掃描電子顯微鏡生物樣品制備與觀察細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告-資料下載頁(yè)
2025-04-04 23:28本頁(yè)面
【正文】 cosθ，θ為入射電子束與樣品表面法線之間的夾角。由于樣品表面不是平整的，各點(diǎn)的θ值與η值不同，即樣品表面各點(diǎn)的二次電子信號(hào)強(qiáng)度不同。因此二次電子像的襯度反應(yīng)樣品表面幾何形貌。此外，由于入射電子束孔徑角很小，二次電子像還具有景深大，立體感強(qiáng)的特點(diǎn)。為什么臨界點(diǎn)干燥可以避免自然干燥對(duì)生物樣品表面形貌的損傷？臨界點(diǎn)干燥的原理是：在一定的溫度和壓力下，物質(zhì)的液態(tài)和氣態(tài)界面將會(huì)消失，液態(tài)瞬間轉(zhuǎn)化為氣態(tài)，形成非液非固的狀態(tài)，即達(dá)到臨界點(diǎn)（）狀態(tài)。在臨界點(diǎn)時(shí)，表面張力消失，分子間的內(nèi)聚力等于零，而在顯微尺度上，表面張力對(duì)生物材料形態(tài)的影響十分強(qiáng)大。表面張力是存在于固液、液氣界面上的主要物理力之一。液氣界面上表面張力的作用是造成生物樣品收縮的主要原因。因此，利用臨界點(diǎn)狀態(tài)對(duì)材料進(jìn)行干燥，材料理論上不會(huì)產(chǎn)生收縮和形變，對(duì)于質(zhì)地較軟的材料這種方法是最好的干燥方法。生物樣品在掃描電鏡觀察前為什么要進(jìn)行金屬噴漆處理？由于生物樣品導(dǎo)電性低，未經(jīng)過(guò)導(dǎo)電處理的樣品在掃描電鏡下觀察時(shí)會(huì)產(chǎn)生荷電現(xiàn)象，從而影響觀察和照相記錄。為了減少荷電效應(yīng)，對(duì)生物樣品表面要進(jìn)行導(dǎo)電處理，通常使用離子濺射儀在樣品表面噴鍍金屬導(dǎo)電薄層。噴鍍的金屬包括：金（Au），鉑（Pt）及其合金等，噴鍍導(dǎo)電薄層厚度在10nm左右為宜。【參考文獻(xiàn)】[1] 桑建利, 譚信. 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo). 北京:科學(xué)出版社, 2010.
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