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正文內(nèi)容

常見的生化與分子生物學(xué)技術(shù)大串講-資料下載頁

2025-01-13 22:32本頁面
  

【正文】 風桿菌是一種厭氧菌,它只能通過糖酵解產(chǎn)生 ATP,因此產(chǎn)生的 ATP數(shù)目是 2個。至于 1分子葡萄糖在含有大量的砷酸的紅細胞內(nèi)產(chǎn)生多少 ATP的問題要考慮到紅細胞沒有線粒體,故只能通過糖酵解產(chǎn)生 ATP,其次要考慮到砷酸在糖酵解那一步由甘油醛 3磷酸脫氫酶催化的反應(yīng)中代替無機磷酸以后,形成的甘油酸 1砷酸 3磷酸很容易自發(fā)水解,而導(dǎo)致后面的底物水平磷酸化不能進行,因此最后產(chǎn)生的 ATP數(shù)目是為 0。 實例 生物大分子生物合成的極性 ? DNA、 RNA、蛋白質(zhì)、多糖和脂肪酸的生物合成都有一定的方向性,這就是所謂的極性問題。為方便記憶,可以放在一起比較。 DNA和 RNA合成的方向都是從 5′→3′ ,而蛋白質(zhì)生物合成的方向總是從 N端 → C端,閱讀 mRNA模板的方向也總是從5′→3′ ,多糖的合成以糖原為例,總是從還原端向非還原端,而脂肪酸的合成從甲基端向羧基端。在書寫 DNA、 RNA和蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)的時候,正好按照它們生物合成的方向來寫。然而,人工合成核酸和蛋白質(zhì)的方向正好與生物合成的方向相反,這一點需要注意。 DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯的校對機制 ? 校對的目的是維持各自的忠實性。 DNA復(fù)制是通過 DNA聚合酶內(nèi)在的 3′外切酶活性來校對; RNA聚合酶本身無任何外切酶活性,但通過特殊的蛋白質(zhì)也可以進行校對;氨酰 tRNA合成酶具有校對中心,將誤載的氨基酸切除。 如何理解 “ 信號學(xué)說 ” ? ? “信號學(xué)說”是用來解釋細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)如何各得其所、各就各位的。其基本內(nèi)容是:各種蛋白質(zhì)在細胞中的最終定位由多肽鏈本身所具有的特定氨基酸序列決定。這些特殊的氨基酸序列起著一種信號向?qū)У淖饔?,因此被稱為信號序列。在某種意義上,一個蛋白質(zhì)分子上的信號序列相當于它特有的“分子郵政編碼”。如果一個蛋白質(zhì)缺乏任何一種信號序列,則會留在其“默認”的位置 —— 細胞液,如參與糖酵解和磷酸戊糖途徑的酶。 ? 注意有兩類指導(dǎo)蛋白質(zhì)分撿的信號,需要將它們區(qū)分開來:一類稱為信號肽,其本質(zhì)是一段在一級結(jié)構(gòu)上連續(xù)的氨基酸序列,通常有 15~60個氨基酸殘基,它們有的在 N端,有的在 C端,有的在多肽鏈的內(nèi)部。還有的蛋白質(zhì)不止一種信號序列。這類信號肽序列通常在蛋白質(zhì)分揀完成以后被信號肽酶切除。引導(dǎo)蛋白質(zhì)從細胞液進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、胞外、細胞核、線粒體、葉綠體和過氧化物酶體的分揀信號屬于信號肽序列;另一類為信號斑。存在于已折疊的蛋白質(zhì)中,是蛋白質(zhì)在完成折疊以后,在其表面形成的由來自不同區(qū)域的氨基酸序列組合在一起的三維分揀信號。例如,引導(dǎo)蛋白質(zhì)定向運輸?shù)饺苊阁w的就是信號斑,它是溶酶體酸性水解酶被高爾基體選擇性糖基化的標識。 組與組學(xué) ?基因組與基因組學(xué) ?蛋白質(zhì)組與蛋白質(zhì)組學(xué) ?轉(zhuǎn)錄組與轉(zhuǎn)錄組學(xué) ?代謝組與代謝組學(xué)
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