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2025-06-14 05:51上一頁面

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【正文】 IH in d IIIH in d IIB al IAprpBR322: 拷貝數(shù) 50 100 / cell 用于基因克隆,6KB片段而不影響其功能 質(zhì)粒 重要的大腸桿菌質(zhì)粒載體 pUC18 / 19: 拷貝數(shù) 2022 3000 / cell 用于基因克隆和測序 裝有多克隆位點( MCS) 正選擇顏色標記 lacZ’ B a m HIpU C 182 6 8 6 b pAprl a c Z39。 因此縮短野生型 lDNA的長度 , 可以提高裝載量 。 這些包裝蛋白通常分為相互互補的兩部分:一部分缺少 E組份 , 另一部分則缺少 D組份 。 目前常用的人造染色體載體包括: 細菌人造染色體( BAC) 酵母人造染色體( YAC) 人造染色體載體 細菌人造染色體( Bacterial Artificial Chromosomes BAC) 細菌人造染色體通常是在大腸桿菌因子 F質(zhì)粒的基礎(chǔ)上 構(gòu)建的,其裝載量范圍在 50 300 kb之間 各種類型的 pBACs在大腸桿菌受體菌只能維持單一拷貝 pBACs主要適用于: 克隆大型基因簇( gene cluster) 結(jié)構(gòu) 構(gòu)建動植物基因文庫 人造染色體載體 酵母人造染色體( Yeast Artificial Chromosomes YAC) YAC載體應(yīng)含有下列元件: 酵母染色體的端粒序列( TEL) 酵母人造染色體的構(gòu)建: pYAC4 CEN4 EcoRI URA3 TEL BamHI TEL ori Apr TRP1 ARS1 酵母染色體的復(fù)制子( ARS) 酵母染色體的著絲粒粒序列 ( CEN) 酵母系統(tǒng)的 選擇標記 TRP1,URA3 大腸桿菌的復(fù)制子 大腸桿菌的 選擇標記 YAC載體的裝載量為 350 400 kb 人造染色體載體 酵母人造染色體( Yeast Artificial Chromosomes YAC) 酵母人造染色體的使用: pYAC4 CEN EcoRI URA TEL BamHI TEL ori Apr TRP ARS EcoRI EcoRI EcoRI BamHI 連接 轉(zhuǎn)化酵母菌 重組酵母染色體 各種基因工程受體 大腸桿菌 遺傳背景清楚,載體受體系統(tǒng)完備,生長迅速,培養(yǎng)簡單,重組子穩(wěn)定 適用于外源 DNA的擴增和克隆、原核生物基因的高效表達、基因文庫的構(gòu)建,是 DNA重組實驗和基因工程的主要受體菌 產(chǎn)結(jié)構(gòu)復(fù)雜、種類繁多的內(nèi)毒素 各種基因工程受體 枯草桿菌 遺傳背景清楚,蛋白質(zhì)分泌機制健全 ,生長迅速,培養(yǎng)簡單,不產(chǎn)內(nèi)毒素 適用于原核生物基因的克隆、表達以及重組蛋白多肽的有效分泌 遺傳欠穩(wěn)定,載體受體系統(tǒng)欠完備 各種基因工程受體 酵母菌 具有真核生物的特征,遺傳背景清楚,生長迅速,培養(yǎng)簡單,外源基因表達系統(tǒng)完善,遺傳穩(wěn)定 適用于外源 DNA的擴增、克隆以及真核生物基因的高效表達、基因文庫的構(gòu)建、真核生物基因表達調(diào)控的研究,是DNA重組實驗和基因工程重要的真核性受體菌 內(nèi)源性蛋白產(chǎn)物種類繁多且含量高 各種基因工程受體 哺乳動物細胞(中國 倉鼠卵巢細胞 CHO) 與人的親緣關(guān)系近,分子重組表達系統(tǒng)健全,具有合適的糖基化修飾系統(tǒng) 適用于哺乳類動物和人的基因表
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