【正文】 型 （茅型酒）茅臺(tái)酒；原料為高粱，曲為純小麥制高溫曲，八次蒸料，八次下曲，八次發(fā)酵，八次蒸餾（但僅取酒 7 次，因?yàn)榈谝淮握麴s出的不作正品，潑回酒窖重新發(fā)酵）。 濃香型 （廬型酒）：廬州老窖 —— 產(chǎn)于四川瀘州市。千年窖，萬(wàn)年糟，傳統(tǒng)的老五甑生產(chǎn)工藝，混蒸，主體香為己酸乙酯。純小麥制大曲，以糯玉米為原料。根據(jù)酒的質(zhì)量可分特曲、頭曲、二曲和三曲。五糧液采用五種糧食（高梁、大 米、糯米、小麥、玉米）為原料。 清香型 （汾型酒）：汾酒 —— 產(chǎn)于山西汾陽(yáng)縣杏花村，二次發(fā)酵二次勾兌。前次發(fā)酵 21 天，蒸餾，加酒糟，再發(fā)酵 21 天，再蒸餾。清蒸二次清工藝，乙酸乙酯和乳酸乙酯兩者的結(jié)合為主體香。 青霉素生產(chǎn)工藝 青霉素簇和頭孢菌素簇是臨床上最為重要的抗生素，屬于β 內(nèi)酰胺類抗生素。 青霉素 (Benzylpenicillin / Penicillin)是指分子中含有青霉烷酸，能破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁并在細(xì)菌細(xì)胞的繁殖期起殺菌作用的一類抗生素。 青霉素的生物合成過(guò)程： 在青霉素發(fā)酵中，已知產(chǎn)黃青霉利用葡萄糖和氨，經(jīng)由 a— 氨基己二酸、半胱氨酸和纈氨酸在三肽合成酶的催化下合成三肽，異青霉素 N 合成酶催化發(fā)生環(huán)化生成異青霉素 N，再與苯乙酸、苯乙胺、苯乙酰胺、苯乙酰甘氨酸等在異青霉素 N?；D(zhuǎn)移酶催化進(jìn)行轉(zhuǎn)酰基反應(yīng)，產(chǎn)生青霉素 G。 （ 1）常用菌種為產(chǎn)黃青霉。 （ 2）青霉素 G的合成途徑 （ 2） 發(fā)酵工藝 （ 3）發(fā)酵控制 ①加糖控制一般在殘?zhí)菍⒅?％左右， pH上升時(shí)開(kāi)始加糖。 ②補(bǔ)氮及加前體加硫酸銨、氨水或尿素，使發(fā)酵液氮源控制在～ ％。補(bǔ)前體以使發(fā)酵液中殘余苯乙酰胺濃度為 ～％。 ③ pH 控制加酸或堿自動(dòng)控制 pH，一般為 ～ 。 ④溫度控制一般前期 25～ 26℃，后期 23℃，以減少后期發(fā)酵液中青霉素的降解破壞。 ⑤通氣和攪拌抗生素深層培養(yǎng)需要通氣與攪拌。 ⑥泡沫和消泡可用天然油脂如豆油、玉米油或用化學(xué)合成消泡劑“泡敵”（環(huán)氧丙稀環(huán)氧乙烯聚醚類）來(lái)消泡。應(yīng)當(dāng)控制其用量并少量多次加入。 ⑦過(guò)濾宜采用鼓式 真空過(guò)濾器。過(guò)濾前加去乳化劑降溫。 ⑧提煉采用溶媒萃取法，醋酸丁酯（ BA）作溶媒。 ⑨脫色采用活性炭進(jìn)行脫色。過(guò)濾。 ⑩共沸蒸餾或直接結(jié)晶 7. 酶制劑的生產(chǎn)方法：固態(tài)發(fā)酵法和深層液體培養(yǎng)法 利用微生物產(chǎn)酶的優(yōu)點(diǎn) （ 1）微生物種類多、酶種豐富，且菌株易誘變，菌種多樣。 （ 2）微生物生長(zhǎng)繁殖快，易提取酶，特別是胞外酶。 （ 3）微生物培養(yǎng)基來(lái)源廣泛、價(jià)格便宜。 （ 4）可控制酶發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程，生產(chǎn)可連續(xù)化、自動(dòng)化。 （ 5） 可以利用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)，選育菌種、增加酶產(chǎn)率和開(kāi)發(fā)新酶種 枯草桿菌 BF7658液體深層發(fā)酵生產(chǎn)α 淀粉酶的發(fā)酵控制： 工藝流程： A 種子制備： 孢子培養(yǎng)一般采用馬鈴薯培養(yǎng)基，于 37℃下培養(yǎng) 72 h，使菌體全部形成孢子即為成熟。 種子培養(yǎng)維持罐溫 37℃，罐壓 ～ atm， 10h 后加大通風(fēng)，當(dāng)菌體處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后期，立刻接種至大罐，種子培養(yǎng)一般 14h 左右。 發(fā)酵控制： 通常采用低濃度發(fā)酵和高濃度補(bǔ)料的方法， 優(yōu)點(diǎn)：低濃度可以避免原料中淀粉降解生成的糖過(guò)量堆積而引起分解代謝阻遏，有利于 pH值控制，延長(zhǎng)產(chǎn)酶期。 溫度 37℃，罐壓 atm，通氣量 0～ 12 h 控制 ～ VVM， 12 h 后控制在 ～ VVM，發(fā)酵后期控制在 VVM。 補(bǔ)料體積和基礎(chǔ)培養(yǎng)基體積一般為 1:3 左右。從 10 h 左右開(kāi)始補(bǔ)加，一般前期、后期少，中期大，根據(jù)菌體的生長(zhǎng)情況來(lái)調(diào)整。當(dāng) pH 低于 ，細(xì)胞生長(zhǎng)粗壯時(shí)可酌減；當(dāng) pH 高于 ，細(xì)胞 出現(xiàn)衰老并有空胞時(shí)可酌增。 停止補(bǔ)料后 68h，溫度不再上升，菌體衰老（ 80%菌體形成空胞），酶活不再提高，發(fā)酵即可結(jié)束。發(fā)酵周期一般為 40 h。 提取：工業(yè)上回收α 淀粉酶一般采用硫酸銨鹽析法。 8. 二步發(fā)酵法生產(chǎn)維生素 C工藝有酸轉(zhuǎn)化工藝和堿轉(zhuǎn)化工藝兩種。 維生素 C（ 2,3,4,5,6五羥基 2己烯酸 4內(nèi)酯 ）的合成方法主要有萊氏化學(xué)合成法和微生物發(fā)酵合成法兩種。 酸轉(zhuǎn)化設(shè)備簡(jiǎn)單、流程短，但制得的維生素 C 破壞嚴(yán)重、質(zhì)量差，設(shè)備腐蝕嚴(yán) 重，三廢多，因此逐漸淘汰。 堿轉(zhuǎn)化雖然流程較長(zhǎng)、投資大，但產(chǎn)品質(zhì)量好，故目前絕大部分工廠均采用堿轉(zhuǎn)化工藝。 1985年轉(zhuǎn)讓二步發(fā)酵法生產(chǎn)維生素 C工藝給世界上生產(chǎn)維生素最大企業(yè)－瑞士霍夫曼?羅氏制藥公司。 —— 我國(guó)醫(yī)藥工業(yè)史上首次出口技術(shù)。 二步發(fā)酵法反應(yīng)步驟： D山梨醇 L山梨糖 2酮基 L古龍酸 2酮基 L古 龍酸甲酯 維生素 C 鈉 維生素 C 生物氧化 黑醋菌 混合菌 生物氧化 甲酯化 H2SO4, CH3OH 內(nèi)酯化 NaHCO3, CH3OH 酸化 H2SO4, CH3OH 二步發(fā)酵法的整個(gè)生產(chǎn)工藝流程可分為發(fā)酵、提取、轉(zhuǎn)化和精制四部分 二步發(fā)酵： 第一步發(fā)酵中所用菌種為生黑葡萄糖酸桿菌（ Gluconobacter melagenus），簡(jiǎn)稱黑醋菌。最常用的生產(chǎn)菌株為 R30； 第二步發(fā)酵采用的菌種為由大、小兩株細(xì)菌組成的混合菌種。小菌為氧化葡萄糖酸桿菌（ Gluconobacter oxydans），工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中使用最多的大菌為 2980及 152混合菌。 菌種主要是棒狀桿菌屬、短桿菌屬、小桿菌屬及節(jié)桿菌屬的細(xì)菌。這些菌都是需氧微生物，都需要以生物素為生長(zhǎng)因子。 谷氨酸發(fā)酵過(guò)程 1 發(fā)酵初期，即菌體生長(zhǎng)的遲滯期 糖基本沒(méi)有利用，尿素分解放出氨使 pH 值略有上升，一般為 2～4h。 2 對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期 代謝旺盛，糖耗快，尿素大量分解， pH 值很快上升，但隨著氨被利用 pH 值又下降；溶氧濃度急劇下降，然后又維持在一定水平上；菌體濃度（ OD 值）迅速增大，菌體形態(tài)為排列整齊的八字形。及時(shí)供給菌體生長(zhǎng)必需的氮源及調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的 pH值至 ～ ，必須流加尿素；又由于代謝旺盛，泡沫增加并放出大量發(fā)酵熱，故必須進(jìn)行冷卻，使溫度維持 30～ 32℃。菌體繁殖的結(jié)果，菌體內(nèi)的生物素含量由豐富轉(zhuǎn)為貧乏。這個(gè)階段主要是菌體生長(zhǎng)，幾乎不產(chǎn)酸，一般為 12h左右。 3 谷氨酸合成階段 當(dāng)菌體生長(zhǎng)基本停滯就轉(zhuǎn)入谷氨酸合成階段，此時(shí)菌體濃度基本不變，糖與尿素分解后產(chǎn)生的α－酮戊二酸和氨主要用來(lái)合成谷氨酸。這一階段，為了提供谷氨酸合成所必需的氨及維持谷氨酸合成最適的～ ，必須及時(shí)流加尿素，又為了促進(jìn)谷氨酸的合成需加大通氣量，并將發(fā)酵溫度提高到谷氨酸合成最適的溫度 34～ 37℃。 4 發(fā)酵后期， 菌體衰老、糖耗緩慢、殘?zhí)堑?，此時(shí)流加尿素必須相應(yīng)減少。當(dāng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)耗盡酸濃度不再增加時(shí)，需及時(shí)放罐。 發(fā)酵周期一般為 30 多小時(shí)。 谷氨酸提取的新工藝 10 檸檬酸的發(fā)酵生產(chǎn)工藝 以糖質(zhì)原料發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸的常用菌種是黑曲霉 黑曲霉檸檬酸的積累機(jī)制總結(jié) 1) Mn2＋缺乏抑制了蛋白質(zhì)合成，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi) NH4＋濃度升高，解除了對(duì)磷酸果糖激酶（ PFK）的抑制，促進(jìn)了 EMP 途徑的暢通； 2) 丙酮酸羧化酶是組成型酶，不被調(diào)節(jié)控制，可以不斷地提供草酰乙酸。同時(shí)組成型檸檬酸合成酶不被調(diào)節(jié)，增強(qiáng)了合成檸檬酸能力。 3) 控制 Fe2+含量，順烏頭酸酶活力低，檸檬酸進(jìn)一步代謝減少，使檸檬酸積累； 4) 檸檬酸積累使 pH 值降低，在低 pH 值下，順烏頭酸酶和異檸檬酸脫氫酶失活，就更有利于檸檬酸的積累并排出體外。 發(fā)酵操作方法分為不置換法和置換法兩種。 檸檬酸提取方法 考試題型： 填空題 10 題共 10 分；選擇題 10 題共 10 分；判斷題 10 題共 10分，英漢詞語(yǔ)對(duì)照 10 分；簡(jiǎn)答 4題 20 分；分析討論題 2題 10 分；應(yīng)用題（計(jì)算題和工藝流程及發(fā)酵控制） 2題或 3題共 30 分；