【導(dǎo)讀】基因克隆的通用策略:涉及的過(guò)程可用分/合成、切、連、轉(zhuǎn)、選、鑒。分子上,形成重組DNA分子;③將重組DNA分子轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞,并與之一起增殖;④從大量的細(xì)胞繁殖群體中,篩選出獲得了細(xì)胞重組DNA分子的受體細(xì)胞克隆;⑤從篩選出來(lái)的受體細(xì)胞克隆,提取出已經(jīng)得到擴(kuò)增的目的基因,供進(jìn)一步分析研究使用;生出人類(lèi)所需要的物質(zhì)。單鏈核酸內(nèi)切酶。DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的核苷酸內(nèi)切酶。被相應(yīng)的限制酶所切割。但有些同裂酶對(duì)甲基化位點(diǎn)的敏感性不同。④DNA的分子結(jié)構(gòu)。性稱(chēng)為星星活性。②T4DNA連接酶的用量:平末端DNA分子的連接反應(yīng)中,最適1~2個(gè)單位。DNA片斷之間的連接,酶濃度個(gè)單位。在大腸桿菌細(xì)胞中正常轉(zhuǎn)錄并轉(zhuǎn)譯成相應(yīng)蛋白質(zhì)的克隆載體。細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到另外一種宿主內(nèi),這種轉(zhuǎn)移依賴于質(zhì)粒上的tra基因產(chǎn)物。