【正文】 的數(shù)據(jù) 。 定量分析 “ Acquire Mode”菜單中選擇 [Quantitative]，進(jìn)入 Quantitative模式，會(huì)自動(dòng)顯示 Quantitative參數(shù)對(duì)話框。 2所示確定獲得參數(shù) 當(dāng)在 method 下方選擇“ Multi Point Working Curve”時(shí)，會(huì)出現(xiàn) Multi Point Curve對(duì)話框。按圖 3所示進(jìn)行選擇。 Quantitative Peramelers Method: Concentration Multi point Working Curve Units: ppb EX Wavelength: Range: to EM Wavelength: Recording Range Slit Width [nm]: EX 5 EM 5 Low High Sensitivity: ⊙ High ○ Low Response Time: Auto □ Auto Scan Mode Repetitions: 1 OK Cancel 圖 2 Multipoint Working Curve Order of Curve… ⊙ Ist ○ 2nd ○ 3rd Zero lnterception… ○ yes ⊙ No OK Cancel 圖 3 OK鍵。 ， 點(diǎn)擊 Auto Zero設(shè)定零點(diǎn) 。 Read，會(huì)出現(xiàn) Standard Sample Data Edit對(duì)話框。輸入 標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)樣的濃度值 并點(diǎn)擊 OK鍵。 。一旦獲得了足夠多的標(biāo)準(zhǔn)樣數(shù)據(jù)，在屏幕上便會(huì) 自動(dòng)出現(xiàn)工作曲線 。點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵，在出現(xiàn)的菜單中選擇 [Rader]→[Both Axes] ，便可自動(dòng)繪圖。 ， 可定量確定未知樣的濃度 。點(diǎn)擊Unknown鍵，出現(xiàn) Unknown Avquisition 屏幕。 ，點(diǎn)擊 Read開始濃度的定量測定。 File菜單中選擇 Save，儲(chǔ)存獲得的數(shù)據(jù)。 ，點(diǎn)擊 OK鍵。 時(shí)間程序 “ Acquire Mode”菜單中選擇 [Time Course]，進(jìn)入Time Course 數(shù)據(jù)獲取模式，會(huì)自動(dòng)顯示 Time Course 參數(shù)對(duì)話框。 4所示確定獲得參數(shù)。 OK鍵。 ，點(diǎn)擊 Auto Zero設(shè)定零點(diǎn)。以下步驟是基于時(shí)間進(jìn)程數(shù)據(jù)是在菡餾水的Raman峰的基礎(chǔ)上獲得的假設(shè)。 Start鍵開始收集數(shù)據(jù)。在數(shù)據(jù)收集完之后，出現(xiàn)File Name對(duì)話框，輸入獲得的數(shù)據(jù)的文件名。移動(dòng)光標(biāo)至文本框，輸入注釋。當(dāng)所有輸入完成后，點(diǎn)擊Save保存數(shù)據(jù)，若點(diǎn)擊 Discerd，所有輸入的數(shù)據(jù)將丟失。 File菜單重選擇 Save，儲(chǔ)存獲得的數(shù)據(jù)。 Time Course Paremeters EX Wavelength: Recording Range EM Wavelength: Low: 5 High: 5 Slit Width (nm): EX 5 EM 5 Sensttivity: ⊙ High ○ Low Response Time: Auto Reaction Time: Timing Mode Units… Acquisition Rate: ⊙ Auto ○ Manual ○ Hours Number of Readings: 3001 ○ Miuntes ⊙ Seconds OK Cancel 圖 4 注意事項(xiàng) 500小時(shí)，超過使用時(shí)間必須更換，否則可能爆炸。 ，應(yīng)將光度計(jì)開關(guān)旁邊的氙燈開關(guān)撥到關(guān)的位置。 ，小心放入樣品，放入比色皿前一定要先用擦鏡紙將比色皿外表面擦干凈，否則會(huì)污染樣品池和光度計(jì)外表面。 ，各面均為光滑平面，使用時(shí)應(yīng)手持比色皿對(duì)角的棱，不要讓手碰到任何一面。 ，應(yīng)用鉻酸洗液泡洗一次。 ，不要打開樣品室蓋。 ，所有數(shù)據(jù)要保存都必須點(diǎn)擊“ Save”或者“ Save As”進(jìn)行另存。否則數(shù)據(jù)會(huì)丟失。 謝謝！ 溶劑 pH值對(duì)光譜的影響 pH的改變可能引起共軛體系的延長或縮短，從而引起吸收峰位置的改變，對(duì)一些不飽和酸、烯醇、酚、及苯胺類化合物的紫外光譜影響很大。如果化合物溶液從中性變?yōu)閴A性時(shí)，吸收峰發(fā)生紅移，表明該化合物為酸性物質(zhì)；如果化合物溶液從中性變?yōu)樗嵝詴r(shí)，吸收峰發(fā)生藍(lán)移，表明化合物可能為芳胺。 （ a）苯酚的 UV光譜圖 （ b）苯胺的 UV光譜圖 溶液酸堿性對(duì)紫外光譜的影響 環(huán)境極性的影響 ? Blue shift of spectra in polar solvent ? Weaker absorption of Tyr in polar solvent Local electric fields cause spectral shifts Gas phase m m* solvent Solvent can affect the ground state and excited state molecules causing spectral shift Example: H bonding to tryptophan. Changes its absorption by about 10 nm