高效液相色譜分析ppt課件-資料下載頁(yè)
2025-01-17 09:51本頁(yè)面
【正文】 （ 1）可獲得良好分離，主峰 使用制備柱，超載提高效率； （ 2）兩主成分之間的小組分； 超載，分離切分使待分離組分成為主成分（富集）后，再次分離制備。 3. 制備型液相色譜 制備型液相色譜 ： 結(jié)構(gòu)與分析型一樣，但泵流量大、進(jìn)樣量大、采用制備柱； 柱后餾分收集器 。 制備柱 ： 內(nèi)徑 20～ 50mm， 柱長(zhǎng) 50cm。 液相色譜與氣相色譜的比較 液相色譜所用基本概念和基本理論基本一致。 液相色譜所用的儀器設(shè)備和操作條件與氣相色譜不同，所以，液相色譜與氣相色譜有一定差別，主要有以下幾方面： （ 1）應(yīng)用范圍不同 GC僅能分析在操作溫度下 能氣化而不分解的物質(zhì) 。對(duì)高沸點(diǎn)化合物、非揮發(fā)性物質(zhì)、熱不穩(wěn)定化合物、離子型化合物及高聚物的分離、分析較為困難。致使其應(yīng)用受到一定程度的限制， 只有大約 20%的有機(jī)物能用氣相色譜分析 ； HPLC則不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制，它非常適合 分子量較大、難氣化、不易揮發(fā)或?qū)崦舾械奈镔|(zhì) 、離子型化合物及高聚物的分離分析，大約 占有機(jī)物的70 80%。 （ 2） 流動(dòng)相的作用不同 ?氣相色譜的流動(dòng)相載氣是色譜惰性的，不參與分配平衡過(guò)程，與樣品分子無(wú)親和作用，樣品分子 只與固定相 相互作用。 ?液相色譜 流動(dòng)相液體也與固定相爭(zhēng)奪樣品分子，為提高選擇性增加了一個(gè)因素 。也可選用不同比例的兩種或兩種以上的液體作流動(dòng)相， 增大分離的選擇性 。 （ 4） 色譜柱 ： ? GC填充柱 1~6m，毛細(xì)管柱 20~100m，螺旋型； ? HPLC 15cm或 25cm，直型。 （ 3） 操作條件： ? GC需高溫； ? HPLC通常在室溫下進(jìn)行 ，高壓（液體粘度大，峰展寬小） 。 (5)分離效率不同 ? HPLC：大于 3萬(wàn)塔板 /米 ? （ GC： 103塔板 /米） (6)儀器構(gòu)造不同 HPLC:脫氣裝置，高壓泵 GC：汽化室，溫控系統(tǒng) HPLC的特點(diǎn)和實(shí)際應(yīng)用 利用其高柱效 （ n=104塊 /米 ） ， 有效分離極復(fù)雜 體系中的痕量組分 。 正相色譜分離有機(jī)溶劑中的物質(zhì) 反相色譜分離水溶液中的物質(zhì) 生化物質(zhì) 。 用離子型固定相建立的離子交換色譜和離子對(duì) 色譜法分析離子型體的含量 。 （ 蛋白質(zhì) 、 氨 基酸 、 常見(jiàn)陰陽(yáng)離子等 ） 利用多孔凝膠固定相建立空間排阻色譜法可分 離高分子化合物 。 綜上所述，高效液相色譜法具有高柱效、高選擇性、分析速度快、靈敏度高、重復(fù)性好、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。該法已成為現(xiàn)代分析技術(shù)的重要手段之一，目前在化學(xué)、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保、農(nóng)業(yè)等科學(xué)領(lǐng)域獲得廣泛的應(yīng)用。 、正己醇在正相 HPLC中的洗脫順序。 答：正相 HPLC固定相的極性大于流動(dòng)相的極性，正己醇的極性大于正己烷，所以正己烷易被流動(dòng)相洗脫，先流出來(lái)。 A和 B在 保留時(shí)間分別為 ，而兩個(gè)色譜峰寬分別是 ，則其分離度 R等于（ ）。 答： A 3. 在 HPLC中，關(guān)于 ODS正確的是（ ） A. 為正相鍵合相色譜的固定相 B. 是非極性固定相 D. 是高分子多孔微球 B 4. 在液相色譜法中，按分離原理分類(lèi)，液固色譜法 屬于（ ）。 A、分配色譜法 B、排阻色譜法 C、離子交換色譜法 D、吸附色譜法 D 5. 在高效液相色譜中，色譜柱的長(zhǎng)度一般在（ ） 范圍內(nèi)。 A 、 10～ 30cm B、 20～ 50m C 、 1～ 2m D、 2～ 5m A 6. 在液相色譜中 , 某組分的保留值大小實(shí)際反映了哪些部分的分子間作用力（ ） A、組分與流動(dòng)相 B、組分與固定相 C、組分與流動(dòng)相和固定相 D、組分與組分 C ，屬于通用型的檢測(cè)器是： ( ) (A) 示差折光檢測(cè)器 (B) 紫外吸收檢測(cè)器 (C) 電導(dǎo)檢測(cè)器 (D) 熒光檢測(cè)器 A ，不能采用下列何種氣相色譜定量分析方法： ( ) (A) 內(nèi)標(biāo)法 (B) 外標(biāo)法 (C) 標(biāo)準(zhǔn)加入法 (D) 歸一化法 D D 思考題 ? 什么是化學(xué)鍵合固定相 ,它的優(yōu)點(diǎn)是什么 ? ? 正相色譜、反相色譜和梯度洗脫的定義 ? 高效液相色譜對(duì)流動(dòng)相有哪些要求 ? ? 高效液相色譜與氣相色譜的區(qū)別與聯(lián)系
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1