【正文】 切 ? nm23H1基因產(chǎn)物 具有磷酸核苷激酶（ NDPK）的活性 ，參與核內(nèi)三磷酸核苷（ NTP） 的形成 nm23的作用機(jī)制 ? 參與微管的聚合，影響有絲分裂： nm23蛋白與 NDPK高度同源，而 NDPK是存在于胞漿和質(zhì)膜上的激酶，能促使 NDP（ 二磷酸核苷）磷酸化成 NTP（ 三磷酸核苷） NDPK的改變可以引起 NTP 產(chǎn)生不足， 影響細(xì)胞骨架系統(tǒng)中微管蛋白的聚合，抑制細(xì)胞有絲分裂中紡錘體的形成，從而導(dǎo)致染色體的畸變，促使腫瘤發(fā)生 nm23的作用機(jī)制 ? 影響細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)： nm23H1基因轉(zhuǎn)染能阻斷人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株（ L9981） PKC和 ERK的信號(hào)傳導(dǎo)通路，能上調(diào)人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞細(xì)胞株（ L9981） Wnt信號(hào)通路關(guān)鍵激酶 GSK3β 的表達(dá)和活性，靶向阻斷人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株 (L9981)Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路 nm23的作用機(jī)制 ? 與其它癌基因相互調(diào)控，共同影響腫瘤細(xì)胞的增殖與轉(zhuǎn)移潛能 : 在 “ 肺癌轉(zhuǎn)移抑制級(jí)聯(lián) ” 中上調(diào) ?catenin， Ecadherin，TIMP1基因的 mRNA和蛋白轉(zhuǎn)錄表達(dá) ,下調(diào) MMP2，MMP9， CD44V6， VEGF， Eseletion基因的 mRNA和蛋白轉(zhuǎn)錄表達(dá) . Nm23H1與肺癌 ? Nm23H1基因的表達(dá)水平降低 、基因的缺失和突變與肺癌的發(fā)生 ﹑ 發(fā)展轉(zhuǎn)移和預(yù)后存在一定的內(nèi)在聯(lián)系 ? 用 Northern雜交的方法檢測肺癌組織和非癌性組織 ,發(fā)現(xiàn)人肺癌組織 nm23H1基因表達(dá)明顯下降 ? 用 Southern雜交的方法檢測 52列肺癌中 nm23H1等位基因缺失，發(fā)現(xiàn) nm23H1基因缺失以雜合性缺失為主 ,有轉(zhuǎn)移的缺失率明顯高于無轉(zhuǎn)移的 ? 在乳腺癌，肝癌，胃癌，惡性黑色素瘤，卵巢癌中其表達(dá)也與抑制腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān) ? nm23H1的發(fā)現(xiàn)為人類探索腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生的細(xì)胞分子生物學(xué)機(jī)制研究開辟了一條新的途徑 ? 為腫瘤轉(zhuǎn)移在預(yù)防和轉(zhuǎn)移的基因治療研究方面提供了線索 KAI1基因 ? KAI1是繼 nm23H1 后發(fā)現(xiàn)的又一個(gè)腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因 ? 1995年在人前列腺癌細(xì)胞的第 1號(hào)染色體中分離到 ? KAI1定位于染色體 ，由 10個(gè)外顯子組成 ? 編碼細(xì)胞膜糖蛋白 ? 具有充當(dāng)調(diào)節(jié)黏附生長、分化、遷移運(yùn)動(dòng)的大分子蛋白質(zhì)復(fù)合物的組織者的功能 . KAI1基因 ? KAI1基因與腫瘤的轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān) , 其表達(dá)降低可促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移 (肝癌 ﹑ 乳腺癌 ﹑ 胰腺癌 ﹑ 黑色素瘤 ﹑ 結(jié)腸癌 ﹑ 喉癌和肺癌 ) ? KAI基因在腫瘤中的異常表現(xiàn)為 基因突變，等位基因缺失和表達(dá)水平的改變 ? 它的功能與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞與細(xì)胞之間的作用、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間的作用、細(xì)胞的活化與增殖有關(guān)，可能從多個(gè)方面抑制腫瘤轉(zhuǎn)移 ,但具體機(jī)制仍有待闡明 。 腫瘤相關(guān)病毒的分子生物學(xué) 人類的腫瘤 20%與病毒有關(guān) DNA virus 與動(dòng)物或人類腫瘤有關(guān)的致瘤性 DNA病毒 ： ? 病毒的核心是由 DNA和蛋白質(zhì)組成的復(fù)合體 ? 乳頭瘤病毒科 (Aapillomaviridae): 人乳頭瘤病毒 (HPV) ? 腺病毒科 (Adenoviridae):所有型別的腺病毒 ? 皰疹病毒科 : EpsteinBarr病毒 (EBV) ? 嗜肝病毒科 (Hepadnaviridae):乙型肝炎病毒類 (HBV) ? 痘病毒科 (Poxviridae):Shope纖維瘤病毒 ? 多瘤病毒科 (Polyomaviridae):猴病毒 40(SV40) 共同特征： retrovirus LTR gag pol env LTR RNA virus RNA RNA病毒致癌的機(jī)理 (一 ) ? 致癌基因直接引起腫瘤： 急性轉(zhuǎn)化型反轉(zhuǎn)錄病毒感染病毒細(xì)胞后 ,可以 將致癌基因整合到細(xì)胞基因組內(nèi) , 可能從病毒致癌基因轉(zhuǎn)錄mRNA， 翻譯癌基因產(chǎn)物（如蛋白激酶），修飾并活化細(xì)胞的某些蛋白 ，導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化 ﹑ 克隆增殖 ﹑ 形成惡性腫瘤 ? Rous肉瘤病毒的癌基因 vsrc ? 特點(diǎn) : 1. 病毒不僅在感染動(dòng)物致瘤，而且可以使體外培養(yǎng)的細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化 2. 病毒感染細(xì)胞并表達(dá)癌基因的時(shí)間短，為急性轉(zhuǎn)化 3. 病毒感染細(xì)胞后導(dǎo)致轉(zhuǎn)化的頻率較高 4. 產(chǎn)生的腫瘤為多克隆性 . RNA病毒致癌的機(jī)理 (二 ) ? 整合作用引起腫瘤： 病毒自身并不帶癌基因，而是通過整合插入細(xì)胞基因組中，激活鄰近的細(xì)胞原癌基因而導(dǎo)致腫瘤。 小鼠乳腺腫瘤病毒 (MMTV) 不含 vonc，但是當(dāng)其插入宿主基因組后，它的調(diào)控序列能激活毗鄰的宿主癌基因 ? 特點(diǎn) : 1. 不能在體外培養(yǎng)中轉(zhuǎn)化細(xì)胞 2. 病毒致瘤效應(yīng)的潛伏期很長 ,數(shù)月數(shù)周 3. 產(chǎn)生的腫瘤為單克隆 逆轉(zhuǎn)錄病毒與細(xì)胞癌基因活化 RNA病毒 原癌基因結(jié)構(gòu)異常 癌變 隨機(jī)插入 protein1 protein2 DNA病毒的致癌機(jī)理 ? DNA腫瘤病毒是通過同細(xì)胞的癌基因或抑瘤基因的相互作用而破壞細(xì)胞的正常生長 1. 病毒 DNA與宿主細(xì)胞 DNA通過重組而激活某些原癌基因 2. 病毒編碼的蛋白產(chǎn)物結(jié)合到宿主抑癌基因蛋白產(chǎn)物上，并使后者失活而發(fā)揮作用 DNA病毒連接到細(xì)胞蛋白 腫瘤病毒學(xué)研究對(duì)分子腫瘤學(xué) 發(fā)展的貢獻(xiàn) ? 癌基因的發(fā)現(xiàn)直接來源于對(duì) RNA腫瘤病毒的結(jié)構(gòu)和致癌機(jī)理的探索 (Rous肉瘤病毒 ) ? 對(duì)抑癌基因的認(rèn)識(shí)直接受益于 DNA腫瘤病毒致癌機(jī)制的闡明 (SV40的大 T抗原 ,Adv的 E1A) ? 腫瘤病毒學(xué)的發(fā)展將推動(dòng)腫瘤發(fā)生的分子生物學(xué)研究 總結(jié) ? 幾乎所有的腫瘤都有一個(gè)根本的共同特征 , 細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制的破壞 ,導(dǎo)致細(xì)胞的失控性生長 ? 絕大多數(shù)癌基因 ﹑ 抑癌基因不能直接引起腫瘤 , 幾乎所有癌基因和抑癌基因的功效 , 最終都從不同的途徑匯聚到細(xì)胞周期的機(jī)制上來 , 許多癌基因 ﹑ 抑癌基因直接參與細(xì)胞周期的調(diào)控 , 或本身就是細(xì)胞周期調(diào)控的主要成分 腫瘤是一類漸進(jìn)性細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制破壞的疾病 (cell cycle disease) ? 腫瘤的發(fā)生源于遺傳物質(zhì) DNA 的改變 ? 這種改變是多步驟完成的多個(gè)基因變化的細(xì)胞進(jìn)化過程 ? 不僅癌基因之間有協(xié)同作用，癌基因與抑癌基因之間也存在協(xié)同作用 ? 腫瘤作為一種復(fù)雜的多基因疾病，用單基因的特征是難于解釋腫瘤的全部發(fā)病機(jī)理 ? 從多基因的角度探討基因的變化規(guī)律是當(dāng)前研究腫瘤發(fā)病機(jī)制的關(guān)鍵切入點(diǎn) ? cDNA微矩陣基因芯片技術(shù)： 不但可以高敏感度地定量定性檢測基因的表達(dá)水平，而且還可同時(shí)研究同一組織或不同組織中成千上萬個(gè)基因的表達(dá)，改變了 Northern blot﹑ RTPCR 僅對(duì)單個(gè)或幾個(gè)基因表達(dá)水平檢測的局限 ? 蛋白質(zhì)組技術(shù)： 將來的應(yīng)用 ? 腫瘤的分子診斷： 可從分子水平上的標(biāo)記來確定癌癥的存在與 。否 。可以作為腫瘤診斷的早期指標(biāo) ?？勺鳛榕袛嗷颊哂蟮姆肿又笜?biāo) ? 腫瘤的分子治療： 將正常的抑癌基因?qū)氚┘?xì)胞中重建抑癌基因的功能 ,將反義基因?qū)肽[瘤細(xì)胞中 ,抑制癌基因的表達(dá) Thanks for Your Attention!