細胞增殖和細胞周期修改-資料下載頁
2025-05-14 03:48本頁面
【正文】 式細胞儀測定法 (Flow Cytometry) 細胞周期調控 ?細胞周期中細胞的生化與形態(tài)結構等方面的變化以及相鄰時相間的轉換，均是在細胞本身及環(huán)境因素的嚴格控制下有序進行的； ?細胞周期中存在四個關卡： G1晚期的限制點； G1S轉折的 DNA損傷關卡； G2M轉折的 DNA損傷關卡；細胞離開 M期進入 G1期的有絲分裂中期關卡（或稱紡錘體組裝關卡）； ? G1晚期的限制點：監(jiān)控 G1期細胞大小及環(huán)境中是否有生長因子；當細胞生長到足夠大，并且成功完成 DNA復制準備工作，才不依賴生長因子，可以通過關卡； ? G1S轉折的 DNA損傷關卡：監(jiān)控 DNA是否損傷； ? G2M轉折的 DNA損傷關卡：監(jiān)控 DNA是否損傷及 DNA是否已正確、完全地復制； ? 有絲分裂中期關卡：監(jiān)控姐妹染色體是否已穩(wěn)定地附著在紡錘體上； ? DNA損傷關卡與 DNA損傷后細胞周期停滯有關，使細胞停滯在 G1期或 G2期； 細胞周期調控蛋白質： ?周期蛋白（ cyclin) ?周期蛋白依賴性激酶（ cyclindepend kinase,Cdk)。 ?周期蛋白 周期蛋白依賴性激酶抑制因子（ CKI)。 ?RB及 E2FDP1轉錄因子； ?調節(jié) Cdk磷酸化和去磷酸化的蛋白激酶及磷酸酶； ?泛素 (ubiquitin)和使蛋白質泛素化(ubiquitination)的酶； 細胞蛋白和周期蛋白依賴性激酶： ?周期蛋白是 20世紀 80年代由 Hunt等發(fā)現的一類含量隨不同細胞周期時期升高和降低的蛋白質，可分為 A、 B、 D、 E等； ?細胞周期蛋白的結構：含有保守的 100多個氨基酸殘基的周期蛋白盒，是與 Cdk結合的部位； ?周期蛋白與相應的 Cdk結合成異二聚體，其中周期蛋白是調節(jié)亞基， Cdk是催化亞基； ?周期蛋白 B和 Cdk1的復合物又稱為成熟促進因子 (maturepromoting factor,MPF)； ?Cdk是組成型表達的核內絲 蘇氨酸蛋白激酶，單獨存在無活性，與相應的周期蛋白結合后變構，并被磷酸化和去磷酸化調控才能在活性和失活狀態(tài)間轉換； ?有活性的 Cdk復合物能磷酸化底物蛋白質，如 RB蛋白、轉錄因子、組蛋白、細胞結構蛋白等； ?Cdk復合物的活性還受 CKI抑制； MPF的結構
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