第八章分子生物學常用技術的原理及其應用及人類基因組學-資料下載頁
2025-04-07 04:00本頁面
【正文】 DNA的3‘端上游雜交。并沿5，一3，方向延長，所合成新鏈即待測DNA的互補鏈。(3)引物的延長與合成阻斷：雜交液分4管，各管分別加入Klenow大片段、4種dNTP(其中一種被標記)、一種ddNTP和緩沖液，保溫使引物延長并隨機阻斷。(4)電泳：四泳道超薄聚丙烯酰胺一尿素凝膠高壓電泳。(5)放射自顯影和讀圖：將凝膠板干燥后，與X線片夾在一起，使X線片在電泳帶相應位置曝光、顯影、定影后直讀圖像。自終端至始點讀出新合成鏈的5’一3’序列，其互補鏈即為待測DNA的堿基序列。3．(1)以酪氨酸酶RNA為模板合成的’’P標記的cDNA為探針，對克隆片段進行Southern雜交。(2)克隆片段與酪氨酸酶mRNA雜交，mRNA翻譯活性喪失，該克隆片段為酪氨酸酶的基因?；蚪M學與醫(yī)學 測 試 題一、名詞解釋1．人類基因組計劃2. 結(jié)構(gòu)基因組學3．功能基因組學4．比較基因組學5．基因病 二、填空題1．Southern blotting用于研究一一——，、Northern blotting用于研究一一——，Western blotting用于研究一一——。2．PCR的基本反應步驟包括一——、——和——三步。3. 在PCR反應體系中，除了DNA模板外，還需加入——、————、——和——。4．Sange法測序的基本步驟包括——、——、——和——。5．人類基因組計劃的主要研究內(nèi)容包括 、 、 、 、 。6．目前克隆致病相關基因的主要策略有——、——、——。7．血友病第Ⅷ因子基因的首次克隆成功所采用的克隆策略是————，而DMD致病基因的克隆所采用的克隆策略是————。三、選擇題A型題1．人類基因組計劃的主要研究內(nèi)容不包括A．遺傳圖分析 B．物理圖分析 C．轉(zhuǎn)錄圖分析D. 序列圖分析 E．蛋白質(zhì)功能分析2．1996年，英國科學家克隆的Dolly羊所采用的技術是A．轉(zhuǎn)基因技術 B．核轉(zhuǎn)移技術 C．基因剔除技術D．肽核酸技術 E. 反義核酸技術3．PCR實驗的特異性主要取決于：A．DNA聚合酶的種類 B. 反應體系中模板DNA的量C．引物序列的結(jié)溝和長度 D．四種dNTP的濃度E. 循環(huán)周期的次數(shù)X型題1．有關人類基因組計劃(HGP)的描述，錯誤的是A．最初由美國人提出B．主要任務是完成人的23對染色體堿基測序C. 因真正編碼蛋白質(zhì)的序列只占1％5％，所以HGP計劃的實際意義不大D．我國未參與該計劃E．該計劃至今未有進展2．HGP的主要研究內(nèi)容有A．繪制遺傳圖 B．繪制物理圖 C．完成轉(zhuǎn)錄圖D. 完成序列圖 四、問答題1．HGP和PHGP有和重大意義?2．HGP的主要研究內(nèi)容是什么？3. 如何進行疾病相關基因的克隆與鑒定? 參 考 答 案一、名詞解釋1． 二、填空題1．遺傳圖分析 物理圖分析 轉(zhuǎn)錄圖分析 序列圖分析 資料的儲存和利用 2．功能基因組學 定位克隆 候選基因克隆 三、選擇題四、問答題1． 2．3． 6 /
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