【正文】 一種新的蛋白質(zhì)的技術(shù)。在該實例中，引起T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的氨基酸序列發(fā)生了改變。 （3）胚胎移植是指將獲得的早期胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的另一個雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。在資料丙實例中，兔甲稱為供體，兔乙稱為受體?！驹囶}點評】本題通過基因工程和胚胎工程知識結(jié)合，主要考查對基礎(chǔ)知識的理解和識記能力。4.【答案】（1）限制性核酸內(nèi)切酶 DNA連接酶 受精卵 表達（2）①b ②b、d（3）N 非姐妹染色單體 4（紅綠熒光胚胎數(shù)量/胚胎總數(shù)） 【解析】（1）基因工程操作過程中需要兩類工具酶：限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶。動物細胞工程的受體細胞一般是受精卵。 （2）由于出現(xiàn)了綠色熒光（D_G_）和紅色熒光（ddgg）的子代胚胎，則親代M中必定均含有d基因，同時可推出M和N的基因型是：Ddgg、DdGg，由此可知第一問選b，第二問選b、d。 （3）由題可知，D與G是連鎖遺傳的，再由第（2）題的分析可知，其基因分析如下圖（左）所示，因此正常情況不會產(chǎn)生紅綠熒光胚胎，除非親代N的在減數(shù)分裂過程中同源染色體發(fā)生了交叉互換，形成如下圖（右）所示的情況。交叉互換后 若親代N產(chǎn)生的配子中重組的配子（dG和Dg）占的比例為x，則dG占的比例為x/2，又因親代M產(chǎn)生兩種比例相等的配子：Dg、dg，則可知子代胚胎中紅綠熒光胚胎的概率為x/4，即：x/4=（紅綠熒光胚胎數(shù)量/胚胎總數(shù)），可推出重組的配子比例為：4紅綠熒光胚胎數(shù)量/胚胎總數(shù)?！军c評】考查基因工程、基因的自由組合定律和減數(shù)分裂等知識，以及理解能力、獲取信息的能力、實驗探究能力和綜合運用能力。命題材料和角度都非常新穎，又恰當(dāng)?shù)靥幚砗昧诵骂}與難題的關(guān)系。既很好地體現(xiàn)了跨模塊結(jié)合的新要求，又充分體現(xiàn)了理科綜合能力測試的魅力。5.【答案】（1）高溫 解旋酶 Aa 母親 減數(shù)分裂 突變后終止密碼子提前出現(xiàn)，翻譯提前終止形成異常蛋白該病可遺傳給后代 患者的β鏈不能被限制性酶切割【解析】（1）PCR是體外擴增DNA的方式，通過高溫的使雙鏈解開，體內(nèi)DNA的復(fù)制則是通過解旋酶使DNA雙鏈解開。（2）由題意可知重度β地中海貧血是隱性遺傳病，突變后的序列可以被剪切成m和s的兩個片段，而正常序列無法被剪切，因此母親、父親、患兒和胎兒的基因型分別為：AA、Aa、aa和Aa，母親和父親的基因型為AA和Aa，生下患兒可能是因此母親的原始生殖細胞通過減數(shù)分裂產(chǎn)生配子時發(fā)生了基因突變。由圖可知，其突變?yōu)橛赡０彐湹腃TC突變成ATC，mRNA上由GAG變成UAG，因此終止密碼子提前出現(xiàn)，使翻譯提前終止。（3）如果這種貧血病可以遺傳給后代，而又能證實不是重型地中海貧血，即β鏈不能被限制性酶切割，則為證明該突變位點就是這種貧血病的致病點提供了有力證據(jù)?！究键c定位】本題以信息題的形式綜合考查了pcr, DNA復(fù)制，基因突變，減數(shù)分裂等相關(guān)知識點及其內(nèi)在聯(lián)系和應(yīng)用，而且第三問則考察學(xué)生發(fā)散性思維的能力，運用知識解決問題的能力，具有一定的創(chuàng)新性。題目個別問題難道較大。6. 【答案】、動物基因工程 ①、② 切割質(zhì)粒、將質(zhì)粒與目的基因重組 、d 、D、F ：遺傳物質(zhì)相同；不同點：表面蛋白質(zhì)不同。差異的原因：因為g導(dǎo)入受體細胞后，目的基因得以表達，合成了致病病毒M的表面蛋白7．【答案】A【解析】提取矮牽牛藍色花的mRNA，逆轉(zhuǎn)錄得到DNA，然后擴增，可獲得大量的基因B，A正確；從基因文庫中獲取目的基因，只要根據(jù)目的基因的相關(guān)信息和基因文庫中的信息進行篩選對比即可，不需要用限制酶進行切割，B錯誤；目的基因與質(zhì)粒的連接需要用DNA連接酶，而不是DNA聚合酶，C錯誤；目的基因需要和運載體連接后形成重組質(zhì)粒再導(dǎo)入，而且應(yīng)該用農(nóng)桿菌進行感染，而不是大腸桿菌，D錯誤。8.【答案】（1）黏性末端 平末端（2）切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同（3）Ecoli T4（4）mRNA（RNA） cDNA （DNA） PCR（5）噬菌體 動植物病毒等（6）未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱【解析】（1）當(dāng)限制酶在它識別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時，產(chǎn)生的是黏性末端，而當(dāng)限制酶在它識別序列的中心軸線處切開時，產(chǎn)生的則是平末端。（2）為使運載體與目的基因相連，不同的限制酶應(yīng)切割出相同的黏性末端，它們必須要能識別相同的核苷酸序列，并且使每條鏈中相同的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。（3）DNA連接酶，根據(jù)酶的來源不同，可以將這些酶分為兩類：一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為Ecoli DNA連接酶；另一類是從T4噬菌體中分離出來的，稱為T4DNA連接酶。（4）反轉(zhuǎn)錄是以RNA為模版來合成DNA的過程?？梢栽隗w外短時間內(nèi)大量擴增DNA的技術(shù)叫PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）（5）基因工程中除質(zhì)粒外，還有λ噬菌體的衍生物、動植物病毒等。（6）大腸桿菌細胞外有細胞壁和細胞膜，能阻止其他物質(zhì)的進入，只能通過Ca2+處理細胞，使細胞處于能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細胞稱為感受態(tài)細胞。9.【答案】（10分）（1）限制性核酸內(nèi)切酶（或限制） 啟動子（2）胰蛋白（3）RNA RAS蛋白【解析】（1）過程①表示基因表達載體的構(gòu)建，在該過程中需要用限制酶對載體進行切割以便于目的基因的插入（限制性核酸內(nèi)切酶，簡稱限制酶，寫其他的不得分）；啟動子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶結(jié)合和識別的位點，RNA聚合酶結(jié)合到該位點，可驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程。（2）過程②表示動物細胞培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中出現(xiàn)接觸抑制后可以用胰蛋白酶處理，使之分散成單個的細胞，之后分裝到其他培養(yǎng)瓶里面進行傳代培養(yǎng)。（3）判斷目的基因是否在受體細胞中轉(zhuǎn)錄，可用分子雜交技術(shù)來進行，從細胞中提取mRNA和用放射性同位素或者熒光標(biāo)記的目的基因單鏈DNA片段進行雜交。根據(jù)題中信息“肺組織細胞中的let7基因表達減弱，癌基因RAS表達就增強，引發(fā)肺癌”導(dǎo)入let7基因后，肺癌細胞受到抑制，說明RAS基因表達減弱，導(dǎo)致細胞中的RAS蛋白質(zhì)含量減少進而導(dǎo)致癌細胞受抑制。10【答案】（1）磷酸二酯鍵，肽鍵（2）專一（3）限制性核酸內(nèi)切酶 （4）啟動子（5）ACD【解析】（1）DNA酶作用的部位是DNA的磷酸二酯鍵，蛋白酶作用的部位是肽鍵。（2）①②過程利用了各種酶催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)的特性，即專一性。（3）DNA要構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要用限制性核酸內(nèi)切酶切割，再與質(zhì)粒重組。（4）RNA聚合酶識別和結(jié)合在基因的啟動子上，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。（5）蛋白酶能特異性的酶解蛋白質(zhì)，分子雜交手段也是利用各物質(zhì)分子結(jié)合的特異性，抑制成熟基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA與催化成熟酶基因的mRNA堿基互補結(jié)合，也具有特異性，光和色素易溶于有機溶劑，與酒精并不是特異性的溶解，所以選ACD。11【答案】（1）脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖（2）平 537bp、790bp、661bp （3）4（4）BamH I 抗生素B 同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D與質(zhì)粒反向鏈接【解析】（1）DNA單鏈中相鄰兩個堿基之間通過“脫氧核糖—磷酸—脫氧核糖”連接。（2）Sma I識別的序列為GGGCCC，切割后會產(chǎn)生平末端；圖1所示的DNA分子中含有兩個Sma I的識別位點，第一個識別位點在左端534bp序列向右三個堿基對的位置；第二個識別位點在右端658bp序列向左三個堿基對的位置，從這兩個位點切割后產(chǎn)生的DNA片段長度分別為534+3，79633，658+3，即得到的DNA片段長度分別為537bp、790bp和661bp。（3）在雜合子體內(nèi)含有基因D和基因d，基因D的序列中含有兩個識別位點，經(jīng)過SmaI完全切割會產(chǎn)生537bp、790bp和661bp三種不同長度的片段，基因d的序列中含有一個識別位點，經(jīng)過切割后會產(chǎn)生1327bp和 661bp兩種長度的片段，綜上，雜合子中分離到該基因的DNA片段經(jīng)過切割后會產(chǎn)生4種不同長度的片段。（4）能夠獲取目的基因并切開質(zhì)粒的限制酶有識別序列為GGATCC的BamH I和識別序列為GATC的Mbo I，若使用Mbo I會同時破壞質(zhì)粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以要用BamH I來切割目的基因和質(zhì)粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于篩選出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌。因為目的基因和運載體是用同種限制酶切割的，目的基因兩端的末端和質(zhì)粒切割后的兩個末端都能進行互補，可能出現(xiàn)目的基因反向連接在運載體上的情況，導(dǎo)致基因D不能正確表達。12. 【答案】　B 【解析】將多個抗凍基因編碼區(qū)相連成能表達的新基因，合成的蛋白質(zhì)為新的蛋白質(zhì)，不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白，故選項B正確；過程①是利用反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因，由于沒有非編碼區(qū)和編碼區(qū)中的內(nèi)含子，不能用于比目魚基因組測序；用作載體的質(zhì)粒，必須具有標(biāo)記基因才能便于檢測和篩選；應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄中目的基因的存在和轉(zhuǎn)錄，但不能檢測是否成功表達，故選項A、C、D錯誤。13.【解析】受體大腸桿菌成功表達腺苷酸脫氨酶，說明每個大腸桿菌細胞至少含有一個重組質(zhì)粒，且每個ada至少指導(dǎo)合成一個腺苷酸脫氨酶分子。重組質(zhì)粒的形成需先用限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒形成相同的黏性末端，再在DNA連接酶的作用下連接起來，連接起來的序列中會 含有限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點。不同的限制性核酸內(nèi)切酶識別位點不同，不是每個限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點都能插入ada，C項錯誤。【答案】C14. 【答案】　B 【解析】　基因工程是在生物體外，通過對DNA分子進行人工“剪切”和“拼接”，對生物的基因進行改造和重新組合，然后導(dǎo)入受體細胞內(nèi)進行無性繁殖，使重組基因在受體細胞內(nèi)表達，產(chǎn)生出人類所需要的基因產(chǎn)物。所以B為基因工程，而A為動物細胞工程，C為誘變育種，D無人為因素不屬于基因工程。15. 【答案】　A【解析】　限制性核酸內(nèi)切酶用于提取目的基因和切割載體，煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)是RNA，不能用限制性核酸內(nèi)切酶切割，A項錯誤；DNA連接酶可以連接具有相同黏性末端的目的基因和載體，B項正確；受體細胞可以是受精卵和體細胞，也可以是去除細胞壁的原生質(zhì)體，C項正確；目的基因為抗除草劑基因，所以未成功導(dǎo)入目的基因的細胞不具有抗除草劑的能力，篩選時應(yīng)該用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因細胞，D項正確。16. 【答案】　A 【解析】抗除草劑基因?qū)氲接筒说娜旧w后則可以通過花粉傳入環(huán)境中；轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物可殺死無抗性昆蟲，對昆蟲的抗性具有選擇作用，所以會導(dǎo)致昆蟲群體抗性基因頻率增加；轉(zhuǎn)基因技術(shù)打破了生殖隔離，動物的生長激素基因轉(zhuǎn)入植物后可以表達；來源于自然界的目的基因?qū)胫参矬w后，可能破壞原有的基因結(jié)構(gòu)，具有不確定性，外源基因也可能通過花粉傳播，使其他植物成為“超級植物”等，所以轉(zhuǎn)基因技術(shù)存在著安全性問題。17【答案】　D【解析】　載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細胞，但由于它和目的基因是相互獨立的，并不能促進目的基因的表達。28 /