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體上課用ppt課件-資料下載頁(yè)

2025-05-12 05:51本頁(yè)面
  

【正文】 體載體 細(xì)菌人造染色體( Bacterial Artificial Chromosomes BAC) 細(xì)菌人造染色體通常是在大腸桿菌因子 F質(zhì)粒的基礎(chǔ)上 構(gòu)建的,其裝載量范圍在 50 300 kb之間 各種類型的 pBACs在大腸桿菌受體菌只能維持單一拷貝 pBACs主要適用于: 克隆大型基因簇( gene cluster) 結(jié)構(gòu) 構(gòu)建動(dòng)植物基因文庫(kù) 人造染色體載體 酵母人造染色體( Yeast Artificial Chromosomes YAC) YAC載體應(yīng)含有下列元件: 酵母染色體的端粒序列( TEL) 酵母人造染色體的構(gòu)建: pYAC4 CEN4 EcoRI URA3 TEL BamHI TEL ori Apr TRP1 ARS1 酵母染色體的復(fù)制子( ARS) 酵母染色體的著絲粒粒序列 ( CEN) 酵母系統(tǒng)的 選擇標(biāo)記 TRP1,URA3 大腸桿菌的復(fù)制子 大腸桿菌的 選擇標(biāo)記 YAC載體的裝載量為 350 400 kb 人造染色體載體 酵母人造染色體( Yeast Artificial Chromosomes YAC) 酵母人造染色體的使用: pYAC4 CEN EcoRI URA TEL BamHI TEL ori Apr TRP ARS EcoRI EcoRI EcoRI BamHI 連接 轉(zhuǎn)化酵母菌 重組酵母染色體 各種基因工程受體 大腸桿菌 遺傳背景清楚,載體受體系統(tǒng)完備,生長(zhǎng)迅速,培養(yǎng)簡(jiǎn)單,重組子穩(wěn)定 適用于外源 DNA的擴(kuò)增和克隆、原核生物基因的高效表達(dá)、基因文庫(kù)的構(gòu)建,是 DNA重組實(shí)驗(yàn)和基因工程的主要受體菌 產(chǎn)結(jié)構(gòu)復(fù)雜、種類繁多的內(nèi)毒素 各種基因工程受體 枯草桿菌 遺傳背景清楚,蛋白質(zhì)分泌機(jī)制健全 ,生長(zhǎng)迅速,培養(yǎng)簡(jiǎn)單,不產(chǎn)內(nèi)毒素 適用于原核生物基因的克隆、表達(dá)以及重組蛋白多肽的有效分泌 遺傳欠穩(wěn)定,載體受體系統(tǒng)欠完備 各種基因工程受體 酵母菌 具有真核生物的特征,遺傳背景清楚,生長(zhǎng)迅速,培養(yǎng)簡(jiǎn)單,外源基因表達(dá)系統(tǒng)完善,遺傳穩(wěn)定 適用于外源 DNA的擴(kuò)增、克隆以及真核生物基因的高效表達(dá)、基因文庫(kù)的構(gòu)建、真核生物基因表達(dá)調(diào)控的研究,是DNA重組實(shí)驗(yàn)和基因工程重要的真核性受體菌 內(nèi)源性蛋白產(chǎn)物種類繁多且含量高 各種基因工程受體 哺乳動(dòng)物細(xì)胞(中國(guó) 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 CHO) 與人的親緣關(guān)系近,分子重組表達(dá)系統(tǒng)健全,具有合適的糖基化修飾系統(tǒng) 適用于哺乳類動(dòng)物和人的基因表達(dá)調(diào)控研究、基因藥物的生產(chǎn),是 DNA重組實(shí)驗(yàn)和基因工程的主要哺乳動(dòng)物受體 細(xì)胞培養(yǎng)條件苛刻,生長(zhǎng)緩慢 各種基因工程受體 植物細(xì)胞(擬南芥、煙草 ) 農(nóng)作物的經(jīng)濟(jì)意義重大,轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞易于分化,細(xì)胞培養(yǎng)簡(jiǎn)單且成本低廉,具有光合作用 適用于高等植物基因表達(dá)調(diào)控的研究、基因藥物的生產(chǎn),農(nóng)作物品質(zhì)的改良 遺傳操作繁瑣 實(shí)驗(yàn)室常用的基因工程受體 大腸桿菌 用于接受質(zhì)粒: C600、 W31 HB10 JM8 JM101( Aps、 Tcs、 Cms) 用于接受 lDNA: LE39 ED8654 酵母菌 哺乳動(dòng)物細(xì)胞 CHO 畢赤酵母 啤酒酵母
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