20xx年醫(yī)學(xué)專題—calcein-am和pi鑒別死活細(xì)胞(編輯修改稿)
2024-11-17 22:17 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 AM儲(chǔ)藏液和PI儲(chǔ)藏液放置于室溫。4〕加10μlCalceinAM儲(chǔ)藏液和15μlPI儲(chǔ)藏液至5mlPBS中配制成染色溶液。CalceinAM的終濃度為2μmol／l，PI的終濃度為4μmol／l。2．細(xì)胞染色1〕染色HeLa細(xì)胞等貼壁細(xì)胞時(shí),先用TrypsinEDTA等消化細(xì)胞，制備成細(xì)胞懸液。2〕將細(xì)胞懸液離心3分鐘(1,000rpm)。3〕去除上清液，參加PBS緩沖液，細(xì)胞數(shù)量調(diào)整至105–106個(gè)／ml。再用移液器充分混勻。4〕由于培養(yǎng)基中的血清等含有酯酶，CalceinAM遇水會(huì)分解，會(huì)導(dǎo)致空白上升，所以需要離心數(shù)次，用PBS洗滌數(shù)次直到完全洗凈。16
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