20xx年醫(yī)學(xué)專題—實習(xí)二紅細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(編輯修改稿)
2024-11-19 05:30 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 l 在試管中 準(zhǔn)確 加入 HiCN稀釋試劑 ，作為測定管 l 用血紅蛋白吸管 準(zhǔn)確 吸取全血 20u1，擦去管端血跡，置于試劑中，沖洗 3次，混勻 l 將混合液放置 (f224。ngzh236。)3分鐘 以后，倒入光徑 1cm比色皿，用分光光度計在 540nm進(jìn)行比色l 以蒸餾水或 HiCN稀釋試劑作空白管，校正光密度到 0點，讀取測定管光密度讀數(shù) 第十四 頁 ，共三十三 頁 。l 計算： 血紅蛋白（ g/L） = 測定管光密度 （ 64458/44000） 251 = 測定管光密度 A l 式中： （ 1） 64458 是目前國際 (gu243。j236。)公認(rèn)的血紅蛋白分子量 （ 2） 44000 是國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會公布的血紅蛋白摩爾吸光度 （ 3） 251是稀釋倍數(shù) 第十五 頁 ，共三十三 頁 。[方法 (fāngfǎ)評估 ] l HiCN法操作簡便，試劑單一，顯色快且穩(wěn)定，可以根據(jù)吸光度直接 (zh237。jiē)計算結(jié)果－－被列為國際血紅蛋白測定的參考方法，也是我國推薦的首選方法l 高球蛋白血癥和白細(xì)胞明顯增高－－可導(dǎo)致反應(yīng)液渾濁而影響結(jié)果 第十六 頁 ，共三十三 頁 。[注意事項 ] l 用吸血管吸血過程應(yīng)仔細(xì)、認(rèn)真，準(zhǔn)確把握住吸入的 血液量 是初學(xué)者的一個難點，也是實驗結(jié)果準(zhǔn)確與否的一個關(guān)鍵l HiCN稀釋液不能貯存在塑料瓶中，否則會使 CNˉ 含量下降 (xi224。ji224。ng)，測定結(jié)果偏低－－應(yīng)貯存在 棕色有塞玻璃瓶中l(wèi) 4℃ 冰箱保存 一般可用數(shù)月，但不能在 0℃ 以下保存，因為結(jié)冰可引起高鐵氰化鉀還原，使溶液褪色失效第十七 頁 ，共三十三 頁 。[注意事項 ] 分光 (fēnɡuānɡ)光度計使用要點開啟電源，指示燈亮，選擇開關(guān)置于 “T”，波長調(diào)置使用波長。儀器 預(yù)熱 20分鐘。 打開試樣室蓋（光門自動關(guān)閉）， 調(diào)節(jié) “0”旋鈕 ，使數(shù)字顯示為“”。蓋上試樣室蓋，將比色皿架處于蒸餾水校正位置，使光電管受光， 調(diào)節(jié)透過率 “100%”旋鈕 ，使數(shù)字顯示為 “”。 3調(diào)整儀器的 “”和 “100%”，將選擇開置于 “A”， 調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕 ，使得數(shù)字顯示為 “.000”，然后將被測樣品移入光路，顯示值即為被測樣品的吸光度的值。第十八 頁 ，共三十三 頁 。[注意事項 ]l 氰化鉀是劇毒品 ，配制稀釋液時要按劇毒品管理程序保管、操作l 配制好的 HiCN稀釋液 中因氰化鉀含量低，又有高鐵氰化鉀存在， 毒性不是很 大。若進(jìn)入體內(nèi)，高鐵氰化鉀氧化血紅蛋白，生成高鐵血紅蛋白。后者結(jié)合 CNˉ ，起到一定的解毒 (jiě d)作用，但仍應(yīng)妥善保管l 測定后的 廢液不能與酸性溶液混合 －－氰化鉀遇酸可產(chǎn)生劇毒的氰氫酸氣體l 為防止氰化鉀污染環(huán)境，比色測定后的 廢液集中于廣口瓶中 －－應(yīng)注意廢液處理，可用除毒
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