【正文】 因?yàn)?lacZ+ 細(xì)菌克隆 (與適當(dāng)?shù)牡孜锕灿龝r(shí) )會(huì)變藍(lán)，而 lacZ克隆則還是白色。你把兩種噬菌體 DNA的混合物變性后退火，得到兩份相等的雜交雙鏈與純合雙鏈的混合物 (圖 8． 2) 然后你將混合物包裝 到噬菌體外殼中，侵染 lacZ細(xì)菌，并把被侵染細(xì)菌涂布在含四環(huán)素和可產(chǎn)生有色底物的平板上。一旦噬菌體 DNA 進(jìn)入了細(xì)菌，轉(zhuǎn)座子將進(jìn)入細(xì)菌基因組 (頻率很低 )，給細(xì)菌帶來四環(huán)素抗性。獲得一個(gè) Tn10 的稀有野生細(xì)菌 , 可以在選擇條件下生存并形成克隆。統(tǒng)計(jì)大量這樣的克隆會(huì)發(fā)現(xiàn)有 25％為白色， 25% 為藍(lán)色， 50％為藍(lán)色部分與白．色部分的混合物； (1)解釋每種細(xì)菌克隆的來源并確定結(jié)果是否能說明 Tn10復(fù)制或不復(fù)制的轉(zhuǎn)座機(jī)制 (2)你使用了一種無法修復(fù) DNA錯(cuò)配的細(xì)菌苗株作為受體，來做這些實(shí)驗(yàn)。如果你用可以修復(fù)錯(cuò)配的細(xì) 菌苗株作為受體那么結(jié)果會(huì)有什么不同 ? (3)λ噬菌體 DNA通過位點(diǎn)專一重組整合到細(xì)菌基因組上要比轉(zhuǎn)座更常見，如果你用能復(fù)制但不能整合的 λ噬菌體突變體結(jié)果有什么不同 ? 類型：分析題 答案： 答： (1)所有菌落肯定是由 Tn10 轉(zhuǎn)座進(jìn)入細(xì)菌基因組產(chǎn)生的，因?yàn)榇婊钜蕾囉?Tn10 所攜帶四環(huán)素抗性基因的存在。主要觀察到的是出現(xiàn)了藍(lán)色和白色的混合菌落，因?yàn)榛旌暇涞臋C(jī)率很高而轉(zhuǎn)座機(jī)率很低，所以混合菌落在單轉(zhuǎn)座中是很常見的?？蓮?fù)制機(jī)制每次只能轉(zhuǎn)移親代雙螺旋中的一條鏈，產(chǎn)生藍(lán)色或白色菌落，這全看哪條鏈被轉(zhuǎn)移，而非 復(fù)制機(jī)制可轉(zhuǎn)移雜合雙鏈的兩條鏈，并復(fù)制分離成姐妹細(xì)菌，產(chǎn)生混合菌落 (一旦細(xì)菌在細(xì)菌培養(yǎng)基中被分離，最初被感染細(xì)胞的子代被限制在鄰近地方共同生長形成菌落。如果第一次分裂產(chǎn)生不同姐妹細(xì)菌，那它們的子代會(huì)長在一起產(chǎn)生一個(gè)包含兩種不同細(xì)菌的單一菌落 )。純的藍(lán)色或白色菌落是由同源雙鏈參與轉(zhuǎn)座產(chǎn)生的。藍(lán)色，白色和混合菌落的比例和從異 源雙鏈 (使混合菌落數(shù)增加 )與同源雙鏈 (使純菌落數(shù)增加 )混合物的比例所預(yù)計(jì)到的一樣。 (2)每個(gè)雜合雙鏈對(duì)應(yīng) lacZ 基因突變的位置都含有一個(gè)錯(cuò)配 DNA 區(qū)域。如果這些雜合雙鏈被導(dǎo)入可修復(fù)這種錯(cuò) 誤的細(xì)菌，那么混合菌落數(shù)將下降。關(guān)鍵是，一次修復(fù)可將一個(gè)雜合雙鏈轉(zhuǎn)變成一個(gè)純合雙鏈。如果錯(cuò)配修復(fù)對(duì)兩條鏈的修復(fù)機(jī)會(huì)是等同的，那白色與藍(lán)色菌落的出現(xiàn)頻率同樣上升。 (3)如果你用了整合態(tài)的噬菌體基因組，那么存活的菌落來自位點(diǎn)專一重組，這是比轉(zhuǎn)座更有效的一種重組。位點(diǎn)專一重組可整合噬菌體基因組的雙鏈。這樣，藍(lán)色，白色和混合菌落的比例和非復(fù)制轉(zhuǎn)座一樣。事實(shí)上，在實(shí)際確定轉(zhuǎn)座機(jī)制的實(shí)驗(yàn)中，整合態(tài)的 λ噬菌體被作為正對(duì)照和轉(zhuǎn)座結(jié)果相比較，兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果一致。 題目圖片： 題目圖片： 下列關(guān)于 VSG基因轉(zhuǎn)錄活性的敘述是正確的有： ( ) 類型：選擇題 選擇： (a) 只有在表達(dá)位點(diǎn)的 VSG基因被轉(zhuǎn)錄 (b) ELC(expression linked copy)總是位于端粒附近 (c)將內(nèi)部的 VSG基因拷貝復(fù)制到表達(dá)位點(diǎn)可以改變表達(dá)位點(diǎn)的 VSG基因 (d)不需經(jīng)過基因復(fù)制，端粒附近的 VSG基因就可以被激活 (e)少數(shù)情況下，通過不同的 VSG基因拷貝在表達(dá)位點(diǎn)組裝可以產(chǎn)生一個(gè)新的 VSG 基因 (f)以上都正確 答案： F。 位于 ELC 的 VSG基因有一個(gè)不尋常的結(jié)構(gòu)，包括： ( ) 類型：選擇題 選擇： (a)不含限制性內(nèi)切酶切割位點(diǎn)的 5’無義區(qū) (b)由一個(gè)簡單序列重復(fù)多次組成的 3’無義區(qū) (c)以上都正確 (d)以上都不正確 答案： C； 哪些有關(guān)免疫球蛋白基因重排的敘述是正確的 ?( ) 類型：選擇題 選擇：（ a）所有物種中 V基因的數(shù)目是一樣的 （ b） J 是恒定區(qū)的一部分 （ c）各部分連接時(shí)，將產(chǎn)生缺失或重排 (d)當(dāng)一個(gè)等位基因中發(fā)生有意義的重排時(shí)，另一個(gè)等位基因也發(fā)生重排 答案： C； 分析比較 細(xì)菌轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)。 類型：簡答題 答案： 答： 1974年，隨著發(fā)現(xiàn)與抗生素抗性有關(guān)的基因可以在質(zhì)粒與細(xì)菌的染色體之間轉(zhuǎn)移，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了轉(zhuǎn)座子。轉(zhuǎn)座子比 IS元件大很多 (一般為 2—20kb)，它們至少含有一個(gè)基因，給宿主帶來可遺傳的標(biāo)記，一般是對(duì)一種或多種抗生素的抗性。這是一種非常有用的性質(zhì)，因?yàn)槊糠N質(zhì)?？梢杂靡环N轉(zhuǎn)座子 “標(biāo)記 ”，這樣通過對(duì)藥物的抗性表型可以簡單地檢測質(zhì)粒的存在和轉(zhuǎn)移；同樣，可以輕易地觀察到轉(zhuǎn)座。轉(zhuǎn)座子 Tn5(圖 )長 ，是一種結(jié)構(gòu)最簡單的轉(zhuǎn)座子 。它由三個(gè)成分組裝 而成：一個(gè)長中心區(qū) (2—7kb)，含有卡那霉素的抗性基因，兩端為一對(duì) IS元件，每個(gè)長 ，方向相反。其他的轉(zhuǎn)座．子兩端為不同的 IS 元件，有時(shí)兩個(gè) IS同向。這些轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座類似 IS 元件，轉(zhuǎn)座過程中宿主的一個(gè)序列或 DNA 靶位點(diǎn)被復(fù)制。發(fā)生轉(zhuǎn)座首先是因?yàn)槿我庖粋€(gè) IS 序列或兩個(gè) IS 序列同時(shí)起作用，編碼一個(gè)轉(zhuǎn)座酶 (在某些元件中，如 Tn5，一個(gè) IS只有部分功能，不能編碼一個(gè)有活性的轉(zhuǎn)座酶 )。其次，轉(zhuǎn)座子兩端通常有一對(duì)與 IS 特異相應(yīng)的反向重復(fù)序列：無論 IS元件是正向還是反向的，這些末端重復(fù)序列都存在。 還有一種可能 性：任一對(duì) IS元件可以相互作用使它們之間的任意序列轉(zhuǎn)座，這樣任一個(gè)基因都可以在兩端連上兩個(gè)同樣的 IS 元件成為轉(zhuǎn)座子 。這個(gè)性質(zhì)已被用構(gòu)建重組 DNA分子。 Tn5因?yàn)槠浣M件的組成被稱為集成轉(zhuǎn)座子。其他轉(zhuǎn)座子，如復(fù)雜的轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)是不同的；它們兩端不是一對(duì) IS而是一對(duì)反向重復(fù)，編碼轉(zhuǎn)座所需蛋白的基因位于轉(zhuǎn)座子的中心區(qū)。 答案圖片： 以下關(guān)于抗體類型轉(zhuǎn)變的敘述哪些是正確的 ?( ) 類型：選擇題 選擇： (a) 每種重鏈具有不同的功能 (b)類型轉(zhuǎn)變的次序按染色體上重鏈排列順序進(jìn)行 (c)一旦一種類型轉(zhuǎn)換發(fā)生，其他的轉(zhuǎn)換將不再進(jìn)行 (d)也可通過可變剪接改變重鏈 答案： a， b， d 鋅指蛋白與鋅的結(jié)合 ( ) 類型：選擇題 選擇：（ a）是共價(jià)的 (b)必須有 DNA 的存在 (c)通過保守的胱氨酸和組氨酸殘基間協(xié)調(diào)進(jìn)行 (d)位于蛋白質(zhì)的 α—螺旋區(qū)域 答案： c； 鋅指蛋白與 DNA 的 結(jié)合 ( ) 類型：選擇題 選擇： (a)位于 DNA大溝 (b)通過 “鋅指 ”的 C 端進(jìn)行 (c)利用蛋白的 —螺旋區(qū)域 (d)每個(gè) “指 ”通過形成兩個(gè)序列特異的 DNA 接觸位點(diǎn) (e)通過 “指 ”中保守的氨基酸同 DNA 結(jié)合 答案： a， b， c， d 甾醇類受體轉(zhuǎn)錄因子 ( ) 類型：選擇題 選擇：（ a）結(jié)合的激素都是相同的 (b)與 DNA的結(jié)合不具序列特異性 (c)與鋅結(jié)合的保守序列不同于鋅指蛋白 (d)通過第二 “指 ”C端的氨基酸形成二聚體 (e)參與轉(zhuǎn)錄激活，與 DNA和激素結(jié)合分別由不同的結(jié)構(gòu)域完成 答案： c， e； 糖皮質(zhì)激素類的甾醇受體 ( ) 類型：選擇題 選擇： (a)是同源二聚體 (b)所結(jié)合的 DNA回文序列都不相同 (c)結(jié)合的回文序列相同，但組成回文序列兩段 DNA 間的序列不同 (d)RXR 受體通過形成異源二聚體后與同向重復(fù)序列結(jié)合 (e)這類受體存在于細(xì)胞核中 答案： a， c， e； 同源異型域蛋白 ( ) 類型：選擇題 選擇： (a)形成具有三個(gè) α—螺旋的結(jié)構(gòu) (b)主要通過 α—螺旋 3和 N端的臂與 DNA接觸 (c)與原核生物螺旋 —轉(zhuǎn)角 —螺旋蛋白 (如阻遏物 )的結(jié)構(gòu) 很相似 (d)通常存在于細(xì)胞核中 (e)在果蠅早期發(fā)育調(diào)控中起重要作用 答案： a， b， c， e； HLH蛋白 ( ) 類型：選擇題 選擇： (a)在序列組成上與原核生物螺旋 —轉(zhuǎn)角 —螺旋蛋白具有相關(guān)性 (b)通過環(huán)區(qū)與 DNA結(jié)合 (c)形成兩個(gè) α—螺旋與 DNA的大溝結(jié)合 (d)由形成兩性螺旋，其中疏水殘基位于螺旋的一側(cè) (e)以上都不是 答案： d； bHLH蛋白 ( ) 類型：選擇題 選擇： (a)在環(huán)中含有保守的堿性氨基酸 (b)不能形成同源二聚體 (c)非誘導(dǎo)表達(dá) (d)通過它 們堿性區(qū)與 HLH相互作用 (e)只有與 HLH形成異源二聚體后才與 DNA結(jié)合 (f)以上都不是 答案： F。 以下關(guān)于亮氨酸拉鏈蛋白的敘述哪一項(xiàng)是正確的 ?( ) 類型：選擇題 選擇： (a)它們通過保守的亮氨酸殘基與 DNA 結(jié)合 (b)它們與 HLH蛋白相似之處是：它們都具有相鄰的 DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和二聚化結(jié)構(gòu)域 (c)Jun蛋白可以形成同源二聚體而 Fos 蛋白不可以 (d)由 Fos／ Jun復(fù)合物與 Jun/Jun復(fù)合物結(jié)合的 DNA 序列不同 (e)Fos／ Jun與 DNA的結(jié)合比 Jun/Jun牢固 答案： b， c， e； 選出所有正確的選項(xiàng)： ( ) 類型：選擇題 選擇： (a)基因必須經(jīng)過完全的甲基化才能表達(dá) (b)具有活性的 DNA是非甲基化的 (c)隨著發(fā)育階段的改變， DNA 的甲基化也要發(fā)生變化 (d)在 DNA復(fù)制過程中，通過識(shí)別半甲基化的酶，甲基化得以保存 答案： b， c， d； 下列哪些轉(zhuǎn)錄因子含有 TBP?( ) 類型：選擇題 選擇： (a) B (b) A (c)SLl (d) TFⅡ D (e) TFⅢ B (f)UBFl 答案： c， d， e； 下列哪些轉(zhuǎn)錄因子 是裝配因子 ?( ) 類型：選擇題 選擇： (a)SPl (b) TFⅢ B (c) TFⅡ H (d)以上都不是 答案： d； 以下關(guān)于 TBP的陳述哪些是正確的 ?( ) 類型：選擇題 選擇： (a)TBP 誘導(dǎo) DNA發(fā)生彎曲 (b)TBP結(jié)合于 DNA雙螺旋的大溝 (c)TBP通過與不同的蛋白結(jié)合來識(shí)別不同的啟動(dòng)子 (d)TBP 與聚合酶 I、聚合酶 Ⅱ 和聚合酶的共同亞基作用 答案： a， c， d； TATA框存在于 ( ) 類型：選擇題 選擇： (a)聚合酶 Ⅱ 識(shí)別的所有啟動(dòng)子中 (b)聚合酶 Ⅱ 識(shí)別的大部分啟動(dòng)子中 (c)聚合醇 Ⅱ 識(shí)別的極少數(shù)啟動(dòng)子中 (d)聚合酶 Ⅲ 識(shí)別的所有啟動(dòng)子中 (e)聚合酶 Ⅲ 識(shí)別的大部分啟動(dòng)子中 (f)聚合酶 Ⅲ 識(shí)別的極少數(shù)啟動(dòng)子中 答案： b， f RNA聚合酶 Ⅱ 的 C 端結(jié)構(gòu)域 (CTD)的磷酸化與 ( )相關(guān) 類型：選擇題 選擇： (a)與起始前復(fù)合體的結(jié)合 (b)TFⅡ H的激酶活性 (c) TFⅡD中特異 TAF蛋白的存在 (d)從起始聚合酶到延伸聚合酶的轉(zhuǎn)換 (e)起始因子 TFⅡ A， TFⅡ B及 TFⅡ D的釋放 答案： b， d， e； 下列哪個(gè) (些 )情況能解釋為什么一些基因在它們的轉(zhuǎn)錄因子存在時(shí)并不總是處于活性狀態(tài) ?( ) 類型：選擇題 選擇： (a)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的鄰近序列 (b)有其他蛋白的結(jié)合 (c)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)狀態(tài) (d)缺少共激活蛋白 (e)以上都是 答案： e 真核細(xì)胞中的 RNA 聚合酶僅在細(xì)胞核中有活性。 類型：判斷題 答案： 錯(cuò)誤。 在 RNA的合成過程中， RNA鏈沿 3’到 5’方向延長。 類型：判斷題 答案： 錯(cuò)誤。 候選三磷酸核苷通過對(duì)生長中 RNA鏈的 α磷酸的親和攻擊加到鏈 上。 類型：判斷題 答案： 正確。 核不均一 RNA是 mRNA和 rRNA的前體而不是 tRNA的前體 . 類型：判斷題 答案： 錯(cuò)誤。 密碼子 AUG 專門起 mRNA 分子編碼區(qū)的終止作用。 類型：判斷題 答案： 錯(cuò)誤。 fMet的 tRNA的反密碼子是 TAC。 類型：判斷題 答案： 錯(cuò)誤。 細(xì)菌細(xì)胞用一種 RNA 聚合酶轉(zhuǎn)錄所有的 RNA，而真核細(xì)胞則有三種不同的 RNA聚合酶。 類型：判斷題 答案： 正確。 轉(zhuǎn)錄因子具有獨(dú)立的 DNA結(jié)合和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域。 類型：判斷題 答案： 正確。 每個(gè)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)被單個(gè)轉(zhuǎn)錄因子識(shí)別。 類型：判斷題 答案： 錯(cuò)誤。 糾正下列一段話中的錯(cuò)誤： 在 ，通過 RNA聚合酶同操縱基因的結(jié)合來起始轉(zhuǎn)錄。與轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)堿基互 補(bǔ)的 dNTP同 δ亞基結(jié)合，然后是第二個(gè) dNTP通過與第一個(gè) dNTP形成 2’—5’磷酸 二酯鍵而結(jié)合上。當(dāng)生成的 RNA 鏈約有 12個(gè)核苷酸長度時(shí)， β亞基脫離 DNA聚合酶， RNA鏈在全酶的作用下繼續(xù)延伸。當(dāng) DNA聚合酶在 RNA 鏈上遇到終止密碼子時(shí)，轉(zhuǎn)錄作用停止。 類型：判斷題 答 案： 此段敘述中的錯(cuò)誤部分用下劃線標(biāo)出，并在后面進(jìn)行更正： 在 中，通過 RNA 聚合酶同操縱基因的結(jié)合來起始轉(zhuǎn)錄。與轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)堿基互補(bǔ)的 dNTP 同 δ亞基結(jié)合，然后是第二個(gè) dNTP通過與第一個(gè) dNTP形成 2’→5’ 磷酸二酯鍵而結(jié)合上。當(dāng)生成的 RNA 鏈約有 12 個(gè)核苷酸長度時(shí) β’亞基脫離 DNA 聚合酶， RNA 鏈在全酶的作用下繼續(xù)延伸。當(dāng) DNA 聚合酶在 RNA 鏈上遇到終止密碼時(shí)，轉(zhuǎn)錄作用停止。操縱基因 → 啟動(dòng)子； dNTP→NTP ；