應(yīng)化第12章分子發(fā)光-熒光與磷光-資料下載頁
2025-01-18 17:42本頁面
【正文】 3乙酰氧基吲哚 395 470 ~ 胍基丁胺 鄰苯二醛 365 470 ~5 四氧嘧啶 苯二胺 365 485 104 3. 生命與生物物質(zhì) Modern Instrument Analytical Method 用于 活體檢測 的 熒光探針 Modern Instrument Analytical Method 三、磷光分析法的應(yīng)用 采取固體表面室溫磷光分析法快速靈敏測定稠環(huán)芳烴和雜環(huán)化合物 （ 致癌物質(zhì) ） 、 生物堿 、 植物生長激素的分析 煙堿 、 降煙堿 、 新煙堿 ， 2， 4D等分析 檢測限 ?g/cm3 Modern Instrument Analytical Method 一、 基本原理 principle 二、化學(xué)發(fā)光分析的特點(diǎn) characteristics 三 裝置與技術(shù) instrument and technology 第三節(jié) 化學(xué)發(fā)光分析法 chemiluminescence analysis Modern Instrument Analytical Method 一、 基本原理 principle 1. 化學(xué)發(fā)光反應(yīng) 在化學(xué)反應(yīng)過程中 ， 某些化合物接受能量而被激發(fā) ， 從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時 ， 發(fā)射出一定波長的光 。 A +B = C + D* D* → D + h? （ 1） 能夠發(fā)光的化合物大多為有機(jī)化合物 ， 芳香族化合物； （ 2） 化學(xué)發(fā)光反應(yīng)多為氧化還原反應(yīng) ， 激發(fā)能與反應(yīng)能相當(dāng) ?E=170～ 300 kJ/mol；位于可見光區(qū)； （ 3） 發(fā)光持續(xù)時間較長 ， 反應(yīng)持續(xù)進(jìn)行； 化學(xué)發(fā)光反應(yīng)存在于生物體 (螢火蟲 、 海洋發(fā)光生物 )中 ，稱生物發(fā)光 (bioluminescence)。 Modern Instrument Analytical Method 氣相化學(xué)發(fā)光： 乙烯與 O3的發(fā)光反應(yīng) 乙烯與 O3反應(yīng)，生成激發(fā)態(tài)乙醛： CH2O* → CH2O + h? 最大發(fā)射波長： 435nm；對 O3的特效反應(yīng)；線性響應(yīng)范圍 1 ng/cm3 ～ 1?g/cm3； Modern Instrument Analytical Method 液相中的化學(xué)發(fā)光反應(yīng) 機(jī)理研究較多，在分析中應(yīng)用最多；可測痕量的 H2O2 、Cu、 Mn、 Co、 V、 Fe、 Cr、 Ce、 Hg、 Th等。 應(yīng)用最多的發(fā)光試劑： 魯米諾（ 3氨基苯二甲酰肼） 化學(xué)發(fā)光反應(yīng)效率： ～ 0. 05； 魯米諾在堿性溶液中與雙氧水的 反應(yīng)過程： 該發(fā)光反應(yīng)速度慢，某些金屬離子可催化反應(yīng)；利用這一現(xiàn)象可測定這些金屬離子。 Modern Instrument Analytical Method 化學(xué)與生物發(fā)光分析的應(yīng)用 （ 1） 該發(fā)光反應(yīng)速度慢，某些金屬離子可催化反應(yīng)；利用這一現(xiàn)象可間接測定這些金屬離子?？蓽y痕量的 Cu2+ 、 Mn2+、 Co2+、 V4+、 Fe2+、 Fe3+、 Ni2+、 Ag+、 Au3+、 Hg2+等 （ 2） 可檢測低至 109 mol/L 的 H2O2； （ 3） 間接測定某些生物試樣 氨基酸 + O2 ????? 酮酸 +NH3 + H2O2 氨基酸氧化酶 葡萄糖 + O2 + H2O ????? 葡萄糖酸 + H2O2 通過測定生成的 H2O2 ，確定 氨基酸、葡萄糖 含量。 葡萄糖氧化酶 Modern Instrument Analytical Method 特點(diǎn) characteristics 1. 靈敏度極高 例：熒光素酶和磷酸三腺甙 (ATP)的化學(xué)發(fā)光分析 ， 可測定 2?1017。 Mol/L的 ATP， 即可檢測出一個細(xì)菌中的 ATP含量 2. 儀器設(shè)備簡單 不需要光源 、 單色器和背景校正； 3. 發(fā)射光強(qiáng)度測量無干擾 無背景光 、 散射光等干擾； 4. 線性范圍寬 5. 分析速度快 缺點(diǎn)： 可供發(fā)光用的試劑少；發(fā)光反應(yīng)效率低 （ 大大低于生物體中的發(fā)光 ） ；機(jī)理研究少 。 Modern Instrument Analytical Method 三、 裝置與技術(shù) instrument and technology 裝置流程： 發(fā)光反應(yīng)室 光檢測器 信號放大器 顯示與記錄 發(fā)光反應(yīng)可采用靜態(tài)或流動注射的方式進(jìn)行： 靜態(tài)方式 ： 用注射器分別將試劑加入到反應(yīng)器中混合 ， 測最大光強(qiáng)度或總發(fā)光量；試樣量小 ， 重復(fù)性差； 流動注射方式 ： 用蠕動泵分別將試劑連續(xù)送入混合器 ，定時通過測量室 ， 連續(xù)發(fā)光 ， 測定光強(qiáng)度；試樣量大；
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