20xx年醫(yī)學(xué)專題—促紅細(xì)胞生成素(編輯修改稿)
2024-11-04 18:35 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 線性梯度洗脫 檢測(cè)并收集含EPO主峰 ELISA測(cè)定 結(jié)果：60%乙醇1mol/L鹽酸胍洗出EPO,第九頁(yè)，共十八頁(yè)。,透析,透析液：10倍體積的10mmol/L Tris.HCl (pH 7.5)2%蔗糖緩沖液 透析次數(shù)(c236。sh249。)：2 時(shí)間：5~6h,第十頁(yè)，共十八頁(yè)。,第二步：離子交換(l237。 zǐ jiāo hu224。n)柱,DEAE型離子交換柱 流程： 10mmol/L Tris.HCl(pH7.5)緩沖液平 上樣 20ml/min（柱結(jié)合量20mg/ml） 10mmol/L Tris.HCl(pH7.5)緩沖液平衡至基線 添加NaCl入緩沖液，進(jìn)行截狀梯度洗脫（NaCl濃度(n243。ngd249。)分別為：50，70，125mmol/L） 結(jié)果： ELISA檢測(cè)盒表明75mmol/L洗脫峰中含EPO,第十一頁(yè)，共十八頁(yè)。,第三步：分子篩色譜(s232。 pǔ),Sephacryl S200 色譜分析 流程： 上樣體積(tǐjī) 80ml 流速 2ml/min 流動(dòng)相 20mmol/L 檸檬酸鈉 100mmol/L NaCl 緩沖液 結(jié)果：收集的rHuEPO保留時(shí)間約為45min 比活性約為1.5*108U/g蛋白；純度 〉98%（SDSPAGE檢測(cè)） 免疫原性檢測(cè)：Western blot,第十二頁(yè)，共十八頁(yè)。,EPO的銷
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