常用培養(yǎng)基制備、滅菌與消毒-微生物分離、純化及培養(yǎng)技術(shù)-資料下載頁
2025-05-22 16:20本頁面
【導(dǎo)讀】生長和繁殖需要的一種生理過程。是生命活動的物質(zhì)基礎(chǔ)，物質(zhì)、能量、代謝調(diào)節(jié)物質(zhì)和良好的生理環(huán)境。要求：應(yīng)具備6大營養(yǎng)要素；物質(zhì)比例合適；必須滅。主要破壞細(xì)菌代謝機能。類藥物及抗生素等。1）培養(yǎng)基、橡膠制品、塑料制品不能用此法；4）溫度降至70°時才開箱門?；?、牛乳培養(yǎng)基，含糖培養(yǎng)基等可采用此法。滅菌則采用間歇滅菌方法。抑菌劑如磺胺類及多數(shù)抗生素。進一步延長保存期。此法關(guān)鍵是要克服細(xì)胞的冷凍損傷。后在低溫狀態(tài)下進行減壓干燥。范圍內(nèi)進行真空干燥。
【正文】 染色法 在油鏡下觀察細(xì)菌個體的形態(tài) 學(xué)習(xí)環(huán)境中微生物的檢查方法，并加深對微生物分布廣泛性的認(rèn)識 二、基本原理 形態(tài)觀察主要包括群體的形態(tài)和個體的形態(tài)觀察。 細(xì)菌的基本形態(tài)主要分為球菌、桿菌、螺旋菌三大類，近年還發(fā)現(xiàn)星狀和四方形細(xì)菌等。細(xì)菌形態(tài)受培養(yǎng)時間、培養(yǎng)基成分、濃度、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間等發(fā)生變化。 細(xì)菌菌落大多表面光滑濕潤，有光澤，一般菌落較小，質(zhì)地顏色均勻，同培養(yǎng)基結(jié)合不緊密。菌落特征與組成菌落的細(xì)胞結(jié)構(gòu)、生長狀況、排列方式、好氣性和運動性直接相關(guān)。 細(xì)菌個體微小，較透明，必須染色方可呈現(xiàn)。根據(jù)細(xì)菌個體形態(tài)觀察的不同要求，可將染色分為 3種類型：簡單染色、鑒別染色、特殊染色。 簡單染色法原理 細(xì)菌在中性的環(huán)境中帶負(fù)電荷，用堿性染料（解離時帶正電荷）如美蘭、結(jié)晶紫等進行染色。 實驗三－ 2：放線菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察 一、目的要求 掌握放線菌形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察的方法 觀察放線菌的菌落特征、個體形態(tài)及其繁殖方式。 二、原理 放線菌菌落在培養(yǎng)基上著生牢固，與基質(zhì)結(jié)合緊密，難以用接種針挑取。 放線菌細(xì)胞一般呈分枝無隔的絲狀，菌絲體分為在培養(yǎng)基內(nèi)部的 基內(nèi)菌絲 和伸出培養(yǎng)基表面的 氣生菌絲 。氣生菌絲上部分化成孢子絲，呈螺旋狀、波浪狀或分枝狀。菌絲呈各種顏色，有的能分泌水溶性色素到培養(yǎng)基內(nèi)。孢子絲長出孢子，孢子形狀各異。由于孢子的存在使菌落表面呈干粉狀。 三、實驗內(nèi)容 （一）菌落形態(tài)觀察及菌苔特征的觀察 觀察放線菌菌落表面形狀、大小、顏色、邊緣以及有無色素分泌；并用接種環(huán)挑取菌落，注意在培養(yǎng)基上的著生的緊密情況。區(qū)別基內(nèi)菌絲、氣生菌絲及孢子絲的著生部位。 （二）個體形態(tài)特征觀察 可直接觀察，也可置于載片上觀察。注意放線菌菌絲直徑的大小，孢子絲的形狀。 （三）孢子形態(tài)觀察 用印片法 （四）用插片法觀察放線菌形態(tài) 實驗三－ 3：霉菌的形態(tài)觀察 一、目的要求 觀察霉菌菌落特征 掌握霉菌的制片方法 觀察霉菌個體形態(tài)及各種無性孢子及有性孢子的形態(tài) 二、基本原理 霉菌是由交織在一起的菌絲體構(gòu)成。菌絲呈管狀，有的有橫隔將菌絲分割為多細(xì)胞（如青霉、曲霉），有的菌絲沒有橫隔（如毛霉、根霉）。菌絲直徑比一般細(xì)菌和放線菌菌絲大幾倍到幾十倍。菌落形態(tài)較大，質(zhì)地疏松，顏色各異，有絲狀、絨毛狀或蜘蛛網(wǎng)狀的菌絲體。 將菌絲體放在水中易變形，將其置于乳酸石炭酸溶液中，保持菌絲體原形。 實驗四、細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察（革蘭氏染色、芽孢染色、 莢膜染色） 革蘭氏染色法原理 由于細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的不同可將其分為革蘭氏陰性和陽性 芽孢染色原理 芽孢壁比營養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)復(fù)雜而且致密，透性低，著色和脫色較營養(yǎng)細(xì)胞難。采用堿性染料并在微火上加熱，或延長染色時間，使菌體和芽孢同時染色后，用蒸餾水沖洗，脫去菌體顏色，保留芽孢的顏色。并用另一種對比鮮明的染料 使菌體著色。 莢膜染色原理 負(fù)染法，使背景與菌體之間形成一透明區(qū)。因莢膜薄，且易變形，所以不能用加熱法固定。
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