抗原抗體反應(yīng)的應(yīng)用-資料下載頁
2025-05-13 02:15本頁面
【正文】 細(xì)胞儀依據(jù)細(xì)胞流經(jīng)光照射區(qū)時(shí)電壓訊號(hào)的強(qiáng)弱來分析和分選細(xì)胞。 ? 抗原（組織或細(xì)胞內(nèi)） +第一抗體 +第二抗體酶 +底物 —— 不溶于水的有色產(chǎn)物 （ 1）酶標(biāo)免疫組織化學(xué) 固相抗原為組織切片或細(xì)胞樣品。 （ 2） 免疫印跡法 （ immunoblottingtest， IBT） 蛋白質(zhì)經(jīng)凝膠電泳后，形成不同的條帶，轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜上，用酶標(biāo)記的抗體進(jìn)行顯色反應(yīng)，可確定目的蛋白的有無，或分子量大小。 分三個(gè)階段進(jìn)行 : ?SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（ SDSPAGE） ?轉(zhuǎn)移 —— 硝酸纖維素膜 ?酶免疫定位 免疫印跡法原理示意圖 （ IEM）技術(shù) ? 電子顯微鏡技術(shù)與免疫反應(yīng)相結(jié)合的一項(xiàng)技術(shù)。 ? 優(yōu)點(diǎn)：提高了電鏡觀察的特異性。 如形態(tài)相同，但結(jié)構(gòu)和組成不同的生物粒子，細(xì)胞器或病毒粒子。 ? 種類： ? 一類是先用抗體捕捉抗原，然后用磷鎢酸負(fù)染色觀察。 ? 另一類是用金標(biāo)記抗體進(jìn)行抗原定位。膠體金與抗體 Fc段結(jié)合。 四、抗原抗體反應(yīng)的其他應(yīng)用 1. 免疫親和層析 ? 原理：任何一對(duì)抗原 抗體的組分之一與固相基質(zhì)交聯(lián)后均可用于另一組分的純化。廣泛用于蛋白質(zhì)抗原的分離純化。 ? 固相基質(zhì)：瓊脂糖、葡聚糖 抗體 +瓊脂糖 上樣 洗滌 洗脫 免疫親合層析示意圖 OD280檢 測 凝膠電泳 ? 機(jī)理：抗原與抗體在相互結(jié)合后，它們的結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，一些次級(jí)鍵參與結(jié)構(gòu)的變化。這種結(jié)構(gòu)的改變通過電場效應(yīng)的改變可以被檢測到。 ? 可以判斷抗原抗體的結(jié)合是否發(fā)生及發(fā)生的強(qiáng)度。 ? 組成： A. 生物受體（抗體） B. 轉(zhuǎn)導(dǎo)體 C. 電子放大處理器 轉(zhuǎn) 導(dǎo) 體 Y Y Y Y Y Y Y Y 信號(hào)放大 抗體芯片 ? 抗體芯片是固相化間接免疫反應(yīng)和免疫生物感應(yīng)器的綜合。 ? 大量不同種類的抗體通過密集布陣在玻片或其他經(jīng)過修飾的載體上，經(jīng)過不同處理的細(xì)胞蛋白質(zhì)用熒光染料染色后再與玻片上的抗體溫育，經(jīng)過洗滌處理后出去非特性吸附的蛋白質(zhì)，結(jié)合的蛋白質(zhì)通過光電掃描測定其強(qiáng)度。
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