細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期修改-資料下載頁
2025-05-14 03:48本頁面
【正文】 式細(xì)胞儀測定法 (Flow Cytometry) 細(xì)胞周期調(diào)控 ?細(xì)胞周期中細(xì)胞的生化與形態(tài)結(jié)構(gòu)等方面的變化以及相鄰時(shí)相間的轉(zhuǎn)換，均是在細(xì)胞本身及環(huán)境因素的嚴(yán)格控制下有序進(jìn)行的； ?細(xì)胞周期中存在四個(gè)關(guān)卡： G1晚期的限制點(diǎn)； G1S轉(zhuǎn)折的 DNA損傷關(guān)卡； G2M轉(zhuǎn)折的 DNA損傷關(guān)卡；細(xì)胞離開 M期進(jìn)入 G1期的有絲分裂中期關(guān)卡（或稱紡錘體組裝關(guān)卡）； ? G1晚期的限制點(diǎn)：監(jiān)控 G1期細(xì)胞大小及環(huán)境中是否有生長因子；當(dāng)細(xì)胞生長到足夠大，并且成功完成 DNA復(fù)制準(zhǔn)備工作，才不依賴生長因子，可以通過關(guān)卡； ? G1S轉(zhuǎn)折的 DNA損傷關(guān)卡：監(jiān)控 DNA是否損傷； ? G2M轉(zhuǎn)折的 DNA損傷關(guān)卡：監(jiān)控 DNA是否損傷及 DNA是否已正確、完全地復(fù)制； ? 有絲分裂中期關(guān)卡：監(jiān)控姐妹染色體是否已穩(wěn)定地附著在紡錘體上； ? DNA損傷關(guān)卡與 DNA損傷后細(xì)胞周期停滯有關(guān)，使細(xì)胞停滯在 G1期或 G2期； 細(xì)胞周期調(diào)控蛋白質(zhì)： ?周期蛋白（ cyclin) ?周期蛋白依賴性激酶（ cyclindepend kinase,Cdk)。 ?周期蛋白 周期蛋白依賴性激酶抑制因子（ CKI)。 ?RB及 E2FDP1轉(zhuǎn)錄因子； ?調(diào)節(jié) Cdk磷酸化和去磷酸化的蛋白激酶及磷酸酶； ?泛素 (ubiquitin)和使蛋白質(zhì)泛素化(ubiquitination)的酶； 細(xì)胞蛋白和周期蛋白依賴性激酶： ?周期蛋白是 20世紀(jì) 80年代由 Hunt等發(fā)現(xiàn)的一類含量隨不同細(xì)胞周期時(shí)期升高和降低的蛋白質(zhì)，可分為 A、 B、 D、 E等； ?細(xì)胞周期蛋白的結(jié)構(gòu)：含有保守的 100多個(gè)氨基酸殘基的周期蛋白盒，是與 Cdk結(jié)合的部位； ?周期蛋白與相應(yīng)的 Cdk結(jié)合成異二聚體，其中周期蛋白是調(diào)節(jié)亞基， Cdk是催化亞基； ?周期蛋白 B和 Cdk1的復(fù)合物又稱為成熟促進(jìn)因子 (maturepromoting factor,MPF)； ?Cdk是組成型表達(dá)的核內(nèi)絲 蘇氨酸蛋白激酶，單獨(dú)存在無活性，與相應(yīng)的周期蛋白結(jié)合后變構(gòu)，并被磷酸化和去磷酸化調(diào)控才能在活性和失活狀態(tài)間轉(zhuǎn)換； ?有活性的 Cdk復(fù)合物能磷酸化底物蛋白質(zhì)，如 RB蛋白、轉(zhuǎn)錄因子、組蛋白、細(xì)胞結(jié)構(gòu)蛋白等； ?Cdk復(fù)合物的活性還受 CKI抑制； MPF的結(jié)構(gòu)
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