【正文】
177。 177。 90 177。 177。 177。 177。120 177。 177。 177。 177。圖16 吸收部位為回腸時香菇多糖的吸收率由圖1416可知藥物的吸收率也隨時間呈增加的趨勢,并且明顯可以看到給藥濃度越低藥物的吸收率越大,mL1時,藥物的吸收率增加的比較緩慢。各個腸段均在濃度最小時( mgmL1)有最大的吸收率。綜上推測香菇多糖是順濃度梯度轉(zhuǎn)運的,屬于被動轉(zhuǎn)運,但香菇多糖不是通過單純擴散透過小腸上皮。 討 論 一、多糖純化方法的選擇 多糖的提取方法有如下幾種:熱水浸提法、酸浸提法、堿浸提法、微波法、復(fù)合酶解法等等,每種方法都存在不足之處。在現(xiàn)有的實驗條件下,本實驗通過脫蛋白﹑脫色和水溶乙醇沉淀等步驟對香菇多糖粗品進行了純化。在提取的過程中要始終保持溶液的pH值為8~9,以避免多糖的降解,醇沉使用的乙醇要確認(rèn)其濃度。二、多糖的含量測定方法目前用的比較普遍的糖類分析方法是比色法,主要有3,5二硝基水楊酸法﹑苯酚硫酸法和蒽酮硫酸法。蒽酮試劑用80%的硫酸顯色效果較好,沸水浴加熱反應(yīng)時間為15min,并且在加入蒽酮試劑時為防止硫酸遇水放熱提前發(fā)生顯色反應(yīng),須在冰水浴中加入蒽酮試劑,蒽酮試劑現(xiàn)用現(xiàn)配效果好。 三、 外翻腸囊法外翻腸囊技術(shù)最初是由英國的Wilson[3]等提出的,該方法是將腸段翻轉(zhuǎn),一端加緊,另一端扎在一個細(xì)管上,觀察藥物通過粘膜層向漿膜層擴散的過程。最初的檢測手段十分落后,僅僅用稱重法來考察。但是由于該方便簡單易行,并且可以同時觀察多個樣品,一次被實驗人員接受。后來有人[4,5,6]將這一方法做了多方面改進,培養(yǎng)液改用多種無機鹽緩沖液維持液體環(huán)境的平衡并且通入氣體,使實驗環(huán)境更加的接近生理環(huán)境,檢測手段也隨著藥物檢測手段的發(fā)展采用了直接檢測的方法來觀察藥物的吸收情況。外翻腸囊法過去用于測定大分子和脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)運,但近來常用于定量測定親水分子在不同位點細(xì)胞旁路的轉(zhuǎn)運和吸收,估計增強劑對他們吸收的影響;也用于測定小腸不同位點的吸收值和進行結(jié)腸的預(yù)實驗等。由于該方法簡便快速,實驗條件容易得到,因此被廣泛的用于口服藥物的初步篩選以及吸收特點研究。 四、香菇多糖小腸吸收機制中藥腸吸收的研究多集中在轉(zhuǎn)運機制和轉(zhuǎn)運部位的研究,其中對黃酮類、皂苷類﹑多酚類和生物堿類等小分子化合物有較多的報道。本次實驗對大鼠的十二指腸、空腸、回腸3個部位分別進行離體的腸吸收實驗,考察香菇多糖(LNT)在大鼠體內(nèi)的腸吸收動力學(xué)特征,結(jié)果發(fā)現(xiàn)香菇多糖在大鼠腸道各部位的吸收沒有部位專屬性;這說明香菇多糖應(yīng)該不是通過某個特定的載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運的,因為一般某種載體都會集中分布在某個特定的部位,如果是通過載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運那么這種載體應(yīng)該均勻的分布在小腸的各個部位。從15min到120min,隨著吸收時間的增加,香菇多糖的累積轉(zhuǎn)運量呈增加趨勢;給藥濃度越低藥物的吸收率越大,藥物吸收無飽和現(xiàn)象,推測香菇多糖是順濃度梯度轉(zhuǎn)運的,即通過被動轉(zhuǎn)運吸收,但香菇多糖不是通過單純擴散透過小腸上皮。結(jié) 論實驗采用蒽酮硫酸法對香菇多糖進行定量分析。該方法精密度和回收率好,可用于吸收實驗的定量分析。本實驗采用大鼠翻轉(zhuǎn)腸囊法考察香菇多糖的小腸吸收情況。研究發(fā)現(xiàn)香菇多糖在小腸各部位的吸收不存在部位特異性;從15min到120min,隨著吸收時間的增加,各個腸段的藥物的累積轉(zhuǎn)運量呈增加趨勢,藥物的吸收率也隨時間呈增加的趨勢;在腸段的各個部位,給藥濃度越低,藥物的吸收率越高。由此推測香菇多糖是順濃度梯度轉(zhuǎn)運的,即通過被動轉(zhuǎn)運吸收,但香菇多糖不是通過單純擴散透過小腸上皮。參考文獻[1] 張曉靜,14(8):495~497[2],首都醫(yī)藥,2004,2:51[3]Wilson TH,Wiseman use of sacs of everted of substances from mucosal to the serosal surface,Journal of Physiology,1954,123:116~121[4]Mossberg absorption in hamster of PH and total on transport in everted sacs,Journal of Physiology 1967,312(5):1327~1332[5]Levens of isolated rat jejunum to angiotensin peptides,Physiology,1986,352(2):559~564[6]沈凱,中國新藥雜志,2003,12(12):988~991[7]王麗霞,[J].浙江林業(yè)科技,2005,25(5):49~53[8]周國英,蘭貴紅,[J].實用預(yù)防醫(yī)學(xué),2004,11(1):203~204[9]于淑池,[J].承德民族師專學(xué),2003,23(2):82~83[10],天津大學(xué)藥物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院[11]念保義,陳銘,[J].化學(xué)工業(yè)與工程技術(shù),2003,24(4):27~28[12]M ash ih i KN,L ange uno therapeutic p ro spects of infection [M].Berlin:Sp ringer V erlag,1990,9(5):132~134[13]劉樹興,齊香君,李敏康,[J].西北輕工業(yè)學(xué)院學(xué)報,2002,20(20):23~25[14]鄭年新,阮金秀,中國藥理學(xué)通報,2000,16(4):403~405致 謝 我的論文是在導(dǎo)師韓翠艷教授的指導(dǎo)下完成的。導(dǎo)師在工作、學(xué)習(xí)等各方面給予了我無私的指導(dǎo)和幫助,特此向韓老師表示最誠摯的感謝。老師平易近人的態(tài)度,嚴(yán)謹(jǐn)求實的工作作風(fēng)和勤懇忘我的工作精神將在今后的學(xué)習(xí)生活中引導(dǎo)我不斷探索前進。再次向韓老師致以誠摯的謝意和的祝福。 在論文完成期間,得到了齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院藥學(xué)實驗室的大力支持,感謝藥劑實驗室叢歡老師的幫助。 感謝在一起做實驗的同學(xué)程森,朱冬雪,徐佳,以及后來給予我們極大幫助的王偉亭,鮑君等,很慶幸我們能共同生活在這樣一個充滿歡樂的大家庭里!感謝我所有的同學(xué)對我的真誠幫助。感謝齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院藥學(xué)教研室全體老師的幫助。齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院實驗室的各位老師提供了方便條件,特此感謝。最后,對精心審閱論文的各位老師致以最真誠的謝意!25