生化實驗緒論及蛋白質(zhì)沉淀、變性反應(yīng)-資料下載頁
2025-05-14 03:29本頁面
【正文】 中加入 硫酸銨粉末，邊加邊用玻璃棒攪拌 ，直至粉末不再溶解，直至飽和 觀察有無沉淀（清蛋白）析出 靜置，棄去上清液，取出部分清蛋白，加少量蒸餾水 觀察沉淀的再溶解 操作 現(xiàn)象 操作 現(xiàn)象 Tube 1 ① 1mL蛋白質(zhì)溶液 ② 34滴 3%硝酸銀 溶液 ③ 過量 的硝酸銀 Tube 2 ① 1mL蛋白質(zhì)溶液 ② 13滴 %乙酸鉛 ③ 過量 的乙酸鉛 Tube 3 ① 1mL蛋白質(zhì)溶液 ② 34滴 %硫酸銅 ③ 過量 的硫酸銅 2. 蛋白質(zhì)的不可逆反應(yīng) . 重金屬離子沉淀蛋白質(zhì)（ 3支試管 ） 操作 現(xiàn)象 Tube 1 ① ② 數(shù)滴 10%三氯乙酸溶液 Tube 2 ① ② 數(shù)滴 5%磺基水楊酸 2. 蛋白質(zhì)的不可逆反應(yīng) 有機酸沉淀蛋白質(zhì)（ 2支試管） 操作 現(xiàn)象 操作 現(xiàn)象 Tube 1 ① 15滴 濃鹽酸 ② 沿 管壁加入 6滴蛋白質(zhì)溶液 ， 勿 搖 ③ 振蕩 Tube 2 ① 15滴 濃硫酸 ① 沿管壁加入 6滴蛋白質(zhì)溶液 ，勿搖 ③ 振蕩 Tube 3 ① 15滴 濃硝酸 ② 沿 管壁加入 6滴蛋白質(zhì)溶液 ， 勿 搖 ③ 振蕩 2. 蛋白質(zhì)的不可逆反應(yīng) 無機酸沉淀蛋白質(zhì) （ 3支試管） 2. 蛋白質(zhì)的不可逆反應(yīng) 加熱沉淀蛋白質(zhì) 試劑 管號 蛋白質(zhì)溶液 %乙酸 10%乙酸 飽和 NaCl 10%NaOH 純凈水 1 2 3 4 5 10 10 10 10 10 5 5 5 2 2 7 2 2 5 取試管 5支按下表添加試劑和操作（ 單位：滴 ） 操 作步驟 編號 混勻 沸水浴中加熱 10分鐘 中和 過量的 酸 或 堿 1 Pro.+ 2 Pro.+ %乙 酸 + 3 Pro.+ 10%乙 酸 + 4 Pro.+10%乙 酸 +飽 和 NaCl 5 Pro.+10% NaOH+ 加熱沉淀蛋白質(zhì)的總結(jié) 卵清蛋白的 PI(等電點 ) = ；“ +”表示沉淀；“ ”表示沉淀未生成，或沉淀溶解；沉淀的多少，以“ +”的多少表示 五、注意事項 ? 實驗操作強酸強堿時，一定注意自身和同學(xué)的安全，防止接觸衣服、鞋和皮膚。 ? 為觀察到正?，F(xiàn)象，需將試管洗刷潔凈。 ? 濃度較高的蛋白質(zhì)溶液，實驗現(xiàn)象更明顯。 ? 變性蛋白質(zhì)一般易于沉淀，但也可不變性而使蛋白質(zhì)沉淀，在一定條件下，變性的蛋白質(zhì)也可不發(fā)生沉淀。 蛋白質(zhì)分子中哪些基團分別可以與重金屬離子和有機酸作用而使蛋白質(zhì)沉淀？ 舉例說明蛋白質(zhì)變性和沉淀之間的關(guān)系。從原理上說明一個蛋白質(zhì)沉淀的實用例子。 思考題
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