ny╱t672-20xx轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品檢測(cè)通用要求-資料下載頁(yè)
2025-08-12 13:16本頁(yè)面
【導(dǎo)讀】本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部科技教育司提出。發(fā)展中心、中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品檢測(cè)的通用要求及轉(zhuǎn)基因植物PCR檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的操作規(guī)范。下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。包括轉(zhuǎn)基因植物、動(dòng)物和微生物。核糖核酸的極限。將DNA從一個(gè)樣品的多種組分中分離出來(lái)。獲得不含PCR反應(yīng)抑制因子的DNA。由PCR等DNA擴(kuò)增方法產(chǎn)生的DNA片段。DNA反復(fù)循環(huán)，使位于兩段已知序列之間的DNA片段呈幾何倍數(shù)擴(kuò)增。PCR反應(yīng)中檢測(cè)特異性擴(kuò)增的DNA序列。用含有目的序列的樣品DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增。以水作為材料提取DNA，以證明DNA的抽提和制備過(guò)程中是否發(fā)生污染。具有植物物種專(zhuān)一性且拷貝數(shù)恒定、不顯示等位基因變化的保守DNA序列。某一目的基因進(jìn)行定量分析和驗(yàn)證PCR反應(yīng)體系中是否存在抑制物質(zhì)。在一批物品中抽取具有代表性的材料，用于檢測(cè)分析。
【正文】 應(yīng)在保持組分不發(fā)生變化的條件下 儲(chǔ)存。 易腐爛的樣品在分析前應(yīng)根據(jù)需要在 4℃、 20℃或 80℃儲(chǔ)存，如有特殊需要應(yīng)在無(wú)氧條件下儲(chǔ)存。 應(yīng)記載儲(chǔ)藏條件和時(shí)間。 存查樣品應(yīng)妥善保存 3個(gè)月。檢測(cè)為 GMO的樣品應(yīng)妥善保存 6個(gè)月，以備復(fù)驗(yàn)。保存期滿后，需經(jīng)無(wú)害化處理。 DNA提取和純化 DNA提取和純化按照 NY/T674的方法。 定性 PCR檢測(cè) 定性 PCR檢測(cè)按照 我國(guó)或國(guó)際認(rèn)可的 方法。 定性 PCR檢測(cè)對(duì)象包括轉(zhuǎn)基因的目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等外源基因和元件。檢測(cè)時(shí)應(yīng)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、試劑空白對(duì)照和提取空白 對(duì)照，同時(shí)應(yīng)檢測(cè)內(nèi)源基因。 以蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)的檢測(cè) 以蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)的 檢測(cè)按照 我國(guó)或國(guó)際認(rèn)可的 方法。 9 9 通用質(zhì)量保證措施 檢測(cè)物品的處置按 GB/T15481 執(zhí)行。 檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量的保證按 GB/T154812020中的 。 10 結(jié)果分析與表述 通用要求 檢測(cè)結(jié)果不宜表述為分析樣品不含轉(zhuǎn)基因生物。 結(jié)果分析 通用要求 以下情況認(rèn)為樣品含有轉(zhuǎn)基因植物 DNA： ――擴(kuò)增片段的特異性通過(guò)酶切圖譜、測(cè)序、 Southern雜交、 PCRELISA、點(diǎn)雜交或?qū)崟r(shí) PCR反應(yīng)進(jìn)行了驗(yàn)證。用上述方法該特異性未發(fā)生改變，片段大小也一致，而且與陽(yáng)性對(duì)照相同，不含 GMO的非 GMO對(duì)照不存在任何相似大小的擴(kuò)增片段。 ――所有對(duì)照和標(biāo)準(zhǔn)品都顯示正常結(jié)果。 2個(gè)平行樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)一致。出現(xiàn)不一致的，應(yīng)重做 2個(gè)平行樣品，最終結(jié)果以多數(shù)結(jié)果為準(zhǔn)。 定性 PCR檢測(cè)結(jié)果的表述 在模板 DNA的量超過(guò)被測(cè)物種基因組（內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因） DNA量 20200倍的情況下，按下列方式表述結(jié)果： ――對(duì)于陰性結(jié)果：“該樣品未檢出 基因 ”； ――對(duì)于陽(yáng)性結(jié)果： “該樣品 檢出 基因 ”。 在模板 DNA的量低于被測(cè)物種基因組（內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因） DNA量 20200倍的情況下，按下列方式表述結(jié)果： ――對(duì)于陰性結(jié)果：“該樣品中 DNA含量不足，建議對(duì)樣品做定量分析以確定所用檢測(cè)方法的靈敏度”； ――對(duì)于陽(yáng)性結(jié)果：“該樣品 檢出 基因 ”。 11 檢驗(yàn)報(bào)告 10 檢驗(yàn)報(bào)告應(yīng)包括下列內(nèi)容： ――鑒定樣品所需的所有信息； ――引用的標(biāo)準(zhǔn)和方法，并說(shuō)明是定性還是定量方法及靈敏度； ――應(yīng)用哪種定量方法（終點(diǎn)法或?qū)崟r(shí) PCR） ； ――接收樣品和分析樣品的大小； ――樣品 的接收日期； ――樣品的分析日期； ――測(cè)試樣品的大小； ――檢測(cè)結(jié)果； ――測(cè)試中觀察到的任何特殊情況； ――對(duì)結(jié)果可能產(chǎn)生影響的任何其他異常情況。
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