福建農林大學分子生物學(1)-資料下載頁
2025-01-16 20:13本頁面
【正文】 :引起 TDNA轉移的區(qū)域。長度約 35kb，和 TDNA處于不同位置 轉移過程： 農桿菌感染后，植物細胞接受刺 激釋放信號分子， 反過來激活農桿菌 Ti質粒上的 vir基因；農桿菌粘附到植物細胞壁。植物激素誘導 vir基因表達，其表達產物引起 TDNA 脫離質粒，并位移進入植物細胞中 ,進入植物細胞的 TDNA整合并表達。 改建理由： 野生型 Ti 質粒分子量過大、缺乏合適的克隆位點、導致植株產生冠癭病 掌握原則 :保留 TDNA的轉移功能、取消 TDNA的致瘤性、通過簡便手段可使外源 DNA插入 TDNA之中。 CaMV克隆載體 ? 含 1個約 8kb的環(huán)狀雙鏈 DNA分子； ? 用于十字花科和少數非十字花科的植物基因轉移； ? 其感染對植物有害，不能直接做載體； ? CaMV的 DNA在植物細胞中能高水平轉錄35S RNA，其啟動子是一強啟動子。構建的含 35S啟動子的系列克隆載體可在植物細胞內高效表達基因。 Cloning vectors of animal cell 動物病毒： 猿猴病毒 40(SV40)的衍生物 5243 bp共價閉合環(huán)狀分子 感染率高，幾乎 100％寄主細胞能被感染 能提供完整的真核基因轉錄所需的成分 侵染性具有寄主特異性 改建： 野生型最多只能包裝其基因組長度的 DNA分子 其他： 痘苗病毒 DNA作載體，表達乙肝表面抗原 用家蠶的 核多角體病毒 表達人 α 干擾素 反轉錄病毒克隆載體 ? 反轉錄病毒是一類含 RNA的病毒，進入受體細胞后， RNA反轉錄成 DNA，通過兩端由數百 bp組成的長末端重復序列，整合到染色體上，成為原病毒。 ? 只要將外源目的基因組入原病毒 DNA的合適克隆位點，就能在感染的動物細胞中表達。
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