pcr抑制劑和增強(qiáng)劑-資料下載頁(yè)
2025-07-26 08:33本頁(yè)面
【正文】 ：通過(guò)瓊脂糖電泳觀察，能夠可重復(fù)性的降低 PCR產(chǎn)量的最低抑制劑濃度。 不添加任何增強(qiáng)劑 PCR體系中加入 400ng/μl BSA PCR體系中加入 150ng/μl gp32 加和不加增強(qiáng)劑的比較 結(jié)果 1 抑制劑 不加增強(qiáng)劑時(shí)的抑制水平 加入增強(qiáng)劑后的抑制水平 增強(qiáng)劑效果 EDTA 1mM 1mM 無(wú)效 FeCl3 1mM 10μM 100倍 bilirubin（膽紅素） 10μg/μl 100μg/μl 10倍，不明顯 Humic acid，Hemin， tannic acid fulvic acid 1ng/μl 100ng/μl 100倍 結(jié)果 2 ? 1. BSA和 gp32都不能減少最小濃度的下列抑制劑的抑制作用： 氯化鈉， SDS， 10%Triton X100， 110μg/μl任何一種膽酸鹽， EDTA。 ? 2. hemin的抑制作用可以被 BSA或 gp32明顯減輕（ 1000倍），但其降解產(chǎn)物 bilirubin卻不能（小于 10倍）。 ? BSA或 gp32時(shí)，抑制水平降低 100倍（ 1mM VS ），在氯化鐵濃度大于 1mM時(shí)，因?yàn)樾纬呻y溶的氫氧化物，釋放氫離子， PCR反應(yīng)體系的 pH隨著氯化鐵濃度的增大迅速降低。沒(méi)有其它抑制劑影響 pH值，即使是在很高的濃度。 ? 、奶牛，豬，馬，綿羊糞便中提取的細(xì)菌片段，從Ohio河、大西洋、 Delaware灣、一片沼澤地、一條淡水河、一條運(yùn)河的過(guò)濾物中的提取物都能抑制 PCR，但加入 BSA或 gp32后， PCR體系的容納能力都可以提高 101000倍。 ? 謝謝
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