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半抗原免疫分析全面-資料下載頁

2025-04-29 05:01本頁面
  

【正文】 22/5/26 33 最 常用的標記酶 1. 辣根過氧化物酶 (HRP):約有 50%的 EIA使用此酶。 2.堿性磷酸酯酶 (AP):AP標記的結合物性質穩(wěn)定,其活性可用分光光度計或熒光計測量。 3. 6磷酸葡萄糖脫氫酶 (G6PD): 通常用于均相 EIA。 4. β半乳糖苷酶 (β Gal): 適用于均相 EIA和非均相EIA。 5.蘋果酸脫氫酶 (MDH): 多用于尿樣的均相 EIA。 最常用的底物 ? 鄰苯二酚 (OPC) ? 四甲基聯(lián)苯胺 (TMB) 緩沖液 ? PBS(T) ? TrisHCl ? Na3N是 HRP(辣根過氧化物酶)的抑制劑 酶標儀 儀器 酶標儀 (三) 免疫分析方法建立 —— 蘇丹紅為例 Step 1: Hapten and conjugate Step 2: characterization of conjugate Step 3: chessboard tiatrion and calibration curve Step 4: optimization—nonessential 例 標記抗原濃度對檢測的影響 43 例, pH影響 Step 5: sample analysis Step 6: validation 一個難點:基質效應 基質效應 ? 基質 :樣品中除了目標分析物外還含有其他的物質,這些物質可能會對檢測結果造成干擾,這些干擾成分稱為基質,其干擾稱為基質效應(matrix effect) ? ( 1)基質來源 ? 水、土壤的腐殖質 ? 食品中的蛋白、脂肪等 ? 溶液中作為促溶的有機溶劑等 例 1:環(huán)境水樣的基質效應 49 ( 2)基質干擾的消除 ? 掩蔽劑(緩沖液調整) ? 樣品稀釋 ? 樣品前處理:凈化 50
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