臨床elisa檢驗(yàn)影響因素-資料下載頁(yè)
2024-10-17 04:04本頁(yè)面
【正文】 常感波長(zhǎng)下的吸光度值的差。因此，雙波長(zhǎng)比色測(cè)定具有能排除由微滴板本身、板孔內(nèi)標(biāo)本的非特異吸收、指紋、刮痕、灰塵等對(duì)特異顯色測(cè)定吸光度的影響的優(yōu)點(diǎn)，一般不必設(shè)空白孔。如在使用雙波長(zhǎng)比色時(shí)，仍設(shè)空白孔，就可能會(huì)造成前面提到的測(cè)定孔吸光度為負(fù)數(shù)的現(xiàn)象。由于 ELISA測(cè)定中單個(gè)空白孔的非特異吸收上有一定程度的不確定性，也就是說(shuō)每次測(cè)定或同次測(cè)定空白孔位置的不同均有可能得到不同吸光度測(cè)定值，故而在 ELISA測(cè)定比色時(shí)，最好是使用雙波長(zhǎng)比色。 八、結(jié)果判定 ? 臨床 ELISA測(cè)定按其表示測(cè)定結(jié)果的方式分為定性和定量測(cè)定兩大類。定性測(cè)定只是對(duì)標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出 “ 有 ” 或 “ 無(wú) ” 的結(jié)論，分別用 “ 陽(yáng)性 ” 和 “ 陰性 ” 來(lái)表示?？梢?jiàn)定性測(cè)定通常是用于傳染性病原體的抗原或抗體的測(cè)定，以判斷特定病原體感染的存在與否。而定量測(cè)定則是對(duì)標(biāo)本中待測(cè)抗原的多少進(jìn)行量值測(cè)定，以具體數(shù)值表示。定量測(cè)定基本上是用于非病原體抗原物質(zhì)的測(cè)定，如激素、細(xì)胞因子、腫瘤標(biāo)志物、小分子藥物等。 ELISA定性測(cè)定的“ 陽(yáng)性 ” 和 “ 陽(yáng)性 ” 的判定依據(jù)是試劑盒所確定的陽(yáng)性判定值（ Cutoff）。定量測(cè)定的 “ 量值 ”依據(jù)是試劑盒中所帶標(biāo)準(zhǔn)品同時(shí)測(cè)定得出的劑量反應(yīng)曲線（又稱標(biāo)準(zhǔn)曲線）。 下面再解釋一下在 ELISA定性測(cè)定結(jié)果判定中常用的一些縮寫。 （ 1） S/CO：其中 S為 Sample(樣本 )或 Specimen(標(biāo)本 )的簡(jiǎn)寫，表示的是標(biāo)本測(cè)定的吸光度值， CO為 Cutoff值的簡(jiǎn)寫。除競(jìng)爭(zhēng)抑制法外，其它 ELISA定性測(cè)定模式中，當(dāng) S/CO值大于或等于 1時(shí)，標(biāo)本的測(cè)定為陽(yáng)性，小于 1時(shí)為陰性。 （ 2） S/N或 P/N：其中 S同（ 1）， N為 Negative(陰性對(duì)照 )的簡(jiǎn)寫， P為 Patient（患者）的簡(jiǎn)寫。較早的試劑盒很多都使用 S/N或 P/N≥，現(xiàn)仍有一些試劑盒使用這種方式。這種方式與 S/CO方式無(wú)根本性區(qū)別，只不過(guò)是前者將陰性對(duì)照（ N）的 倍視為 Cutoff值而已。 九、結(jié)果報(bào)告及解釋 ? 臨床 ELISA測(cè)定結(jié)果的報(bào)告較為簡(jiǎn)單。定性測(cè)定報(bào)陰性或陽(yáng)性即可；定量測(cè)定則報(bào)出具體的數(shù)值。結(jié)果解釋比較起來(lái)要復(fù)雜的多，它要求實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員對(duì)所測(cè)定的項(xiàng)目有較為全面的知識(shí)基礎(chǔ)。現(xiàn)在，檢驗(yàn)不再是單純的實(shí)驗(yàn)室測(cè)定，而已成為一門臨床醫(yī)學(xué)學(xué)科，即檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，這就要求從事醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作的檢驗(yàn)醫(yī)師，對(duì)所做的測(cè)定項(xiàng)目除了知其然，還要知其所以然，否則就難免為時(shí)代所淘汰。 綜上所述，盡管 ELISA測(cè)定的操作步驟非常簡(jiǎn)單，但有可能會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的因素卻較多，分布在測(cè)定操作的各步之中，尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測(cè)定中出現(xiàn)問(wèn)題的可能原因，特對(duì)常見(jiàn)問(wèn)題及原因歸納總結(jié)于下表。 臨床 ELISA測(cè)定中可能會(huì)出現(xiàn)的問(wèn)題及可能的原因
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