生物技術(shù)第二講植物組培的培養(yǎng)基-資料下載頁
2025-01-16 18:44本頁面
【正文】 ?取蔗糖 25－ 30g， 瓊脂 7－ 8g。 培養(yǎng)基熬制 ： 并倒入鋁鍋中，搖晃使均勻 。 1/3倒入鋁鍋中，同時(shí)加入稱好的蔗糖和瓊脂，邊煮邊攪拌，防止糊底。 ，再用文火加熱，直至瓊脂全部融化。 ?用 HCl調(diào)PH值為 。 調(diào) PH值： 分裝： ?趁熱分裝， 100ml的三角瓶約裝入 30－40ml 。 扎口與滅菌 : ?要求封口松緊適宜，系活扣，便于接種操作。 ?培養(yǎng)基應(yīng)及時(shí)滅菌，防止變質(zhì) 。 滅菌后，應(yīng)盡快地轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶使其冷卻，一般應(yīng)將滅菌后的培養(yǎng)基儲(chǔ)藏于 30℃ 以下的室內(nèi)名，最好儲(chǔ)藏在 4－ 10℃ 的條件下。 應(yīng)當(dāng)注意的是，某些生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)如 IAA、ZT、 ABA等以及某些維生素是不穩(wěn)定的，不能和其他的培養(yǎng)基一起高壓滅菌，而要進(jìn)行過濾滅菌。 第三節(jié) 培養(yǎng)基的選擇 一、單因子試驗(yàn) 二、多因子試驗(yàn) 三、逐步增減法 四、廣譜試驗(yàn)法 2種激素 5種濃度的實(shí)驗(yàn)組合 Ⅰ 6－ BA（ mg/L) A1 A2 A3 A4 A5 NAA（ mg/L) B1 B2 B4 B3 B5 B1A1 B1A2 B1A3 B1A4 B1A5 B2A1 B2A2 B2A3 B2A4 B2A5 B3A1 B3A2 B3A3 B3A4 B3A5 B4A1 B4A2 B4A3 B4A4 B4A5 B5A1 B5A2 B5A3 B5A4 B5A5 2種激素 3種濃度的實(shí)驗(yàn)組合 Ⅱ NAA（ mg/L) 6－ BA（ mg/L) 低 中 高 低 中 高 低低 低中 低高 中低 中中 中高 高低 高中 高高 廣譜試驗(yàn)法 1 把培養(yǎng)基分為 4個(gè)大類：無機(jī)鹽、生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素和有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。 2 對(duì)每一類物質(zhì)再選定 3個(gè)濃度，既：低（ L)、中（ M）和高（ H）、 4類物質(zhì)各 3種濃度的各種不同組合構(gòu)成了一項(xiàng)包括 81個(gè)處理的試驗(yàn)。 3 在這 81個(gè)處理中最好的一個(gè)用 4個(gè)字母表示，例如：一個(gè)包含中等濃度無機(jī)鹽、低濃度生長(zhǎng)素、中等濃度細(xì)胞分類素和高濃度有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的處理表示為： MLMH。 4 達(dá)到這個(gè)階段后，可以再試驗(yàn)不同類型的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，以找到它們的最好類型。因?yàn)橛行┰囼?yàn)系統(tǒng)對(duì)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分類素這兩類生長(zhǎng)物質(zhì)的具體形式比較敏感。 NAA ? A： NAA 0mg/L， 芽（少），根（無） ? B： NAA ， 芽（少），根（無），愈傷組織（少量） ? C： NAA ， 芽（少），根（多），愈傷組織（一定量） A B C BA ? A： BA(0mg/L) ， 芽（減少），根（增多）愈傷組織（一定量） ? B： BA()， 芽（適量），根（適量）愈傷組織（一定量） A B 復(fù)習(xí)思考題： ? 初代培養(yǎng)，繼代培養(yǎng) ? 初代培養(yǎng)基，繼代培養(yǎng)基 ? MS培養(yǎng)基：瓊脂和蔗糖的加入量一般為多少？ ? 培養(yǎng)基的成分包括哪幾類？ ? 在組織培養(yǎng)中，生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的作用是什么？ ？ ？ 復(fù)習(xí)思考題： 些？ 、 作用及常用的劑量 。 MS培養(yǎng)基 ？ ？
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