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[經(jīng)濟(jì)學(xué)]第六章酶-資料下載頁

2025-03-21 22:10本頁面
  

【正文】 酶原激活: 酶原激活的 機(jī)理 ? 酶原 ? ↓在特定條件下 ? 一個(gè)或幾個(gè)特定的肽鍵斷裂,水解掉一個(gè)或幾個(gè)短肽 ? ↓ ? 分子構(gòu)象發(fā)生改變 ? ↓ ? 形成或暴露出酶的活性中心 胰蛋白酶原( P173 參看圖 628) 酶原激活的 生理意義 ? 1)避免細(xì)胞產(chǎn)生的酶對細(xì)胞進(jìn)行自身消化,并使酶在特定的部位和環(huán)境中發(fā)揮作用,保證體內(nèi)代謝正常進(jìn)行。 ? 2)有的酶原可以視為酶的儲(chǔ)存形式,在需要時(shí),酶原適時(shí)地轉(zhuǎn)變成有活性的酶,發(fā)揮其催化作用。 九 核酶、抗體酶和同工酶 ? 核酶( ribozyme)具有催化核糖核酸的酶 ? 抗體酶( abzyme)具有催化免疫球蛋白的酶, ? 又稱催化性抗體 ? 同工酶( isozyme) ? 概念:指具有不同分子形式卻催化相同化學(xué)反應(yīng)的酶 第一個(gè)同工酶 — 乳酸脫氫酶 * 舉例:乳酸脫氫酶 (LDH1~ LDH5) ? 不同類型的同工酶 LDH同工酶在 不同組織中的比例不同,在心肌中 LDH1的比例較大,在 骨骼肌和肝臟 中 LDH5含量較高 ? 臨床檢驗(yàn): ? 思考:心肌受損病人和肝細(xì)胞受損病人,血清中 LDH發(fā)生什么變化? 同工酶的臨床意義 臨床意義 心肌梗死和肝病病人血清 LDH同工酶譜的變化 1 酶活性 心肌梗死酶譜 正常酶譜 肝病酶譜 2 3 4 5 心、肝病將引起血清 LDH同工酶酶譜的變化, 一般規(guī)律是: ? 心臟疾病 LDH1及 LDH2上升, LDH3及LDH5下降 ? 急性肝炎 LDH5明顯上升,隨病情好轉(zhuǎn)而逐漸恢復(fù)正常。 ? 慢性肝炎一般處于正常范圍,部分病例可見 LDH5有所上升。 ? 肝硬病 LDH LDH3 和 LDH5均升高 ? 原發(fā)性肝癌 LDH3 、 LDH4和 LDH5均上升,但 LDH5> LDH4。 ? 轉(zhuǎn)移性肝癌 LDH3 、 LDH4和 LDH5均上升,但 LDH4> LDH5。 同工酶的生物學(xué)功能: ? 同工酶作為遺傳標(biāo)志,已廣泛被遺傳學(xué)家用于遺傳分析的研究。 ? 同工酶和個(gè)體發(fā)育及組織的分化密切相關(guān)。 ? 同工酶與代謝調(diào)節(jié) ? 同工酶與癌基因的表達(dá) ? 此外,同工酶分析法在農(nóng)業(yè)上已開始用于優(yōu)勢雜交組合的預(yù)測。 ? 總之。同工酶是研究 代謝調(diào)節(jié)、分子遺傳、生物進(jìn)化、個(gè)體發(fā)育、細(xì)胞分化和癌病 的有力工具。 十 酶的研究方法與酶工程 ? (一)酶活力的測定方法 ? 酶的活性單位:在規(guī)定條件下,酶促反應(yīng)在單位時(shí)間內(nèi)生成一定量的產(chǎn)物或消耗一定數(shù)量的底物所需的酶量。 ? 國際單位( IU):在特定的條件下,每分鐘催化 1mol底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。 ? 催量單位: 1催量( Kat)是指在特定條件下每秒種使 1mol底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物所需的酶量, ? Kat與 IU的換算: 1IU= 109 Kat (二) 酶的分離提純(酶的制備) ? 對酶進(jìn)行分離提純的目的 ? 1)為了研究酶的理化特性(結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系、生物學(xué)作用等),對酶必須進(jìn)行鑒定,必須用純酶。 ? 2)作為生化試劑以及用作藥物的酶,常常要求有較高的純度,必須用蠢酶。 2 、對酶進(jìn)行分離提純所采用的一般步驟: ?1)選材:(要求:酶含量高,易分離的動(dòng)、植物組織或微生物作為材料) ?2)破碎細(xì)胞 ?3)粗制分離:(鹽析法、等電點(diǎn)沉淀法、有機(jī)溶劑分離分級法) ?優(yōu)點(diǎn):簡單、處理量大、既能除去雜質(zhì),又能濃縮酶液。 ?缺點(diǎn):分辨力較低。 ?4)精制分離:柱層析法(離子交換層析法、親和層析法、分子篩層析法等,也可用電泳法精制)優(yōu)點(diǎn):規(guī)模較小,分辨力高。 ?5)酶制劑的脫鹽、濃縮、干燥和保存 ?脫鹽:指用透析、超濾、凝膠過濾法將多余的鹽離子除去的過程。 ?濃縮:指酶濃度較低,需用沉淀法、吸收法或超濾法除去多余的水分。 保存酶制品的方法: ? 冰凍干燥法 :通常將純化后的酶溶液經(jīng) 透析除鹽后冰凍干燥得到酶粉,可長期保存。 ? 保存濃縮酶液 :將酶溶液用飽和硫酸銨 ? 反透析后在濃溶液中保存。 ?將酶溶液制成 25%的甘油或 50%的甘 ? 油,在 25℃ 或 50 ℃ 冰箱中保存。 ? 注意 :酶溶液濃度越低越容易變性,因此,切記不能保存酶的稀釋液。 (三)酶工程 ? 酶工程( enzyme engineering) :是 1971年第一屆國際酶工程會(huì)議上才得到命名的一項(xiàng)新技術(shù)。 ? 作為現(xiàn)代生物工程的一部分,是研究酶的生產(chǎn)和應(yīng)用的一門技術(shù)性學(xué)科。 ? 酶工程研究的主要內(nèi)容:研究酶的生產(chǎn)、純化、固定化技術(shù)、酶分子結(jié)構(gòu)的修飾和改造以及在工農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和理論研究等方面的應(yīng)用。
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