【正文】 現(xiàn)出變構(gòu)效應(yīng)。13．錯：Edman降解法是多肽鏈N端氨基酸殘基被苯異硫氫酸酯修飾，然后從多肽鏈上切下修飾的殘基，經(jīng)層析鑒定可知N端氨基酸的種類，而余下的多肽鏈仍為一條完整的多肽鏈，被回收后可繼續(xù)進(jìn)行下一輪Edman反應(yīng)，測定N末端第二個氨基酸。反應(yīng)重復(fù)多次就可連續(xù)測出多肽鏈的氨基酸順序。FDNB法（Sanger反應(yīng)）是多肽鏈N末端氨基酸與FDNB（2,4二硝基氟苯）反應(yīng)生成二硝基苯衍生物（DNP蛋白），然后將其進(jìn)行酸水解，打斷所有肽鍵，N末端氨基酸與二硝基苯基結(jié)合牢固，不易被酸水解。水解產(chǎn)物為黃色的N端DNP氨基酸和各種游離氨基酸。將DNP氨基酸抽提出來并進(jìn)行鑒定可知N端氨基酸的種類，但不能測出其后氨基酸的序列。14．對：大多數(shù)氨基酸的α碳原子上都有一個自由氨基和一個自由羧基，但脯氨酸和羥脯氨酸的α碳原子上連接的氨基氮與側(cè)鏈的末端碳共價結(jié)合形成環(huán)式結(jié)構(gòu)，所以不是自由氨基。15．對：蛋白質(zhì)是由氨基酸組成的大分子，有些氨基酸的R側(cè)鏈具有可解離基團，如羧基、氨基、咪唑基等等。這些基團有的可釋放H+ ,有的可接受H+ ,所以使得蛋白質(zhì)分子即是酸又是堿，是兩性電解質(zhì)。蛋白質(zhì)分子中可解離R基團的種類和數(shù)量決定了蛋白質(zhì)提供和接受H+ 的能力，即決定了它的酸堿性質(zhì)。16．對：在具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)分子中，每個具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈?zhǔn)且粋€亞基。17．錯：具有兩個或兩個以上肽鍵的物質(zhì)才具有類似于雙縮脲的結(jié)構(gòu)，具有雙縮脲反應(yīng)，而二肽只具有一個肽鍵，所以不具有雙縮脲反應(yīng)。18．錯：二硫鍵是由兩個半胱氨酸的巰基脫氫氧化而形成的，所以兩個半胱氨酸只能形成一個二硫鍵。19．對：鹽析引起的蛋白質(zhì)沉淀是由于大量的中性鹽破壞了蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定因素（蛋白質(zhì)分子表面的水化膜及所帶同性電荷互相排斥），從而使蛋白質(zhì)溶解度降低并沉淀，但并未破壞蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，所以不引起變性。根據(jù)不同蛋白質(zhì)鹽析所需的鹽飽和度分段鹽析可將蛋白質(zhì)進(jìn)行分離和純化。20．錯：蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)包括二級結(jié)構(gòu)、三級結(jié)構(gòu)和四級結(jié)構(gòu)三個層次，三級結(jié)構(gòu)只是其中一個層次。21．錯：維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)的作用力有氫鍵、離子鍵、疏水鍵、范德華力以及二硫鍵，其中最重要的是疏水鍵。22．錯：具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，只有所有的亞基以特定的適當(dāng)方式組裝在一起時才具有生物活性，缺少一個亞基或單獨一個亞基存在時都不具有生物活性。23．錯：蛋白質(zhì)變性是由于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象穩(wěn)定的作用力（次級鍵和而硫鍵）被破壞從而使蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)被破壞并山個喪失生物活性的現(xiàn)象。次級鍵被破壞以后，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)松散，原來聚集在分子內(nèi)部的疏水性氨基酸側(cè)鏈伸向外部，減弱了蛋白質(zhì)分子與水分子的相互作用，因而使溶解度將低。24．錯：蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性是由鏈內(nèi)氫鍵維持的，如α螺旋結(jié)構(gòu)和β折疊結(jié)構(gòu)中的氫鍵均起到穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的作用。但并非肽鏈中所有的肽鍵都參與氫鍵的形成，如脯氨酸與相鄰氨基酸形成的肽鍵，以及自由回轉(zhuǎn)中的有些肽鍵不能形成鏈內(nèi)氫鍵。（五） 問答題（解題要點）1．答：蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)指蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸殘基的排列順序。因為蛋白質(zhì)分子肽鏈的排列順序包含了自動形成復(fù)雜的三維結(jié)構(gòu)（即正確的空間構(gòu)象）所需要的全部信息，所以一級結(jié)構(gòu)決定其高級結(jié)構(gòu)。2．答：蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)是指蛋白質(zhì)分子中原子和基團在三維空間上的排列、分布及肽鏈走向。蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)決定蛋白質(zhì)的功能?？臻g結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)各自的功能是相適應(yīng)的。3．答：（1）多肽鏈主鏈繞中心軸旋轉(zhuǎn)，形成棒狀螺旋結(jié)構(gòu)，,.。（2）α螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定主要靠鏈內(nèi)氫鍵，每個氨基酸的N—H與前面第四個氨基酸的C＝O 形成氫鍵。（3）天然蛋白質(zhì)的α螺旋結(jié)構(gòu)大都為右手螺旋。4．答：β折疊結(jié)構(gòu)又稱為β片層結(jié)構(gòu)，它是肽鏈主鏈或某一肽段的一種相當(dāng)伸展的結(jié)構(gòu)，多肽鏈呈扇面狀折疊。（1）兩條或多條幾乎完全伸展的多肽鏈（或肽段）側(cè)向聚集在一起，通過相鄰肽鏈主鏈上的氨基和羰基之間形成的氫鍵連接成片層結(jié)構(gòu)并維持結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。（2）（反平行式）（平行式）。（3）β折疊結(jié)構(gòu)有平行排列和反平行排列兩種。5．答：蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能從根本上來說取決于它的一級結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能是蛋白質(zhì)分子的天然構(gòu)象所具有的屬性或所表現(xiàn)的性質(zhì)。一級結(jié)構(gòu)相同的蛋白質(zhì)，其功能也相同，二者之間有統(tǒng)一性和相適應(yīng)性。6．答：蛋白質(zhì)變性作用是指在某些因素的影響下，蛋白質(zhì)分子的空間構(gòu)象被破壞，并導(dǎo)致其性質(zhì)和生物活性改變的現(xiàn)象。蛋白質(zhì)變性后會發(fā)生以下幾方面的變化：（1）生物活性喪失；（2）理化性質(zhì)的改變，包括：溶解度降低，因為疏水側(cè)鏈基團暴露；結(jié)晶能力喪失；分子形狀改變，由球狀分子變成松散結(jié)構(gòu)，分子不對稱性加大；粘度增加；光學(xué)性質(zhì)發(fā)生改變，如旋光性、紫外吸收光譜等均有所改變。（3）生物化學(xué)性質(zhì)的改變，分子結(jié)構(gòu)伸展松散，易被蛋白酶分解。7．答：維持蛋白質(zhì)空間構(gòu)象穩(wěn)定的作用力是次級鍵，此外，二硫鍵也起一定的作用。當(dāng)某些因素破壞了這些作用力時，蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象即遭到破壞，引起變性。8．答：蛋白質(zhì)的重要作用主要有以下幾方面：（1）生物催化作用 酶是蛋白質(zhì)，具有催化能力，新陳代謝的所有化學(xué)反應(yīng)幾乎都是在酶的催化下進(jìn)行的。（2）結(jié)構(gòu)蛋白 有些蛋白質(zhì)的功能是參與細(xì)胞和組織的建成。（3）運輸功能 如血紅蛋白具有運輸氧的功能。（4）收縮運動 收縮蛋白（如肌動蛋白和肌球蛋白）與肌肉收縮和細(xì)胞運動密切相關(guān)。（5）激素功能 動物體內(nèi)的激素許多是蛋白質(zhì)或多肽，是調(diào)節(jié)新陳代謝的生理活性物質(zhì)。（6）免疫保護(hù)功能 抗體是蛋白質(zhì)，能與特異抗原結(jié)合以清除抗原的作用，具有免疫功能。（7）貯藏蛋白 有些蛋白質(zhì)具有貯藏功能，如植物種子的谷蛋白可供種子萌發(fā)時利用。（8）接受和傳遞信息 生物體中的受體蛋白能專一地接受和傳遞外界的信息。（9）控制生長與分化 有些蛋白參與細(xì)胞生長與分化的調(diào)控。（10）毒蛋白 能引起機體中毒癥狀和死亡的異體蛋白，如細(xì)菌毒素、蛇毒、蝎毒、蓖麻毒素等。9．答：（a）異硫氫酸苯酯；（b）丹黃酰氯；（c）脲、β巰基乙醇；（d）胰凝乳蛋白酶；（e）CNBr。 （f）胰蛋白酶。10．答：（1）可能在7位和19位打彎，因為脯氨酸常出現(xiàn)在打彎處。（2）13位和24位的半胱氨酸可形成二硫鍵。（3）分布在外表面的為極性和帶電荷的殘基：Asp、Gln和Lys；分布在內(nèi)部的是非極性的氨基酸殘基：Try、Leu和Val；Thr盡管有極性，但疏水性也很強，因此，它出現(xiàn)在外表面和內(nèi)部的可能性都有。