【正文】 差示掃描熱分析可用于待測(cè)物質(zhì)的鑒別 、 晶型鑒別 、 純度檢查以及熔點(diǎn)和水分測(cè)定 。 若雜質(zhì)與藥物的量達(dá)一定比例時(shí) ， 供試品的熔點(diǎn)可達(dá)一最小值 ， 此值稱為最低共熔點(diǎn) 。 藥物與雜質(zhì)的低共熔行為是采用 DSC法測(cè)定藥物純度的基礎(chǔ) 。 雜質(zhì)的存在使得藥物的熔點(diǎn)下降 ，并使得熔融曲線變寬 ， 可通過(guò) Van’t Hoff 方程計(jì)算出雜質(zhì)的含量 。 20fm0RTΔH)T(TX ???X:雜質(zhì)的摩爾分?jǐn)?shù)； R：氣體常數(shù)； T0：純物質(zhì)的熔點(diǎn)； Tm：供試品的實(shí)測(cè)熔點(diǎn)； Δ Hf：純物質(zhì)吸收的摩爾熔融熱焓 dQ/dt 1. 第一次升溫的曲線 (A型和 B型兩種晶型的混合物 ) 2. 第二次升溫的曲線 （ 在第一次升溫中 ， A型全部轉(zhuǎn)化為具有生理活性的 B型 ） 無(wú)味氯霉素的ＤＳＣ曲線 82 87 １ ２ dQ/dt T (oC) 機(jī)物檢測(cè)的方法是 ( )， 可用于藥物中揮發(fā)性物質(zhì)檢測(cè)的方法是 （ ） 。 A． 干燥失重測(cè)定法 B． 熾灼殘?jiān)鼨z查 C． 兩者皆是 D． 兩者皆不是 自測(cè)題 B A （ ） 。 A． 熾灼 （ 500～ 600℃ ） 法 B． 常壓恒溫干澡法 C． 減壓干燥法 D． 干燥劑干燥法 E． 熱分析法 （ ） 不超過(guò) 5mm 105℃ 3小時(shí) 十二、 水分的測(cè)定法 藥物中的水分包括結(jié)晶水和吸附水 。 費(fèi)休氏法可以準(zhǔn)確地測(cè)定藥物中的結(jié)晶水 、 吸附水和游離水 。 ： 利用 I2將 SO2氧化成 SO3時(shí) ， 需要一定量的水參與反應(yīng) 。 根據(jù)消耗 I2的量來(lái)測(cè)定水分的含量 。 OHSOI 222 ?? 32 SOHI ?為使以上的可逆反應(yīng)往正方向進(jìn)行完全 ， 加入無(wú)水吡啶能定量地吸收反應(yīng)產(chǎn)物 HI和 SO3， 形成氫碘酸吡啶和硫酸酐吡啶： 但硫酸酐吡啶不穩(wěn)定 ， 可與水發(fā)生副反應(yīng) ， 加入無(wú)水甲醇可形成穩(wěn)定的甲基硫酸氫吡啶： N N H I N O2S O I2+SO2+3 +H2O + 2 N O2S O N H SO4CH3 +CH3OH 滴定的總反應(yīng)為： N H SO4CH3 N N H I I2+SO2+3 +CH3OH+H2O + 2 水與費(fèi)休氏試液作用的摩爾比為： 水 :碘 :二氧化硫 :甲醇 :吡啶 =1:1:1:1:3 無(wú)水吡啶和無(wú)水甲醇不僅參與反應(yīng) ， 而且還起溶劑作用 。 費(fèi)休氏試液的配制 稱取碘 （ 置硫酸干燥器內(nèi) 48小時(shí)以上 ） 110g，置干燥錐形瓶中 ， 加無(wú)水吡啶 160ml， 振搖至碘全部溶解 ， 加無(wú)水甲醇 300ml， 稱定重量 ，將錐形瓶置于冰浴中冷卻 ， 在避免空氣中水分侵入的條件下 ， 通入干燥的二氧化硫至重量增加 72g， 再加無(wú)水甲醇使成 1000ml， 密塞 ，搖勻 ， 于暗處放置 24小時(shí)后進(jìn)行標(biāo)定 。 1 0 0 %W FB)(A( % ) ???供 試試 品中水分的含量： 取供試品適量 （ 約消耗費(fèi)休氏試液 1～ 5ml） ，加入無(wú)水甲醇 2～ 5ml， 不斷攪拌下 ， 用費(fèi)休氏試液滴定至終點(diǎn) （ 顏色由淡黃色變成紅棕色 ） 。 另取無(wú)水甲醇 2～ 5ml， 按同法進(jìn)行空白實(shí)驗(yàn) 。 A：供試品所消耗的費(fèi)休氏試液的體積 （ ml） B：空白所消耗的費(fèi)休氏試液的體積 （ ml） F:每 1ml費(fèi)休氏試液相當(dāng)于水的重量 （ mg） W：供試品的重量 十三、殘留溶劑測(cè)定法 藥品中的殘留溶劑是指在合成原料藥 ， 輔料或制劑生產(chǎn)的過(guò)程中使用的 ， 但在工藝中未能完全除去的有機(jī)溶劑 。 溶劑殘留量的限度要求按有機(jī)溶劑毒性的程度分為三類 。 一類 有機(jī)溶劑毒性較大 ， 且具有致癌并對(duì)環(huán)境有害 ， 應(yīng)盡量避免使用； 二類 有機(jī)溶劑對(duì)人有一定毒性 ， 應(yīng)限量使用； 三類 有機(jī)溶劑對(duì)人的健康危險(xiǎn)性較小 ， 推薦使用 。 一類溶劑： 苯 、 四氯化碳 、 1,2二氯乙烷 、 1,1二氯乙烯 、1,1,1,三氯乙烷等 二類溶劑： 乙腈 、 氯苯 、 環(huán)己烷 、 二氯甲烷 、 乙二醇 、 甲醇 、 正己烷 、 吡啶 、 四氫呋喃 、 甲苯硝基甲烷 、 二甲苯 、 甲苯等 三類溶劑： 乙酸 、 丙酮 、 正丁醇 、 乙醇 、 乙醚 、 甲酸 、 乙酸乙酯 、異丙基苯 、 甲氧基苯 、 二甲亞砜 、 正庚烷等 : 中國(guó)藥典規(guī)定殘留有機(jī)溶劑的檢測(cè)方法為氣相色譜法（填充柱或毛細(xì)管柱）； 檢測(cè)器通常使用火焰離子化檢測(cè)器 （ FID） ，對(duì)含鹵素元素的殘留溶劑 （ 如三氯甲烷等 ） ，采用電子俘獲檢測(cè)器 （ ECD） ， 易得到高的靈敏度 。 采用 FID時(shí)需加尾吹氣 。 其作用是：保證檢測(cè)器在高靈敏狀態(tài)下工作 ， 同時(shí)消除檢測(cè)器死體積的柱外效應(yīng) 。 : 色譜柱類型 固定液 /固定相 填充住 乙二烯苯 乙基乙烯苯型高分子多孔小球 毛細(xì)管柱 非極性 100%的二甲基聚硅氧烷 極性 聚乙二醇 (PEG20M) 中極性 (35%)二苯基 (65%)甲基聚硅氧烷 (50%)二苯基 (50%)二甲基聚硅氧烷 (35%)二苯基 (65%)二甲基亞芳基聚硅氧烷 (14%)氰丙基苯基 (86%)甲基聚硅氧烷 (6%)氰丙基苯基 (94%)二甲基聚硅氧烷 弱極性 固定液為 :(5%)苯基 (95%)甲基聚硅氧烷 和 (5%)二苯基 (95%)二甲基亞芳基硅氧烷 共聚物 3. 色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 中國(guó)藥典規(guī)定 ， 在殘留溶劑測(cè)定前應(yīng)作色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 。 ① 用待測(cè)物的色譜峰計(jì)算 ， 填充柱法和毛細(xì)管柱法 的理論板數(shù)應(yīng)分別大于 1000和 5000。 ② 待測(cè)物色譜峰與相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于 。 ③ 以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí) ， 對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣 5次 ， 所得待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于 5%；如以外標(biāo)法測(cè)定 ， 應(yīng)不大于 10％ 。 普通的填充柱采用直接進(jìn)樣法測(cè)定，毛細(xì)管色譜柱采用頂空進(jìn)樣法測(cè)定。 進(jìn)行有機(jī)溶劑限度測(cè)定時(shí)，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定來(lái)確定對(duì)照品溶液的濃度； 進(jìn)行定量測(cè)定時(shí)，應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的實(shí)際殘留量來(lái)確定對(duì)照品溶液的濃度。 通常對(duì)照品溶液色譜峰面積與供試品溶液中對(duì)應(yīng)殘留溶劑色譜峰面積以不超過(guò) 2倍為宜。 頂空進(jìn)樣 頂空進(jìn)樣是將樣品溶液密封在一個(gè)樣品不充滿的容器中在一定溫度下加熱一段時(shí)間 ， 使氣液相達(dá)到平衡 ， 然后取氣相部分進(jìn)入 GC分析 ， 測(cè)定樣品上方蒸汽中的組分在原樣品中的含量 。 基本原理： 色譜峰面積 （ Ai） 與溶液中的揮發(fā)性組分 （ i） 的蒸氣壓 （ Pi） 成正比 ,也即與其在溶液中的濃度成正比 i0iiiiii XPγfPfA ??????fi：與物質(zhì)種類及檢測(cè)器有關(guān)的常數(shù)； Pio： i 組分在一定溫度下的蒸汽壓； Xi： i 組分在溶液中的摩爾分?jǐn)?shù) ， 與其濃度成正比； γ=1時(shí)為符合拉烏爾定律的理想溶液 。 ① 毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法 （ 第一法 ） 色譜條件： 柱溫： 40～ 100℃ ；載氣：氮?dú)?， 流速： ～；頂空瓶加熱溫度： 70～ 85℃ ， 加熱時(shí)間： 30～ 60min； 進(jìn)樣口溫度： 200℃ 。 FID檢測(cè)器溫度： 250℃ 。 溶液的制備 ： 通常以水為溶劑；對(duì)于非水溶性藥物 ， 可采用 N,N二甲基甲酰胺或二甲基亞砜或其他適宜溶劑 。 所選溶劑應(yīng)不干擾待測(cè)溶劑的測(cè)定 。 測(cè)定 ： 取對(duì)照品溶液和供試品溶液 ， 分別連續(xù)進(jìn)樣不少于2次 ， 測(cè)定待測(cè)峰的峰面積 。 不適宜頂空法測(cè)定的殘留溶劑有： ? 甲酰胺 ? 2甲氧基乙醇 ? 乙二醇 ? N甲基咯烷酮 。 ② 毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣升溫法 （ 第二法 ） 本法適用于被檢查的有機(jī)溶劑數(shù)量較多 ， 并且極性差異較大的情況 。 色譜條件： 如為非極性色譜系統(tǒng) ,柱溫先在 30℃ 維持 7min， 再以 8 ℃ /min的速度升至 120℃ ， 維性持 15min。 如為極性色譜系統(tǒng) ,柱溫先在 60℃ 維持 6min， 再以 8 ℃ /min的速度升至 100℃ ， 維持 20min。 色譜條件 （ 續(xù) ） ： ? 載氣：氮?dú)?， 流速： ? 頂空瓶加熱溫度： 70～ 85 ? 加熱時(shí)間： 30～ 60min ? 進(jìn)樣口溫度： 200 ? FID檢測(cè)器溫度： 250℃ 測(cè)定 ： 取對(duì)照品溶液和供試品溶液 ， 分別連續(xù)進(jìn)樣不少于 2次 ， 測(cè)定待測(cè)峰的峰面積 。 ③ 溶液直接進(jìn)樣法 （ 第三法 ） 溶液的制備： 精密稱取供試品適量 ， 用水或合適的有機(jī)溶劑溶解；根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定 ， 配置供試品溶液 ， 使其濃度滿足系統(tǒng)定量測(cè)定的需要 。 采用與制備供試品溶液相同的方法和溶劑制備對(duì)照品溶液 。 測(cè)定 ： 取對(duì)照品溶液和供試品溶液 ， 分別連續(xù)進(jìn)樣不少于 3次 ， 每次 2μ l， 測(cè)定待測(cè)峰的峰面積 。