動(dòng)物生物化學(xué)4核酸-資料下載頁(yè)
2025-01-13 09:47本頁(yè)面
【正文】 分子中?？梢砸?jiàn)到局部區(qū)域堿基互補(bǔ) 形成的螺旋結(jié)構(gòu)，稱為“莖環(huán)”結(jié)構(gòu)或“發(fā)卡”結(jié)構(gòu) tRNA RNA的結(jié)構(gòu) 紫外吸收的特性 嘌呤和嘧啶在 260 nm有特異的吸收峰 ,這個(gè)性質(zhì)用于核酸的分析 溶解性 溶于偏堿的溶劑中，可以為乙醇沉淀，容易受機(jī)械作用力而斷裂。 黏性 DNA溶液有高度的黏性 DNA分子的變性 DNA雙螺旋的有序結(jié)構(gòu)受各種理化因子，如熱、酸堿、變性劑、有機(jī)溶劑以及稀釋的作用，轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)規(guī)則的線團(tuán)結(jié)構(gòu)。 變性的特征 增色效應(yīng) , 黏度和比旋下降，沉降系數(shù)增加，生物學(xué)活性喪失 DNA解鏈曲線 增色效應(yīng) (hyperchromic effect) 核酸分子加熱變性時(shí)，其在 260nm處的紫外吸收急劇增加的現(xiàn)象。 Tm值 ： 當(dāng)紫外吸收變化達(dá)到最大變化的半數(shù)值時(shí)，此時(shí)所對(duì)應(yīng)的溫度稱為熔解溫度（ Tm ）、變性溫度或中點(diǎn)解鏈溫度。 影響 Tm值的因素 大腸桿菌 DNA在不同濃度 KCl溶液下的熔融溫度曲線 復(fù)性 復(fù)性：變性 DNA分開(kāi)的兩股鏈在適當(dāng)條件下重新生成雙鏈結(jié)構(gòu)的過(guò)程 退火 （ annealing ） : 熱變性的DNA經(jīng)緩慢冷卻復(fù)性的過(guò)程 。 分子雜交 當(dāng)兩條不同來(lái)源的 DNA（或 RNA）鏈或 DNA鏈與 RNA鏈之間存在互補(bǔ)的堿基序列時(shí)，在一定條件下可以通過(guò)互相配對(duì)形成雙螺旋分子，這種分子稱為 雜交分子 。形成雜交分子的過(guò)程稱為 分子雜交（ molecular hybridization） 。 核酸探針（ nucleic acid probe） :某一具有特定序列并且用同位素或其他化學(xué)方法標(biāo)記的 DNA或 RNA片段。通常是人工合成的。 分子雜交圖 分子雜交技術(shù)的應(yīng)用 ?通過(guò)同源性比較 ,研究不同物種或個(gè)體 DNA之間的親緣關(guān)系； ?通過(guò)雜交的嚴(yán)緊性 ,發(fā)現(xiàn)基因的缺失或突變； ?通過(guò)標(biāo)記信號(hào)的強(qiáng)度 ,測(cè)定某種遺傳信息量的多少； ?證明某種疾病 (如腫瘤 )是否與某種基因 (如病毒基因 )有關(guān)。 利用核酸探針，可以： ?用于鑒定 DNA的 Southern印跡技術(shù) ?用于鑒定 RNA的 Northern印跡技術(shù) ?原位雜交技術(shù) ?基因芯片技術(shù)等 將在第 17章中介紹 以分子雜交為基礎(chǔ)建立起的分子生物學(xué)研究技術(shù)有： 本章結(jié)束
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