20xx年醫(yī)學(xué)專題—病原真菌的分離與培養(yǎng)-(2)(編輯修改稿)
2024-11-19 04:52 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 32。dǐ)滅菌，以備純培養(yǎng)用。一般培養(yǎng)基的滅菌采用 高壓蒸汽滅菌。 常用的滅菌的方法有：干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌、常壓蒸汽滅菌、常壓間歇式滅菌 、 超高溫滅菌、過濾除菌、輻射滅菌、化學(xué)藥品滅菌等方法。 本實驗培養(yǎng)基的滅菌常使用的是 高壓蒸汽滅菌 ，它是利用高溫濕熱空氣使菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的。第九 頁 ，共二十三 頁 。高壓滅菌鍋操作過程 加水 ? 裝鍋 ? 蓋蓋 ? 加熱 ? 當(dāng)壓力升為 氣 ? 正式升壓 ? 保壓（ ， 121℃ ，保持 2030min） ? 停止加熱 ? 自然降壓 (ji224。nɡ yā)至零 ? 排放余汽 ? 開蓋 ? 取出滅菌物品 ?趁熱擺斜面 ? 檢驗滅菌效果。 第十 頁 ，共二十三 頁 。第十一 頁 ，共二十三 頁 。約 50℃倒平板 (p237。ngbǎn)灼燒滅菌，防止 (f225。ngzhǐ)瓶口的微生物污染培養(yǎng)基防止皿蓋上的水珠 (shuǐ zhū)落入培養(yǎng)基，造成污染第十二 頁 ，共二十三 頁 。（葉斑病類） ： 取真菌葉斑病的新鮮病葉 (或其他分離材料 )，選擇典型的單個病斑，用解剖刀從病斑邊緣 (病健交界處 )切取小塊 (邊長 34mm)病組織數(shù)塊。 提示：選擇新患病的組織作為分離的材料，可以 (kěyǐ)減少腐生菌混入的機(jī)會。腐生菌一般在發(fā)病很久而已經(jīng)枯死或腐敗的部分滋生，因此，一般斑點(diǎn)病害應(yīng)在臨近健全組織的部分分離。： 將病組織放人 70％酒精中浸 3—5s 后，按無菌操作法將病組織移人 0． 1％升汞液中分別表面消毒 0． 5min(也可使用其他表面消毒劑 ,如漂白粉精片 12片，研磨后加滅菌水 20mL，消毒 510min。 )，如植物組織柔嫩，則表面消毒時間宜短；反之則可長些。然后放入滅菌水中連續(xù)漂洗三次，除去殘留的消毒劑。第十三 頁 ，共二十三 頁 。 果實、塊莖和枝桿等組織內(nèi)部的病原菌可用脫脂棉蘸 70%酒精涂拭病部表面，通過火焰燒去表面酒精，重復(fù)進(jìn)行 23次，達(dá)到表面消毒。 提示：先用 70％的酒精浸 3s是為了消除 (xiāoch)寄主表面的氣泡，減少表面張 力， 70％的酒精亦用于表面消毒，處理的時間較短 (一般數(shù)秒
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