微生物菌種常規(guī)保藏技術(shù)規(guī)程來源accc-資料下載頁
2025-04-07 03:32本頁面
【正文】 為主的真菌的保藏?！?原理干燥條件下微生物菌種代謝活動減緩，繁殖速度受到抑制。此方法可減少菌株突變，延長存活時間?！?方法與步驟 沙土管制備 將河沙用60目過篩，棄去大顆粒及雜質(zhì)，再用80目過篩，去掉細(xì)沙。用吸鐵石吸去鐵質(zhì)，放入容器中用10%鹽酸浸泡，如河沙中有機(jī)物較多可用20%鹽酸浸泡。24小時后倒去鹽酸，用水洗泡數(shù)次至中性，將沙子烘干或曬干。另取瘦紅土100目過篩,水洗至中性，烘干，按沙∶土= 2∶1混合。把混勻的沙土分裝入安瓿管或小試管中，高度為1厘米左右。塞好棉塞，或常壓間歇滅菌3次，每天每次1小時。滅菌后在不同部位抽出若干管，分別加營養(yǎng)肉汁、麥芽汁、豆芽汁等培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)檢查后無微生物生長方可使用?！?斜面培養(yǎng)物的制備參照附錄A。 制備菌懸液向培養(yǎng)好的斜面培養(yǎng)物中注入3mL5mL無菌水，洗下細(xì)胞或孢子制成菌懸液。用無菌吸管吸取菌懸液，均勻滴入沙土管中， 。放線菌和霉菌可直接挑取孢子拌入沙土管中。 干燥用真空泵抽去安瓿管中水分并放置于干燥器內(nèi)?！?純培養(yǎng)檢查從做好的沙土管中，按10∶1比例抽查。無菌條件下用接種環(huán)取出少量沙土粒，接種于適宜的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后觀察其生長情況和有無雜菌生長。如出現(xiàn)雜菌或菌落數(shù)很少，或根本不長，則須進(jìn)一步抽樣檢查?！?保藏將純培養(yǎng)檢查合格的沙土管用火焰熔封管口。制好的沙土管存放于低溫(4℃15℃)干燥處，半年檢查一次活力及雜菌情況。也可將純培養(yǎng)檢查合格的沙土管直接用牛皮紙或塑料紙包好，置干燥器內(nèi)保存。用此方法保藏時間為210年不等?！?復(fù)活復(fù)活時在無菌條件下打開沙土管，取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上，長出菌落后再轉(zhuǎn)接一次，也可取沙土粒于適宜的液體培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面。 參考文獻(xiàn)[1] 中國科學(xué)院微生物研究所. 菌種保藏手冊[M]. 北京：科學(xué)出版社，1980[2] 杜連祥. 工業(yè)微生物學(xué)實驗技術(shù)[M]. 天津：天津科學(xué)技術(shù)出版社，1992[3] 諸葛健，王正祥. 工業(yè)微生物實驗技術(shù)手冊[M]. 北京：中國輕工業(yè)出版社，1994[4] 杜連祥. 乳酸菌及其發(fā)酵制品生產(chǎn)技術(shù)[M]. 天津：天津科學(xué)技術(shù)出版社，1999[5] 姜成林，[M]. 北京：科學(xué)出版社，1997
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