【正文】 dapted derivative）；通過對 SAD伯爾尼株進(jìn)行幾代細(xì)胞培養(yǎng)制備SAD B19和SAD P5/88疫苗。 SAG（Street Alabama Gif）2 疫苗是通過使用特定的單克隆抗體、在精氨酸333密碼子連續(xù)2次突變后，從SAD伯爾尼株中選出來的。以下各種目標(biāo)動物（赤狐、犬、貍和北極狐）或非目標(biāo)動物口服了SAG2現(xiàn)場劑量10倍劑量后，未報(bào)告有不良反應(yīng)。這些動物包括：狒狒，包括老鼠在內(nèi)的6種不同的嚙齒動物，鴉科的2個(gè)種，野豬、獾、山羊、雪貂、刺猬以及日間和夜間食肉鳥類。最近在印度開展的有關(guān)圈養(yǎng)流浪犬的試驗(yàn)中，所有通過誘餌口服了凍干SAG2的犬，甚至包括有免疫抑制的犬，都沒有觀察到任何不良反應(yīng)。在效力研究中，赤狐（成年和幼崽）、貍和犬經(jīng)過一次SAG2誘餌免疫后，都經(jīng)受了毒性考驗(yàn)。免疫后的犬的唾液中未檢出感染性SAG2病毒株。誘餌中的SAG2或是以病毒懸浮液的形式裝入一個(gè)膠囊，或是以凍干懸浮液的形式混入誘餌基質(zhì)中，供有犬狂犬病的國家使用。重組活疫苗通過將ERA株糖蛋白的cDNA插入牛痘病毒（哥本哈根株）胸苷激酶基因內(nèi)，制備了一種表達(dá)狂犬病毒糖蛋白基因（VRG）的重組牛痘病毒。口服使用時(shí)（直接滴入口腔或誘餌），10 8 TCID50（組織培養(yǎng)半數(shù)感染量）劑量的VRG可以引出一定滴度的病毒中和抗體，并在一些食肉或雜食的哺乳動物（赤狐、北極狐、叢林狼、浣熊、貍、家犬和金豺）中，形成了針對狂犬病毒的保護(hù)性免疫反應(yīng)。在現(xiàn)場，VRG疫苗株在56176。C以上比較穩(wěn)定，而誘餌外殼的熔點(diǎn)在60176。C以上。表達(dá)VRG的重組病毒沒有狂犬病毒所引起的殘余致病性，但它與親代病毒（人天花疫苗株哥本哈根牛痘病毒）有著相同的基本性質(zhì)。免疫嚴(yán)重低下的小鼠模型顯示，在胸苷激酶位點(diǎn)插入狂犬病糖蛋白基因后，與親代株相比，重組病毒被削弱。對50多種哺乳動物和10種鳥類（許多都是狂犬病毒的主要攜帶者）進(jìn)行了安全性研究，未發(fā)現(xiàn)任何殘余致病性。有關(guān)人的臨床副反應(yīng)的報(bào)告僅有一例，涉及自愈性的皮膚損害。該病例被認(rèn)為對牛痘病毒有較高的易感性，因試圖從犬口中取出已被咬嚼的裝有疫苗的誘餌而暴露于該疫苗。已使用7500多萬劑量的VRG成功地控制或減少了各種野生動物或犬中的狂犬病，如赤狐（比利時(shí)、法國、以色列、盧森堡和烏克蘭）、貍（韓國）、叢林狼、浣熊和灰狐（加拿大和美國）和家犬（斯里蘭卡）（38）。 對獸用疫苗的效力要求獸用滅活狂犬病疫苗專家磋商會建議，對于經(jīng)NIH試驗(yàn)或其他經(jīng)過認(rèn)可的藥典檢測方法檢測后效 IU/劑的滅活獸用疫苗 ，不應(yīng)發(fā)給執(zhí)照或允許其上市，除非通過設(shè)計(jì)恰當(dāng)?shù)脑囼?yàn)證明，疫苗對所要接種動物的保護(hù)時(shí)效能持續(xù)至少1年。滅活注射疫苗被分發(fā)后，應(yīng)間斷地檢測確認(rèn)其效力。如果在適當(dāng)條件下保存，即使是液體形式的滅活疫苗，也是相對穩(wěn)定的。要驗(yàn)證保存條件是否正確，建議用檢測剛出產(chǎn)的產(chǎn)品的方法，對來自現(xiàn)場的臨近失效日期的樣本進(jìn)行檢測（33）。 用于口服免疫的獸用狂犬病疫苗雖然人們已經(jīng)知道了各種改良活病毒和重組疫苗的半數(shù)有效劑量（ED 50），但尚未制定出免疫野生動物所用口服疫苗的最低效力要求。規(guī)定野生動物口服疫苗的最低效力要求很重要，因?yàn)榇罅垦芯恳炎C明，疫苗保護(hù)程度與病毒效價(jià)相關(guān)。批簽發(fā)滴度應(yīng)至少相當(dāng)于100%保護(hù)劑量的10倍。要檢測口服接種用候選疫苗的有效性，就要囚禁足夠數(shù)量的靶動物，對其進(jìn)行接種并用狂犬病毒攻擊。要將疫苗的效力標(biāo)準(zhǔn)量化（如蝕斑形成單位/ml，TCID 50/ml）。當(dāng)在實(shí)驗(yàn)室條件下證明疫苗對靶動物有效時(shí)，應(yīng)將該疫苗放入與現(xiàn)場試驗(yàn)所用誘餌完全相同的誘餌中進(jìn)行接種。通過連續(xù)稀釋檢測的疫苗來確定其ED 50。在對動物通過肌肉注射用野外狂犬病毒進(jìn)行攻擊前，應(yīng)先將動物留置至少612個(gè)月。疫苗接種和病毒攻擊之間的間隔取決于靶動物種群的更新率。估測疫苗的效力，不應(yīng)該完全依賴疫苗在靶動物中誘發(fā)病毒中和抗體的能力；環(huán)境穩(wěn)定性檢測對證明疫苗在現(xiàn)場條件下能夠保持其效力也很必要（見第7節(jié)）。要確保疫苗膠囊在接觸現(xiàn)場高溫時(shí)外層仍有保護(hù)，誘餌外膜要具有耐熱性也很必要，以便確保病毒效價(jià)的穩(wěn)定性。大多數(shù)狂犬病疫苗誘餌在投放后7天消失，大大地減少了可能產(chǎn)生的生物危險(xiǎn)性廢物。 獸用疫苗的安全性 注射用疫苗現(xiàn)在已提出了數(shù)種對滅活狂犬病疫苗進(jìn)行安全性檢測的方法。有關(guān)描述見《狂犬病實(shí)驗(yàn)室技術(shù)》（7）和《陸棲動物診斷檢測和疫苗手冊》（18）。 由于存在導(dǎo)致腦炎的有害作用，應(yīng)考慮停止使用神經(jīng)組織疫苗。必須用最敏感的鑒定方法確認(rèn)滅活疫苗中無活病毒存在。 疫苗成品一定不能含有可檢測出的β丙內(nèi)酯或任何其他滅活劑；Semple疫苗例外，其最終產(chǎn)品中容許含有酚。 專家磋商會建議純度檢測不僅應(yīng)該包括種子病毒物質(zhì)，還應(yīng)包括細(xì)胞培養(yǎng)和疫苗生產(chǎn)中使用的其他生物成分。還建議通過直接將疫苗接種于將要使用該疫苗的動物種類的方法，對新的獸用狂犬病疫苗進(jìn)行安全性檢測。通常用于此類檢測的動物數(shù)量都不足以顯示出罕見的病毒宿主反應(yīng)，因此，對現(xiàn)場應(yīng)用中出現(xiàn)的任何疫苗相關(guān)問題，都應(yīng)該向國家和國際權(quán)威部門報(bào)告，并進(jìn)行深入的調(diào)查。口服接種疫苗 疫苗株應(yīng)按照為獸用狂犬病疫苗所推薦的程序和國際指南進(jìn)行鑒別定性（39, 40）。要在目標(biāo)物種和非目標(biāo)物種中評價(jià)疫苗的安全性，包括野生嚙齒動物、其他野生和家養(yǎng)物種以及人類以外的靈長類。 疫苗具有與毒株減毒程度相關(guān)的不同的殘余致病性。無論通過何種接種途徑（腦內(nèi)、肌肉內(nèi)或口服），SAD毒株似乎對成年小鼠和其他 嚙齒動物都有致病性。SAD伯爾尼（Berne ）毒株口服接種對狒狒有致病性。 口服、肌肉內(nèi)或腦內(nèi)接種SAG2和VRG疫苗，對成年小鼠和其他一些野生 嚙齒動物沒有致病性。此外，數(shù)項(xiàng)研究顯示，這些疫苗對大量的哺乳動物（包括多數(shù)貯主動物）不具致病性。美國的一例病例還報(bào)告了牛痘源性病毒的低殘余致病性，該病例為一位接種了VRG病毒疫苗的孕婦。其臨床癥狀包括持續(xù)10天的腫脹和紅斑，隨后癥狀消退。應(yīng)檢查目標(biāo)動物唾液中排出候選疫苗病毒的可能性。接種后最多34天之后，不應(yīng)再檢測出病毒。發(fā)現(xiàn)的任何病毒都應(yīng)該用分子技術(shù)或單克隆抗體進(jìn)行定性。降低疫苗病毒的排出水平對減少非目標(biāo)動物（包括人）感染的機(jī)會非常重要。僅可將已知?dú)堄嘀虏⌒宰畹偷囊呙纾⊿AG2和VRG）用于犬。 當(dāng)口服接種劑量為現(xiàn)場使用推薦劑量的10倍時(shí)，選擇使用的疫苗應(yīng)至少在10只目標(biāo)動物的幼獸（36月齡）中或10周齡以下幼犬（40）中不會引起任何疾病。此外，如果可行的話，應(yīng)對當(dāng)?shù)刈畛Ｒ姷膰X動物（每種至少10只、可能的話50只）口服和肌肉（這可能需要針對不同種類動物、按照體重和個(gè)頭大小使用不同的病毒濃度和體積）接種疫苗的現(xiàn)場劑量（即誘餌中所含的劑量）。如果動物接種后患上或死于狂犬病，應(yīng)對是否應(yīng)用該疫苗進(jìn)行重新評價(jià)。當(dāng)?shù)乜赡軙秤谜T餌的相關(guān)野生或家養(yǎng)動物也應(yīng)按照體重口服給予相應(yīng)現(xiàn)場劑量的疫苗（41, 42）。 從動物接種部位分離出的任何狂犬病毒，都應(yīng)該采用單克隆抗體或分子技術(shù)進(jìn)行定性，以避免發(fā)生疫苗引起的狂犬病。 狂犬病免疫球蛋白目前有3類用于被動免疫的狂犬病生物制品：人狂犬病免疫球蛋白（HRIG）、馬狂犬病免疫球蛋白（ERIG）和從ERIG制成的高純度F （ab180。 ）2產(chǎn)品。附件1對這些制品及其應(yīng)用方法作了描述。的副反應(yīng)。 不鼓勵(lì)在動物中使用。6. 人類狂犬病的預(yù)防 用于預(yù)防人類狂犬病的疫苗，包括暴露前和暴露后預(yù)防的疫苗，都必須符合WHO關(guān)于生產(chǎn)和管理的建議（23?26）。暴露后人狂犬病的預(yù)防措施，應(yīng)在暴露發(fā)生后盡早開始。治療包括用水、肥皂和殺滅病毒的殺菌劑（如聚維酮碘或酒精）徹底清洗傷口至少15分鐘，然后進(jìn)行狂犬病被動免疫和接種有確切效果的細(xì)胞培養(yǎng)或純化雞胚狂犬病疫苗。嚴(yán)重暴露（III類）者的初始治療必須包括遵循WHO 的建議注射狂犬病免疫球蛋白（見附件1）。專家磋商會強(qiáng)烈倡議使用符合WHO 關(guān)于效力、免疫原性、無害性和安全性標(biāo)準(zhǔn)、通過精心設(shè)計(jì)的臨床試驗(yàn)檢測獲得令人滿意結(jié)果的細(xì)胞培養(yǎng)或純化雞胚狂犬病疫苗。 暴露前接種關(guān)于哪些人應(yīng)接受暴露前接種，國家行政部門應(yīng)提供指導(dǎo)。通常暴露前接種應(yīng)提供給有高暴露風(fēng)險(xiǎn)者，如狂犬病診斷或研究實(shí)驗(yàn)室的工作人員、獸醫(yī)、動物管理人員（包括接觸蝙蝠的人員）、動物康復(fù)者、野生動物官員、以及其他生活或旅行到高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)的人（尤其是兒童）。15以下兒童是發(fā)生暴露最多的年齡組，約占犬狂犬病感染地區(qū)發(fā)生的暴露人數(shù)的50%。通過細(xì)胞培養(yǎng)或雞胚生產(chǎn)的疫苗應(yīng)該用于人的暴露前接種。暴露前接種方法為，在第0、 ml的疫苗?？梢匀菰S有幾天的差異。疫苗應(yīng)接種于成人上臂（三角肌區(qū)）和小兒大腿的前外側(cè)部位。疫苗一定不能接種于臀部，因?yàn)槠湮涨闆r難以預(yù)測。（NIH試驗(yàn)）可產(chǎn)生長期記憶細(xì)胞，加強(qiáng)免疫一次后，可提高免疫應(yīng)答水平。正在預(yù)防性服用抗瘧藥或在開始預(yù)防性服用抗瘧藥前不能完成整個(gè)暴露前三劑量系列接種者，應(yīng)通過肌肉注射途徑接受暴露前免疫。如果接種時(shí)病人的免疫狀況可疑，應(yīng)該在完成暴露前三劑量系列接種后，對其針對疫苗的免疫反應(yīng)情況進(jìn)行評估。對有持續(xù)狂犬病暴露風(fēng)險(xiǎn)者，建議定期進(jìn)行加強(qiáng)免疫注射。建議根據(jù)以下指南判斷何時(shí)應(yīng)進(jìn)行加強(qiáng)免疫。 – 所有在診斷或研究實(shí)驗(yàn)室工作或從事疫苗生產(chǎn)而接觸活狂犬病毒的人，都應(yīng)該定期檢測抗體水平，以避免不必要的加強(qiáng)接種。 – 狂犬病研究人員、診斷實(shí)驗(yàn)室工作人員（病毒持續(xù)存在而且濃度較高的場所、以及可能在難以發(fā)現(xiàn)的情況下發(fā)生暴露的場所）等有持續(xù)風(fēng)險(xiǎn)的人，應(yīng)該每6個(gè)月進(jìn)行一次血清檢測。判斷相對的暴露風(fēng)險(xiǎn)和監(jiān)測免疫狀態(tài)，是實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人的職責(zé)。，則建議進(jìn)行加強(qiáng)免疫。– 負(fù)責(zé)的行政部門應(yīng)確保所有風(fēng)險(xiǎn)人群都接受免疫接種，并監(jiān)測血清學(xué)狀況。 應(yīng)完整填寫狂犬病暴露前接種證書，并頒發(fā)給被接種者，指明所采用的疫苗種類和接種方案、疫苗批號和在接種過程中發(fā)生的任何副反應(yīng)（見附件2）。 暴露后預(yù)防 一般事項(xiàng)發(fā)生狂犬病暴露的所有人都應(yīng)該迅速、徹底地清洗其傷口，并正確的使用消毒劑。建議尋求專業(yè)人員的幫助。如果經(jīng)過認(rèn)真的醫(yī)學(xué)診斷認(rèn)為需要的話，隨后應(yīng)進(jìn)行全套的疫苗接種，并使用符合WHO標(biāo)準(zhǔn)的有效疫苗；發(fā)生 III類暴露時(shí)，還應(yīng)進(jìn)行被動免疫。附件1中有關(guān)于暴露后預(yù)防的完整指南。嚴(yán)格遵循WHO推薦的關(guān)于暴露后狂犬病最佳預(yù)防的指南，幾乎可以保證免于感染此病。凡符合WHO 關(guān)于人用狂犬病疫苗生產(chǎn)和管理要求的疫苗都安全、有效，并且沒有與神經(jīng)組織來源的產(chǎn)品相關(guān)的神經(jīng)麻痹副作用。發(fā)生暴露時(shí)，妊娠、嬰兒、老年和同時(shí)患有的其他疾病，并不成為狂犬病暴露后預(yù)防的禁忌癥。人狂犬病可有較長的潛伏期，因此，即使是對在可能的狂犬病暴露后8個(gè)月才來就醫(yī)治療的人，也應(yīng)該像新近發(fā)生暴露的人一樣，給予診斷和治療。 決定是否需要開始暴露后預(yù)防時(shí)應(yīng)考慮的因素有：? 接觸或損傷的性質(zhì)；? 發(fā)生接觸的地區(qū)或該動物的來源地區(qū)存在狂犬?。? 能否取得該動物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查或觀察；? 動物的種類；? 該動物的臨床狀況；? 該動物的接種史、所用疫苗的種類和接種時(shí)間。暴露于貌似健康的動物后是否需要進(jìn)行暴露后預(yù)防，應(yīng)根據(jù)由合格的醫(yī)學(xué)專業(yè)人員所認(rèn)真做出的風(fēng)險(xiǎn)評估結(jié)果而定。進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估應(yīng)考慮上述的標(biāo)準(zhǔn)。咬人動物有狂犬病疫苗接種史并不能確保該動物沒有狂犬病。由于接種方法不當(dāng)或疫苗質(zhì)量不佳、動物健康狀況差、一次劑量的疫苗接種并非一定能給犬提供永久的保護(hù)等等原因，動物疫苗可能失效。犬被激惹后才咬人，不應(yīng)被視為動物沒有狂犬病的保證，因?yàn)楹茈y知道咬人的犬將什么情況視為激惹從而發(fā)起攻擊。如果咬人的動物在狂犬病流行地區(qū)可能是狂犬病病毒攜帶者，則絕不能等實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果出來后再開始暴露后預(yù)防接種，也不能等待觀察到咬人動物出現(xiàn)狂犬病癥狀之后再開始暴露后預(yù)防免疫。傷口的治療和狂犬病生物制品（包括需要時(shí)的被動免疫產(chǎn)品和疫苗）的使用，應(yīng)在暴露發(fā)生后盡快開始。在盡可能的情況下，應(yīng)立即用人道主義手段處死動物，并在可靠的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對其腦進(jìn)行檢查。如果動物不太可能感染了狂犬病，只要能在48小時(shí)內(nèi)得到實(shí)驗(yàn)室結(jié)果，則可在實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果出來之前暫緩治療。如果咬人的動物是能夠捉住的寵物犬或貓，則應(yīng)該對動物觀察10天，最好在獸醫(yī)的監(jiān)督下進(jìn)行。如果犬或貓?jiān)诒┞栋l(fā)生后至少10天都保持健康狀態(tài)，則可以終止預(yù)防措施（43, 44）。犬或貓以外的其他哺乳動物狂犬病的自然史尚不十分清楚，因此10天的觀察期可能不一定適用。人暴露于懷疑有狂犬病的其他種類的哺乳動物（包括蝙蝠和其他參與傳播狂犬病的野生動物）后，應(yīng)該接受暴露后預(yù)防，除非能夠?qū)游锊东@、人道撲殺并立即在一個(gè)可靠的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行檢查。 暴露后預(yù)防證書應(yīng)填寫好暴露后預(yù)防證書并發(fā)給每位疫苗接種者（見附件2）。 暴露后預(yù)防接種的合并癥狂犬病免疫球蛋白注射部位的早期局部反應(yīng)有紅斑；使用人和馬純化免疫球蛋白時(shí)，搔癢并非罕見。已發(fā)表的數(shù)據(jù)顯示，在正確清洗傷口和恰當(dāng)使用抗生素后， 可以在已被感染的動物咬傷傷口內(nèi)安全地注射免疫球蛋白。 馬狂犬病免疫球蛋白目前生產(chǎn)的大多數(shù)ERIG都經(jīng)過高度純化，副反應(yīng)的發(fā)生率明顯下降。與原來可在多達(dá)40%的接種者中引起副反應(yīng)的未純化狂犬病抗血清不同，接受高純化ERIG 的病人的副反應(yīng)率已經(jīng)下降到12%。即使皮膚試驗(yàn)為陰性，也有可能出現(xiàn)包括過敏性反應(yīng)在內(nèi)的嚴(yán)重副反應(yīng)。只有經(jīng)過訓(xùn)練并有相應(yīng)設(shè)備能處理此類副反應(yīng)的醫(yī)務(wù)人員，才能使用ERIG。不推薦使用未純化的狂犬病抗血清。F（ ab180。） 2產(chǎn)品F（ab180。）2片斷是通過將免疫球蛋白用一種蛋白水解酶（胃蛋白酶）裂解、再從Fc片斷中分離出F （ab180。）2片斷而獲得的。目前使用的許多ERIG都是以此種