體上課用ppt課件(參考版)
2025-05-15 05:51本頁面
【正文】 目前常用的人造染色體載體包括： 細(xì)菌人造染色體（ BAC） 酵母人造染色體（ YAC） 人造染色體載體 細(xì)菌人造染色體（ Bacterial Artificial Chromosomes BAC） 細(xì)菌人造染色體通常是在大腸桿菌因子 F質(zhì)粒的基礎(chǔ)上 構(gòu)建的，其裝載量范圍在 50 300 kb之間 各種類型的 pBACs在大腸桿菌受體菌只能維持單一拷貝 pBACs主要適用于： 克隆大型基因簇（ gene cluster） 結(jié)構(gòu) 構(gòu)建動(dòng)植物基因文庫 人造染色體載體 酵母人造染色體（ Yeast Artificial Chromosomes YAC） YAC載體應(yīng)含有下列元件： 酵母染色體的端粒序列（ TEL） 酵母人造染色體的構(gòu)建： pYAC4 CEN4 EcoRI URA3 TEL BamHI TEL ori Apr TRP1 ARS1 酵母染色體的復(fù)制子（ ARS） 酵母染色體的著絲粒粒序列 （ CEN） 酵母系統(tǒng)的 選擇標(biāo)記 TRP1,URA3 大腸桿菌的復(fù)制子 大腸桿菌的 選擇標(biāo)記 YAC載體的裝載量為 350 400 kb 人造染色體載體 酵母人造染色體（ Yeast Artificial Chromosomes YAC） 酵母人造染色體的使用： pYAC4 CEN EcoRI URA TEL BamHI TEL ori Apr TRP ARS EcoRI EcoRI EcoRI BamHI 連接 轉(zhuǎn)化酵母菌 重組酵母染色體 各種基因工程受體 大腸桿菌 遺傳背景清楚，載體受體系統(tǒng)完備，生長迅速，培養(yǎng)簡單，重組子穩(wěn)定 適用于外源 DNA的擴(kuò)增和克隆、原核生物基因的高效表達(dá)、基因文庫的構(gòu)建，是 DNA重組實(shí)驗(yàn)和基因工程的主要受體菌 產(chǎn)結(jié)構(gòu)復(fù)雜、種類繁多的內(nèi)毒素 各種基因工程受體 枯草桿菌 遺傳背景清楚，蛋白質(zhì)分泌機(jī)制健全 ，生長迅速，培養(yǎng)簡單，不產(chǎn)內(nèi)毒素 適用于原核生物基因的克隆、表達(dá)以及重組蛋白多肽的有效分泌 遺傳欠穩(wěn)定，載體受體系統(tǒng)欠完備 各種基因工程受體 酵母菌 具有真核生物的特征，遺傳背景清楚，生長迅速，培養(yǎng)簡單，外源基因表達(dá)系統(tǒng)完善，遺傳穩(wěn)定 適用于外源 DNA的擴(kuò)增、克隆以及真核生物基因的高效表達(dá)、基因文庫的構(gòu)建、真核生物基因表達(dá)調(diào)控的研究，是DNA重組實(shí)驗(yàn)和基因工程重要的真核性受體菌 內(nèi)源性蛋白產(chǎn)物種類繁多且含量高 各種基因工程受體 哺乳動(dòng)物細(xì)胞（中國 倉鼠卵巢細(xì)胞 CHO） 與人的親緣關(guān)系近，分子重組表達(dá)系統(tǒng)健全，具有合適的糖基化修飾系統(tǒng) 適用于哺乳類動(dòng)物和人的基因表達(dá)調(diào)控研究、基因藥物的生產(chǎn)，是 DNA重組實(shí)驗(yàn)和基因工程的主要哺乳動(dòng)物受體 細(xì)胞培養(yǎng)條件苛刻，生長緩慢 各種基因工程受體 植物細(xì)胞（擬南芥、煙草 ） 農(nóng)作物的經(jīng)濟(jì)意義重大，轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞易于分化，細(xì)胞培養(yǎng)簡單且成本低廉，具有光合作用 適用于高等植物基因表達(dá)調(diào)控的研究、基因藥物的生產(chǎn)，農(nóng)作物品質(zhì)的改良 遺傳操作繁瑣 實(shí)驗(yàn)室常用的基因工程受體 大腸桿菌 用于接受質(zhì)粒： C600、 W31 HB10 JM8 JM101（ Aps、 Tcs、 Cms） 用于接受
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