高二生物蛋白質(zhì)和dna技術(shù)-資料下載頁
2024-11-10 06:09本頁面
【導讀】白質(zhì)的提取和分離。第六章蛋白質(zhì)和DNA技術(shù)。②分子本身大小、形狀的不同。2．實驗操作程序。小心加到電泳樣品槽的膠面上。馬斯亮藍R250染色液對凝膠進行染色。脫色：用體積分數(shù)為7%的醋酸。放在兩層透氣玻璃紙中間自然干燥。蛋白質(zhì)只能在凝膠外部移動，移動速度快，用吸管加樣時，應注意正確操作，分。等樣品________時，才加入緩沖液。收集一管，連續(xù)收集。95℃變性，雙鏈DNA解旋為單鏈；72℃延伸，耐高溫的DNA聚合酶有最。大活性，使DNA新鏈由5′端向3′端延伸。A．變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基。D．PCR與細胞內(nèi)DNA復制相比，其所需。引物與DNA模板結(jié)合，形成局部雙鏈。主要來自微生物?；钚詼y定可以植酸鈉作為底物，酸酶等多種蛋白質(zhì)。植酸酶的方法及其依據(jù)。上述菌株中克隆植酸酶基因。變性反應的原理是采用加熱處理。
【正文】 還需要液體環(huán)境 (穩(wěn)定的緩沖液環(huán)境 )、每一步驟需要適宜的溫度及酸堿度 。 ?(4)① PCR的每一輪循環(huán)包括高溫變性 、 低溫復性和中溫延伸三步 ， 從第二輪循環(huán)開始 ， 每次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應 。 ?② DNA的兩條鏈是反向平行的 ， 為了明確地表示 DNA的方向 ， 通常將 DNA的羥基(—OH)末端稱為 3′端 ， 而磷酸基團的末端稱為 5′端 。 DNA聚合酶不能從頭合成 DNA，只能從 3′端延伸 DNA鏈 。 因此 DNA復制需要引物 ， 當引物與 DNA母鏈通過堿基互補配對結(jié)合后 ， DNA聚合酶就能從引物的 3′端開始延伸 DNA鏈 ， DNA的合成方向總是從子鏈的 5′端向 3′端延伸 。 由另一條新合成的 DNA可知 ， A端為 3′端 ， B端為 5′端 ， D端為 3′端 。 ?③ DNA分子在細胞內(nèi)復制或轉(zhuǎn)錄時 ， 在解旋酶的作用下使氫鍵斷裂 ， 而在體外 ，DNA分子是在 80℃ ～ 100℃ 的溫度范圍內(nèi)變性 ， 即雙螺旋解開 ， 成為單鏈；當溫度慢慢降低后 ， 兩條彼此分離的單鏈又會重新結(jié)合形成雙鏈 。 ?在 PCR反應中 ， 以引物為標記 ， 第一次循環(huán)時 ， 以加入的 DNA為模板 ， 兩條 DNA鏈可分別由引物 Ⅰ 和引物 Ⅱ 與其結(jié)合并在DNA聚合酶的作用下延伸 ， 所以形成的每個子 DNA中只有一種引物；從第二次循環(huán)開始 ， 上次產(chǎn)生的 DNA分子又可作為模板參與反應 ， 所以會出現(xiàn) DNA分子兩端均含引物的情況 ， 如圖所示： ?因此題干中所出現(xiàn)的情況是第一次循環(huán)的產(chǎn)物 。 ?答案： (1)氫 解旋 解旋酶 (2)3′ 四種脫氧核苷酸 堿基互補配對原則 (3)溫度 酸堿度 (4)① 高溫變性 低溫復性 中溫延伸 ② 3′端 A、 D ③ 解旋 熱變性 一 ?【 互動探究 】 ?(1)用 于 PCR的引物一般長度為 20～ 30個核苷酸 ， 它的化學本質(zhì)是什么 ？ ?(2)PCR反應中 ， 如果以引物為標記 ， 共有幾種 DNA分子產(chǎn)生 ？ ?提示： (1)引物的作用是與模板鏈結(jié)合 ，提供 3′末端 ， 使 DNA聚合酶能夠催化子鏈的延伸 ， 在生物體內(nèi) DNA復制時 ， 引物一般為一小段 RNA， 但在 PCR反應中 ， 可以是一小段 DNA或 RNA。 ?(2)共有 3種 。 點擊此處進入 隨堂雙基演練
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