概念及其在茶樹育種中的重要性。 11．試述我國四大茶區(qū)劃分的主要依據(jù)和各茶區(qū)品種資源的特點。 12．氣候相似論在茶樹引種工作中有什么價值和意義？ 13．試述重要生態(tài)因子與茶樹引種的關(guān)系？ 14．為什么說茶樹引種要從原產(chǎn)地和引入地生態(tài)環(huán)境之間差異以及品種本身遺傳適應(yīng)性兩個方面統(tǒng)籌考慮？ 15．簡述茶樹引種的工作環(huán)節(jié)。 16．試述簡單引種與馴化引種的區(qū)別。 17．南茶北引在栽培上應(yīng)采取什么措施？ 18．如何進行茶樹引種馴化的試驗研究，怎樣才算引種成功？ 19．引種馴化對我國的茶葉生產(chǎn)產(chǎn)生了哪些影響？ 20．如何處理綜合環(huán)境的氣候相似性與主導(dǎo)因子的限制性作用？ 21．你如果想采用選擇育種的方法選育茶樹新品種，試述其育種程序。 22．簡述茶樹有性群體內(nèi)的個體間變異有哪些原因造成？ 23．試述選擇育種的理論依據(jù)。 24．通過輻射誘變的方法，獲得了幾個明顯發(fā)生變異的單株，你如何將它們選育成新品種？ 25．如何對茶樹品種產(chǎn)量和品質(zhì)進行直接鑒定？ 26．選擇在茶樹進化和育種中有什么意義和作用？ 27．單株選擇法和混合選擇法有哪些區(qū)別？ 28．試述選擇育種的特點。 29．茶樹品種在推廣種植過程中為什么會產(chǎn)生自然變異？ 30．簡述茶樹不同繁殖方式的群體特點以及與育種關(guān)系。 31．試述茶樹有性雜交育種的意義。 32．選擇和選配茶樹有性雜交親本應(yīng)注意哪些原則？ 33．茶樹常用的雜交方式有哪些？ 34．在雜種后代處理中，為提高選擇和育種效率應(yīng)注意哪些問題？ 35．加速茶樹有性雜交育種進程的方法主要有哪些？ 36．雜交不親和的機理是什么？如何克服？ 37．試提出通過雜交育種的方法培育茶樹抗寒新品種的育種計劃？ 38．?dāng)⑹鲋参镞h緣雜交往往不能成功的原因及克服方法。 39．遠緣雜種后代性狀分離有何特點？ 40．茶樹雜種優(yōu)勢利用有哪些特點？ 41．在茶樹上如何有效地進行遠緣雜交？ 42．遠緣雜種夭亡、不育常有哪些現(xiàn)象？ 43．請你評論雜種優(yōu)勢產(chǎn)生原因的兩種假說。 44．遠緣雜交的不親和性常有哪些現(xiàn)象？ 45．遠緣雜交最重要的作用是什么？ 46．茶樹進行誘變時，應(yīng)注意哪些問題？ 46．采用插穗和種子進行輻射誘變各有什么優(yōu)缺點？ 48．簡述用秋水仙素誘導(dǎo)茶樹多倍體的工作程序。 49．誘變育種的親本材料為什么要求其綜合性狀優(yōu)良？ 50．輻射誘變在細胞和分子水平上的機理是什么？ 51．體細胞雜種植株的鑒定方法有哪些？各有什么特點？ 52．簡述體細胞雜交的步驟。 53．簡述細胞突變體篩選的一般技術(shù)。 54. 影響茶樹花藥培養(yǎng)的主要因素有哪些？ 55．簡述茶樹輻射誘變育種的特點。 56．如果你已獲得能抗茶樹某一主要蟲害的基因，如何將該基因轉(zhuǎn)化到茶樹體內(nèi)，試述主要步驟和方法。 57．簡述茶樹組培進展，你認(rèn)為限制茶樹組培進展的主要原因是什么？可以通過哪些措施克服？ 58．分子標(biāo)記在茶樹育種中的有哪些應(yīng)用？ 59．分子標(biāo)記輔助選擇在茶樹早期鑒定中有何重要意義？ 60．構(gòu)建茶樹遺傳圖譜有哪些作用？ 61．基因工程安全性評價有何意義？ 62．常用的分子標(biāo)記技術(shù)有哪些？各有哪些特點？ 63．可以用哪些方法對茶樹進行外源基因的轉(zhuǎn)化？試詳細敘述其中1~2種方法。 64．農(nóng)作物新品種審定有何意義？ 65．目前全國茶樹品種區(qū)域試驗和品種鑒定是由哪一機構(gòu)負(fù)責(zé)？該機構(gòu)何時成立？ 66．農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《主要農(nóng)作物品種審定辦法》規(guī)定的報審品種條件有那些？ 67．自上世紀(jì)80年代以來，已通過審（認(rèn)）定的國家級茶樹良種有幾批？情況如何？ 68．植物新品種保護有何意義？ 69．試簡述中國植物新品種保護條例的主要內(nèi)容。 70．品種權(quán)授予的條件是哪些？ 71．請分析植物新品種保護和品種審定的區(qū)別和聯(lián)系。 72．何謂良種繁育？從茶樹良種繁育的現(xiàn)狀談?wù)勂浣窈蟮陌l(fā)展策略。 73．茶樹良種繁育有哪些特點？ 74．聯(lián)系我國當(dāng)前茶葉生產(chǎn)存在的問題，闡明茶樹良種繁育的任務(wù)。 75．茶樹良種繁育的途徑有哪些？有何各自特點？ 76．茶樹采穗園的建立應(yīng)注意哪些問題？與茶葉的采葉園相比，采穗園的管理包括哪幾項農(nóng)業(yè)技術(shù)措施？ 77．建立茶樹采種園應(yīng)注意哪幾個環(huán)節(jié)？而采種園的管理應(yīng)采取哪些措施？ 78．分析茶樹品種混雜退化的主要原因，并提出相應(yīng)的防止措施？ 79．從我國茶樹良種推廣現(xiàn)狀，分析為完善茶樹良種推廣工作，應(yīng)遵照哪些準(zhǔn)則？ 80．茶樹品種推廣有哪些方式方法？ 81．為什么要實行茶樹品種區(qū)域化和良種合理布局？如何做？ 82．如何做到茶樹良種與良法配套？ 83．為什么需要建立種質(zhì)資源信息系統(tǒng)？ 84．種質(zhì)資源數(shù)據(jù)庫的目標(biāo)與功能有哪些？ 85．中國作物種質(zhì)信息網(wǎng)——茶種質(zhì)資源數(shù)據(jù)庫能實現(xiàn)哪些管理功能？ 86．種質(zhì)資源信息系統(tǒng)的構(gòu)建一般包括哪幾個步驟？數(shù)據(jù)的搜集應(yīng)注意哪些問題？為什么需要對數(shù)據(jù)進行規(guī)范化處理？ 87．如何實現(xiàn)種質(zhì)資源信息系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)共享？ 88．育種的計算機輔助系統(tǒng)有哪些主要功能與作用？ 89．如何實現(xiàn)利用計算機模擬茶樹群體遺傳？ 90．什么是育種的專家系統(tǒng)？ 91．簡述專家系統(tǒng)的原理與分類。 92．育種專家系統(tǒng)的基本結(jié)構(gòu)有哪些？ 93．育種專家系統(tǒng)的設(shè)計應(yīng)考慮哪些設(shè)計原則？ 94．簡述育種專家系統(tǒng)的開發(fā)的一般步驟。 95．專家系統(tǒng)有哪些開發(fā)方式，舉例說明一個專家系統(tǒng)開發(fā)工具。 96．簡述育種專家系統(tǒng)的知識獲取的方法和過程。 97．結(jié)合所學(xué)內(nèi)容，查閱文獻，談?wù)動嬎銠C技術(shù)在茶樹育種工作中應(yīng)用內(nèi)容與前景。 ？ ？ 。 ？ 。 ？ ？ ？ ，你認(rèn)為那些性狀是必須描述的性狀？