原料的預處理ppt課件-資料下載頁
2025-05-06 18:01本頁面
【正文】 料，可用緩沖液、稀酸、稀堿或有機溶劑等抽提有效成分，甚至還可以用蒸餾水直接抽提。 ?理想的抽提溶液一般應具備如下特點：對有效成分溶解度大而破壞性?。粚﹄s質(zhì)不溶解或溶解度很??；來源廣泛、價格低廉、操作安全等。抽提的原則是“少量多次”，即對于等量的用于抽提的溶液，分多次抽提比一次抽提效果要好。 ? 四、 TP的初級分離 ? TP的初級分離是指清除大量非 TP。常用的方法主要有沉淀法、超濾法和透析法等。 ?（一）沉淀法 ? 沉淀法也稱溶解度法，其純化生物成分的基本原理是：根據(jù)各種物質(zhì)的結構差異，如蛋白質(zhì)分子表面疏水集團和親水集團之間比例的差異等，來改變?nèi)芤旱膒H、極性、離子強度和金屬離子等，使抽提液中有效成分的溶解度發(fā)生改變，從而分離出有效成分。 ?（二）超濾法 ? 超濾法是通過在溶液的表面施加一定的壓力，并通過一種特別的薄膜對溶液中各種溶質(zhì)分子進行選擇性過濾的純化方法。在一定壓力下，溶液中的溶劑和小分子可透過選擇性薄膜，而大分子則受阻而被截留。 ?（三）透析法 ? 透析法是指將待處理的溶液放于具有半透膜性質(zhì)的玻璃紙袋中，然后將紙袋放在水中或適當?shù)碗x子強度的緩沖液中，無機鹽及一些小分子的代謝產(chǎn)物，由于擴散作用通過半透膜而被去除 ,TP則仍然保留在袋中。 ? 五、預處理應用范例 ? （一）從乳牛胸腺中提取胸腺素 ? 從乳牛胸腺中提取胸腺素的基本過程是：對所選取的新鮮、健康乳牛胸部的胸腺去脂肪、去結締組織和去血污后，用無菌水洗滌，經(jīng)－ 20℃ 冷凍保存，剪碎，加滅菌生理鹽水，勻漿，再于－ 20℃ 反復凍融，用HCI調(diào)節(jié) pH，室溫抽提并離心，取上清液，調(diào) pH至中性，置 80℃ 水浴保溫 20 min，然后驟冷離心，收集上清液，獲粗提液。最后采用超濾膜過濾，對收集到的超濾液進行 DEAEC柱吸附層析，線性梯度洗脫，獲得較純的胸腺素。 ? （二）從黏質(zhì)沙雷氏菌中提取基因組 DNA ? 黏質(zhì)沙雷氏菌（ Serratia nucrcescens）是一類產(chǎn)幾丁質(zhì)酶的高產(chǎn)菌株，對具幾丁質(zhì)酶基因組的提取具有重要開發(fā)應用價值?；蚪M DNA的上游合成和小量制備的預處理過程如下：挑取黏質(zhì)沙雷氏菌的單克隆細菌培養(yǎng)物培養(yǎng)至對數(shù)生長期，取培養(yǎng)物離心 2 min；沉淀物加緩沖液，用氣體反復吹打使之重懸后，加入 SDS和蛋白酶 K,混勻，經(jīng) 37℃ 水浴孵化后，加入高濃度 NaCl混勻，再加入 CTAB/NaCl溶液，混勻，再經(jīng) 65℃ 水浴保溫；加入等體積的氯仿／異戊醇，混勻，離心，離心取清液；加入等體積的酚／氯仿／異戊醇，混勻，離心，再取上清液；加入異丙醇，混合，離心得到 DNA沉淀；用 70％的乙醇洗滌沉淀并凍干以用于后續(xù)純化。 ? （三）從桑葉中提取 1一脫氧野尻霉素 ? 1－脫氧野尻霉素 (1deoxynojirimycin, DNJ)是一種呱啶生物堿，在桑屬植物中含量較高。它能抑制 α－葡萄糖苷酶的活性，且與醫(yī)藥中的口服降血糖藥對 α－葡萄糖苷酶的抑制作用相似，不僅可以用于降血糖、降血脂，還具抗病毒、抗腫瘤轉移等多種藥理活性。其衍生物 N－羥乙基－ 1－脫氧野尻霉已被成功地開發(fā)為治療糖尿病的新藥－米格列醇，由于其高效低毒，可使患者擺脫磺酰脲、胰島素等藥物帶來的許多不良反應。 ? 桑葉是提取 DNJ的重要原料，其含量約為 %。此外，桑根皮中 DNJ含量約為 ％。提取 DNJ的基本方法是：取新鮮的桑葉，放入塑料袋中防止失水，干燥后于 HCl溶液提取，離心；取粗提液，純化。
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