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冬蟲夏草人工培育技術(shù)知識(shí)-資料下載頁(yè)

2025-06-23 03:19本頁(yè)面
  

【正文】 期,適應(yīng)于弱光和短光照,后期則適應(yīng)于較強(qiáng)光照。在人工培養(yǎng)中,菌絲、分生孢子和子座等具有明顯的趨光性,向陽(yáng)面生長(zhǎng)多而密,背光面生長(zhǎng)稀疏,全黑環(huán)境下培養(yǎng)的各種菌態(tài)纖弱、細(xì)長(zhǎng)、稀疏。(4)對(duì)碳源的利用。冬蟲夏草菌可利用多種碳源,但以葡萄糖和麥芽糖合用時(shí)生長(zhǎng)最快,單用葡萄糖時(shí)也能良好地生長(zhǎng),次之是馬鈴薯等淀粉,再次之是蔗糖。冬蟲夏草菌是一種由寄生活體寄主,再由腐生階段發(fā)育成熟的真菌,所以對(duì)氮源中的多種有機(jī)氮均能較好的利用。而以活蟲體最佳;蛋白胨與酵母膏合用生長(zhǎng)也十分理想,次之是二者單獨(dú)使用,再次之是牛肉膏等。而對(duì)無(wú)機(jī)氮如硫酸銨、硝酸鉀等利用較差。對(duì)灰分養(yǎng)料有一定的需求,在有微量的硫酸鎂、磷酸氫二鉀的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)旺盛,次之是磷酸二氫鉀,其他鈉、鈣、鐵、銅等無(wú)機(jī)鹽也可利用。 冬蟲夏草菌分離純化后,即可作為各種實(shí)驗(yàn)和擴(kuò)大生產(chǎn)應(yīng)用。(1)其擴(kuò)大生產(chǎn)的方法常有三種:固體靜置培養(yǎng)法、振蕩培養(yǎng)法和大罐通氣發(fā)酵培養(yǎng)法。:主要用在固體培養(yǎng),如試管斜面、三角瓶培養(yǎng)、米飯培養(yǎng)等等。在靜置培養(yǎng)中只要掌握好溫度和光照即可使菌正常生長(zhǎng)。當(dāng)斜面上的分生孢子成熟后,即可存入1一2℃的冰箱中保存8一14個(gè)月,也可作為種子直接用于生產(chǎn)。:采用液體培養(yǎng)菌種或小規(guī)模繁殖培養(yǎng),都可用振蕩培養(yǎng)。振蕩培養(yǎng)的培養(yǎng)基,把固體培養(yǎng)基減去瓊脂即可。設(shè)備最好選用恒溫振蕩培養(yǎng)機(jī),用三角瓶置液體培養(yǎng)基,把試管固體菌種接入即可培養(yǎng)。經(jīng)不斷振蕩使液體培養(yǎng)基中各種成分混合均勻而不致沉淀,同時(shí)促進(jìn)氣體與液體接觸和交換,使氧進(jìn)入液體培養(yǎng)基中,利于菌絲生長(zhǎng)和分生孢子形成。:在大規(guī)模生產(chǎn)菌絲和分生孢子等菌粉時(shí),必須用大罐通氣發(fā)酵培養(yǎng)法。該方法通氣是采用吸氣或真空泵減壓等方法,經(jīng)過(guò)濾器除雜菌,送入罐內(nèi)液體培 養(yǎng)基中供冬蟲夏草菌的生長(zhǎng)發(fā)育。(2)發(fā)酵工藝流程。自然冬蟲夏草分離純化→ 試管斜面種→ 振蕩器液體一級(jí) 種→ 二級(jí)種→ 小型種子發(fā)酵種子罐→ 生產(chǎn)發(fā)酵罐 → 濃縮→ 噴粉干燥→ 成品菌粉。冬蟲夏草菌罐中發(fā)酵要求溫度在20一25℃,(),*;注入發(fā)酵罐中的液體培養(yǎng)基為罐容的65%一75%為宜。 接種量為10%,攪拌速度為180r/min,培養(yǎng)時(shí)間72一96h,即可放罐濃縮和噴粉。(3)發(fā)酵培養(yǎng)基多用。鮮馬鈴薯 (去皮)8%,蔗糖2%,%,蠶蛹粉1%,%,%。(4)發(fā)酵培養(yǎng)成品標(biāo)準(zhǔn)。分生孢子即幾全脫落母體孢子梗,孢子梗數(shù)量增加不明顯 時(shí),在鏡下計(jì)數(shù)檢查,每毫升含分生孢子18億一25億個(gè);殘?zhí)堑陀?%;,即可成為成品菌液。 把有性型或無(wú)性型的冬蟲夏草菌孢子回接到寄主昆蟲體上,是人工培養(yǎng)有性型冬蟲夏草和復(fù)壯無(wú)性型菌種的關(guān)鍵措施。(1)回接時(shí)期。冬蟲夏草回接關(guān)鍵在于選擇寄主昆蟲抗菌薄弱時(shí)期,一是蛻皮期;二是幼蟲取食活動(dòng)激烈,摩擦損傷率較高時(shí)期。(2)回接方法。又分兩種。:當(dāng)飼養(yǎng)的蝠蛾幼蟲達(dá)4一6齡蟲,有1/3以上的幼蟲蛻皮時(shí),把幼蟲集中,用子囊孢子或者分生孢子對(duì)入5%一10%葡萄糖液噴霧到蟲體或食物上,接種后約30min,菌液在蟲體上略干,把幼蟲放回土壤中任其自然生活。此法感病率高,但缺點(diǎn)是,幼蟲不易從土中取出集中,而且集中時(shí)幼蟲有互相殘殺的習(xí)性,蟲體被咬傷后,易被雜菌感染致死,冬蟲夏草菌絲未充滿體腔時(shí),傷蟲就會(huì)腐爛,不能形成僵蟲 (菌核)。:在大面積半自然土壤中飼養(yǎng)蝠蛾幼蟲,定時(shí)取小樣觀察幼蟲生長(zhǎng)狀況,當(dāng)大部分幼蟲適宜感病時(shí),用飼料植物浸菌液種植和用細(xì)土拌菌接種,均勻撒入養(yǎng)蟲的地表上,然后噴水,使菌滲入土中,幼蟲取食活動(dòng)時(shí)接觸感染。此法寄主感染率不太高,但一經(jīng)感染致病,冬蟲夏草菌長(zhǎng)勢(shì)好,而且未感病的蝠蛾幼蟲能正常生長(zhǎng),繁殖后代。16
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