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病毒感染的檢查方法與防治原則-資料下載頁(yè)

2025-05-26 13:47本頁(yè)面
  

【正文】 ) 50%組織細(xì)胞感染量 (50% tissue culture infectious dose, TCID50) 概念 : 測(cè)定病毒感染細(xì)胞后引起 50%細(xì)胞病變或 死亡的最小病毒量。 方法 :一般是將病毒懸液作 10倍的系列稀釋,分 別接種細(xì)胞,經(jīng)一定時(shí)間后觀察 CPE、血細(xì)胞吸 附等指標(biāo),以能使 50%細(xì)胞感染的病毒的最高稀 釋度作為終點(diǎn)。最后用統(tǒng)計(jì)方法計(jì)算出 50%組織 細(xì)胞感染量。 用途 : 測(cè)定感染性病毒的量和毒力 分別為 10 10 10 10 10 106倍稀釋度的 HCMV感染的 HEL細(xì)胞 50%組織細(xì)胞感染量 (TCID50) ? 香港大學(xué)專家:患者鼻咽標(biāo)本 → Vero細(xì)胞培養(yǎng)→ CPE → EM觀察: 冠狀病毒 ? 隨后加拿大和美國(guó) CDC等 SARS國(guó)際協(xié)作組的多個(gè)實(shí)驗(yàn)室也培養(yǎng)出了 冠狀病毒 ? 利用 ‘ 免疫熒光法 ’ 將分離病毒與 SARS患者血清進(jìn)行 血清學(xué)檢測(cè) ,反應(yīng)呈 陽(yáng)性 ? 從冠狀病毒基因組的保守區(qū)設(shè)計(jì)引物,采用RTPCR方法從培養(yǎng)上清中擴(kuò)增出了 冠狀病毒基因 → 測(cè)序 → 經(jīng) Genbank數(shù)據(jù)庫(kù)同源性比對(duì),収現(xiàn)同源性為 64%左右 SARS冠狀病毒的分離和鑒定 ? 加拿大專家完成了全基因組測(cè)序 → 収現(xiàn)與已知人和動(dòng)物的冠狀病毒的同源性差異較大 → 確定為 一種新的冠狀病毒 。 ? 荷蘭的病毒學(xué)家:用這種冠狀病毒感染猴子 →出現(xiàn)了與 SARS病人相同的臨床表現(xiàn)和病理特征→ 再次從動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)證實(shí)引起 SARS的病原體是這種冠狀病毒 ? WHO將其命名為 SARS冠狀病毒 SARS冠狀病毒的分離和鑒定 電鏡 免疫熒光 免疫印跡 分子生物學(xué)技術(shù) 核酸雜交 PCR 基因芯片 病毒感染的快速診斷 光鏡 ( 包涵體) 基因測(cè)序 核酸電泳 ELISA 1. 名詞解釋 : cytopathic effect( CPE) hemadsorption( Had) plaque assay, TCID50 2. 分離病毒的標(biāo)本和作血清學(xué)診斷的標(biāo)本各有何要求? 3. 常用的分離培養(yǎng)病毒的方法有哪些?各有何應(yīng)用? 4. 病毒在組織細(xì)胞中增殖的指標(biāo)是什么? 5. 病毒性感染的快速診斷方法有哪些? 思考題
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