半抗原免疫分析全面-資料下載頁
2025-04-29 05:01本頁面
【正文】 22/5/26 33 最 常用的標(biāo)記酶 1． 辣根過氧化物酶 (HRP):約有 50％的 EIA使用此酶。 2．堿性磷酸酯酶 (AP):AP標(biāo)記的結(jié)合物性質(zhì)穩(wěn)定，其活性可用分光光度計或熒光計測量。 3． 6磷酸葡萄糖脫氫酶 (G6PD): 通常用于均相 EIA。 4． β半乳糖苷酶 (β Gal): 適用于均相 EIA和非均相EIA。 5．蘋果酸脫氫酶 (MDH): 多用于尿樣的均相 EIA。 最常用的底物 ? 鄰苯二酚 (OPC) ? 四甲基聯(lián)苯胺 (TMB) 緩沖液 ? PBS(T) ? TrisHCl ? Na3N是 HRP（辣根過氧化物酶）的抑制劑 酶標(biāo)儀 儀器 酶標(biāo)儀 （三） 免疫分析方法建立 —— 蘇丹紅為例 Step 1: Hapten and conjugate Step 2: characterization of conjugate Step 3: chessboard tiatrion and calibration curve Step 4: optimization—nonessential 例 標(biāo)記抗原濃度對檢測的影響 43 例， pH影響 Step 5: sample analysis Step 6: validation 一個難點：基質(zhì)效應(yīng) 基質(zhì)效應(yīng) ? 基質(zhì) ：樣品中除了目標(biāo)分析物外還含有其他的物質(zhì)，這些物質(zhì)可能會對檢測結(jié)果造成干擾，這些干擾成分稱為基質(zhì)，其干擾稱為基質(zhì)效應(yīng)(matrix effect) ? （ 1）基質(zhì)來源 ? 水、土壤的腐殖質(zhì) ? 食品中的蛋白、脂肪等 ? 溶液中作為促溶的有機溶劑等 例 1：環(huán)境水樣的基質(zhì)效應(yīng) 49 （ 2）基質(zhì)干擾的消除 ? 掩蔽劑（緩沖液調(diào)整） ? 樣品稀釋 ? 樣品前處理：凈化 50
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