【正文】 F1 27/30 27/30 6/30 修文 F2 29/30 29/30 12/30 F1 26/30 26/30 4/30晴隆 F2 27/30 27/30 10/30 F1 0/6 0/6 0/6 PBS F2 0/6 0/6 0/6 注：分母表示檢測數(shù)，分子表示病變數(shù)。沉淀線，而與健康山羊陰性血清不出現(xiàn)沉淀線。采集健康山羊皮膚制備的對(duì)照抗原與上述血清均沒有沉淀線。在封閉試驗(yàn)中，山羊痘參考血清能夠抑制這種沉淀反應(yīng)，表明本次試驗(yàn)制備的沉淀抗原具有特異性，而且與口蹄疫 O 型血清和健康山羊陰性血清不出現(xiàn)交叉反應(yīng)，可以應(yīng)用于山羊痘的血清學(xué)檢測。 此同時(shí)采用本次試驗(yàn)制備的沉淀抗原和陽性血清，對(duì)貴州省修文、鎮(zhèn)遠(yuǎn)、銅仁和遵義等 8 個(gè)山羊痘疫區(qū)送檢的痘疹材料和血清樣本進(jìn)行了檢測，血清學(xué)檢測的結(jié)果見表 2。本次試驗(yàn)共檢測 18 只病羊的痘疹材料、山羊痘抗原的陽性率為 %(12/16)。檢 21 測 38 只病羊的血清樣本，山羊痘抗體的陽性率為 %(18/38)。4 結(jié)語與討論 本次試驗(yàn)根據(jù)患病羊群的流行病學(xué)、臨床癥狀和剖檢病變特征，作出懷疑山羊痘的假定性診斷。通過電鏡形態(tài)學(xué)觀察，在痘疹材料中發(fā)現(xiàn)大量典型的痘病毒粒子。感染雞胚絨毛尿囊膜增厚、充血和出現(xiàn)痘斑；接種 BHK21單層細(xì)胞引起明顯的細(xì)胞病表 2 貴州省 8 個(gè)山羊痘疫區(qū)送檢材料的檢測結(jié)果疫 區(qū) 痘疹材料數(shù) 陽性數(shù) 血清樣本數(shù) 陽性數(shù)沿 河 1 1 1 1 遵 義 1 1 1 1晴 隆 2 1 12 0銅 仁 5 2 5 5德 江 1 1 3 3六盤水 4 2 9 3鎮(zhèn) 遠(yuǎn) 2 2 2 0修 文 2 2 5 5 變效應(yīng)，而且這種現(xiàn)象能夠被山羊痘參考血清所抑制。血清學(xué)檢測結(jié)果表明，患病羊痘疹材料中山羊痘抗原的陽性率為 %。 血清樣本中山羊痘抗體的陽性率為%。通過對(duì)本次疫病的病原學(xué)研究和血清學(xué)檢測，可以確診貴州省發(fā)生了山羊痘暴發(fā)流行。 采用待檢病料接種雞胚絨毛尿囊膜，在接種部位出現(xiàn)明顯的痘斑，第一代感染雞胚的痘斑出現(xiàn)率較低（～20%） 。為此，判定病毒感染成功與否應(yīng)綜合胚體充血、出血，絨毛尿囊膜增厚和在接種部位出現(xiàn)痘斑三個(gè)方面進(jìn)行判定，或通過繼代培養(yǎng)使分離病毒適應(yīng)于雞胚，以提高痘斑病變的出現(xiàn)率。 本次試驗(yàn)試圖通過瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)檢測感染雞胚胚體、絨毛尿囊膜和痘斑中的病毒抗原，未獲得成功；檢測感染細(xì)胞培養(yǎng)物也不理想，第一、二代表現(xiàn)陰性反應(yīng)，第三代細(xì)胞培養(yǎng)物出現(xiàn)微弱的沉淀線。這一試驗(yàn)結(jié)果表明，無論是雞胚，還是BHK21單層細(xì)胞，看來均不是山羊痘增殖的最佳材料。同時(shí)也與瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)檢測 22 方法的敏感性有關(guān)。為此，選擇病毒增殖的最佳材料和提高檢測方法的靈敏性，是本項(xiàng)試驗(yàn)進(jìn)一步探索與研究的內(nèi)容。The etiological study and serological detection of goat pox in GuizhouHE Guangzhi1，ZHOU Bijun 1，YU Tiade 2，XU Leren 1 (1. Department of Animal Medicine, College of Animal Science and Veterinary Medicine,Guizhou University, Guiyang Guizhou 550025, China。 Station of Guizhou, 550003 , China)Abstract An infectious disease has broken out in 8 goat farms of Guizhou province since October, 2022. This disease was characterized by pox on skin、respiratory tract and digestive tract of sick goats. A lot of typical virus particles were observed in pox materials by electron microscopy. The ffected chorioallantoic membrane became thicken, congestive and pox a formation, the affected monolayer of BHK21 was caused cytopathogenic effect, and all these phenomena could be inhibited by reference serum of goat pox. The results of serological detection showed that the positive rate of tested antigen was % in pox materials and the positive rate of tested antibody was % in serum samples. According to the etiological study and serological detection , goat pox has been definitely diagnosed in Guizhou provinc.Key words goat pox。 electron microscopy。 chorioallantoic membrane。 cytopathogenic effect。serological detection年度攻關(guān)項(xiàng)目：2022 年貴州省科委年度攻關(guān)項(xiàng)目。黔科合農(nóng)社字《200NGY》007 號(hào)作者簡介：何光志(1977)，男，貴州省人，2022 級(jí)在讀研究生，主要從事獸醫(yī)微生物研究。注：需圖版和參考文獻(xiàn)可向作者聯(lián)系三種不同藥性中藥制劑對(duì)內(nèi)毒素性腎衰的防治作用及其機(jī)理的比較研究王 華，吳立夫（貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院）摘 要 采用家兔研究了熱毒清注射液、復(fù)方丹參注射液和五苓注射液對(duì)內(nèi)毒素所致急性腎 23 功能衰竭的防治作用及其機(jī)理。將 40 只健康哈爾濱白兔隨機(jī)分 為陰性對(duì)照組、模型 組、熱毒清組、丹參組和五苓組，每組各 8 只。模型組和各防治組家兔一次性靜脈注射大腸桿菌 O111B4 內(nèi)毒素生理鹽水溶液，劑量為 100181。g?kg1（10ml?kg1）。三防治 組 家兔在注射內(nèi)毒素后立即靜脈注射相應(yīng)的中藥注射液，熱毒清組和五苓 組家兔劑量為 ?kg1，丹參組劑量為 ?kg1。陰性對(duì)照組靜注生理鹽水。調(diào)整生理 鹽水用量，使各 組家兔靜注液體的 總量相等。注射內(nèi)毒素（或生理鹽水）1h 后開始通過膀胱瘺管收集尿液，每 h 收集一次，共收集 6h。末次收集尿液后心臟采血。為了觀察各中藥制劑對(duì)內(nèi)毒素性腎功能衰竭的防治作用，對(duì)各組家兔的腎功能指標(biāo)進(jìn)行了動(dòng)態(tài)測定。結(jié)果顯示，模型組家兔發(fā)生了急性腎功能衰竭，其各項(xiàng)腎功能指標(biāo)均與陰性對(duì)照組有顯著或極顯著差異（P，P）。和模型 組比較， 熱毒清 組家兔的尿量以及肌酐、尿素氮和尿鈉排出量顯著或極顯著增加（P， P），腎衰指數(shù)和 鈉排泄分?jǐn)?shù)顯著降低（P ），內(nèi)生性肌酐清除率（以此代表腎小球?yàn)V過率）、尿滲透 壓和尿血滲比以及滲透物 質(zhì)清除率顯著或極顯著升高（P，P），游離水清除率極顯著降低（P）。實(shí)驗(yàn)臨近結(jié)束時(shí)，熱毒清組家兔的某些腎功能指標(biāo)已和陰性對(duì)照組無顯著差異。 這些實(shí)驗(yàn)結(jié) 果表明， 熱毒清注射液對(duì)內(nèi)毒素性腎衰具有確實(shí)的防治作用。除腎 衰指數(shù)和鈉排泄分?jǐn)?shù)之外，丹參組家兔絕大多數(shù)腎功能指標(biāo)的變化趨勢(shì)與熱毒清組相似，提示復(fù)方丹參注射液亦有良好的防治內(nèi)毒素性腎衰作用。五苓組家兔的某些腎功能指標(biāo)如尿量、肌酐和尿素氮隨尿排出量、滲透物質(zhì)清除率和內(nèi)生性肌酐清除率在實(shí)驗(yàn)后期雖也較模型組有了顯著改善，但其腎功能衰竭狀況并未得到根本扭轉(zhuǎn)。為了闡明各中藥制劑防治內(nèi)毒素性腎衰的機(jī)理， 還觀察了它 們的抗內(nèi)毒素作用、 對(duì)內(nèi)毒素所致腎臟損傷的防護(hù)作用及對(duì)水、 鈉排泄的影響。 熱毒清注射液 對(duì)內(nèi)毒素有較強(qiáng)的破壞作用，可極顯著地減少腎小球微血栓形成、減 輕腎小管上皮細(xì)胞的損傷 ，表明 “熱毒清”的抗內(nèi)毒素作用可能是其防治內(nèi)毒素性腎衰的主要機(jī)理。丹參注射液抗內(nèi)毒素作用 較弱，但同 樣能極顯著地減輕腎臟的損傷，特別是減少腎小球微血栓的形成，提示丹參注射液對(duì)內(nèi)毒素性腎衰的防治作用可能是其抗內(nèi)毒素和抗凝血兩方面共同作用的結(jié)果。五苓注射液抗內(nèi)毒素作用十分 輕微，未能 顯著減輕腎小球微血栓的形成和腎小管的損傷，但 顯示了顯著的利尿效 應(yīng)，看來五苓注射液改善某些 腎功能指標(biāo)的作用可能是通過其促水、 鈉排泄作用實(shí)現(xiàn)的，因此，不可能從根本上防治內(nèi)毒素性 腎功能衰竭。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果提示，清熱解毒 類中藥用于動(dòng)物內(nèi)毒素性腎 功能衰竭的臨床防治可能具有良 24 好的應(yīng)用前景，活血化瘀類中 藥也可能具有較好的臨床防治作用，如將兩者配伍應(yīng)用可望取得更好的效果。滲濕利水類中藥對(duì) 內(nèi)毒素性腎衰不大可能取得確 實(shí)的臨床療效，因此不予推薦。關(guān)鍵詞 內(nèi)毒素；急性腎功能衰竭；熱毒清注射液；復(fù)方丹參注射液；五苓注射液；防治作用；防治機(jī)理 奶牛類乙型肝炎組織病理學(xué)觀察譚詩文，艾玉萍，冉懋韜，莊 妍(貴州省畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究所，貴陽市，550005) (貴州省疾病控制中心)我國是病毒乙型肝炎(HB)高發(fā)病國家，人群感染 HBV 約有 億，而 HbsAg 慢性攜帶者則為 億，每年死于 HB 及相關(guān)性疾病者在案 16 萬人以上。HB 已成為我國危害最大的社會(huì)公共衛(wèi)生問題。但近年來獸醫(yī)學(xué)界有關(guān)畜禽感染 HBV 的報(bào)道日益增多，國內(nèi)很多學(xué)者在牛、羊、豬和家禽等多種動(dòng)物血清中檢測出人類乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）和 e 抗原（BheAg），陽性率較高，并用免疫電鏡方法在奶牛血清中觀察到類似 HBsAg 顆粒和 Dane 病毒樣顆粒。在畜禽血清中檢出攜帶有類似乙型肝炎病毒抗原（HBsAg）者，這在公共衛(wèi)生學(xué)上及流行病學(xué)上引起人們極大關(guān)注。人們擔(dān)心攜帶 HBsAg 的動(dòng)物是否能在人的乙型肝炎的傳播上起作用?，F(xiàn)將近幾年來我們對(duì)奶牛類乙型肝炎的檢測和組織病理學(xué)研究情況介紹如下。材料和方法從北京軍事科學(xué)院四環(huán)生物生化制品廠和英科新創(chuàng)科技有限公司購進(jìn) HBsAg 、HBsAb、HbcAb、HBeAg ELISA 診斷試劑盒。用全自動(dòng) ELISA 技術(shù)檢測 610 頭奶牛血清。用肝臟穿刺法。采取 20 頭奶牛肝臟組織活體樣本，保存于 10%福爾馬林中做病理切片觀察。用 HE 和 van Gieson 氏染色法分別對(duì)肝組織切片進(jìn)行染色。采用臨床生化試驗(yàn)技術(shù)檢測 60 頭奶的牛肝功能。結(jié)果 25 在檢測的 610 份奶牛血清中,有 113 頭份血清為 HBsAg（表面抗原）陽性，平均陽性率 %；290 頭奶牛 HBsAB 陽性，平均陽性率為 %，48 頭奶牛 HBeAg陽性，陽性率為 %。在 HBsAg（表面抗原）陽性和 HBeAg 陽性的奶牛（161 頭）中 60 頭奶牛同時(shí)具有 HBsAg、HBeAg 陽性。對(duì)具有 HBsAg、HBeAg 陽性奶牛進(jìn)行肝功能檢測，60 頭中有 18 頭，谷氨酸丙酮轉(zhuǎn)氨酶（GPT）≥谷氨酸草酰酸轉(zhuǎn)氨酶（GOT），GPT 在 400～600 單位，表現(xiàn)為急性病毒性乙型肝炎（AHB）。42 頭奶牛血清 GTP 緩慢上升，緩慢下降，GTP 在 200～300 單位之間，表現(xiàn)為慢性病毒性乙型肝炎（CHB）。根據(jù)肝功能檢測結(jié)果，對(duì)急性和慢性型乙型肝炎各采取 10 頭肝組織做病理形態(tài)觀察。急性乙型肝炎：肝小葉內(nèi)肝細(xì)胞氣泡變性，胞質(zhì)內(nèi)顆粒稀疏，塊狀，HE染色顯得蒼白，細(xì)胞多形性輪廓消失，肝小葉結(jié)構(gòu)尚保存，但肝細(xì)胞索結(jié)構(gòu)紊亂，肝竇狹窄，竇內(nèi)上皮細(xì)胞核變圓變長，常見炎細(xì)胞粘附其間而引起肝竇堵塞，致肝竇壁破壞，毛細(xì)血管堵塞較常見。嚴(yán)重的病例，表現(xiàn)為肝實(shí)質(zhì)壞死呈塊狀，常融合成片，肝小葉及肝索結(jié)構(gòu)消失，殘存的肝細(xì)胞多融合成團(tuán)，一些區(qū)域可見肝細(xì)胞再生，形成團(tuán)塊狀，肝小葉中央靜脈及肝竇內(nèi)充滿紅細(xì)胞及微血栓，上皮細(xì)胞脫落，可見血管再生現(xiàn)象。一些肝細(xì)胞水樣變性和脂肪變性，間質(zhì)膠原纖維增生。慢性病毒性肝炎（CHB）：肝細(xì)胞疏松及灶性氣球樣變，實(shí)質(zhì)內(nèi)見單一或小片肝細(xì)胞壞死,肝小葉結(jié)構(gòu)較完整,肝竇內(nèi)皮細(xì)胞、枯氏細(xì)胞輕度增生,肝內(nèi)血管增生、充血，纖維化較輕。沒有觀察到肝硬化的證病性病理變化。討論HBsAg（表面抗原）陽性的奶牛成為乙型肝炎病毒攜帶者；HBsAB 陽性，的奶牛，說明奶牛曾感染過乙型肝炎病毒并產(chǎn)生了抗體，具有一定的免疫力。有些奶牛