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正文內(nèi)容

20xx年醫(yī)學(xué)專題—干細(xì)胞-成體干細(xì)胞(編輯修改稿)

2024-11-14 19:22 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 外能大量增殖(zēngzh237。),細(xì)胞移植后可分化,表明肝卵圓形細(xì)胞是肝干細(xì)胞,具有分化為肝細(xì)胞和膽管上皮細(xì)胞的雙潛能性。,第二十一頁(yè),共五十一頁(yè)。,肝干細(xì)胞的鑒定(ji224。nd236。ng),肝干細(xì)胞本身缺乏特異性標(biāo)志,分離(fēnl237。)和鑒定帶來(lái)了困難。,雙潛能的肝干細(xì)胞同時(shí)表達(dá)(biǎod225。)肝細(xì)胞和膽上皮細(xì)胞的標(biāo)志物,細(xì)胞角蛋白CK7和CK19為膽上皮細(xì)胞的特異性標(biāo)志;,白蛋白(ALB)、甲胎蛋白(AFP)和肝代謝酶細(xì)胞色素P450可 作特異性標(biāo)志物;,細(xì)胞角蛋白CK8和CK18在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和膽上皮細(xì)胞都有表達(dá)。,肝干細(xì)胞一般除了其特有的形態(tài)學(xué)外,常結(jié)合上述特有標(biāo)志,通過(guò)免疫組織化學(xué)、流式細(xì)胞檢測(cè)和原位雜交等方法予以鑒定。,第二十二頁(yè),共五十一頁(yè)。,肝干細(xì)胞的可塑性,雙潛能(qi225。n n233。nɡ)卵圓形細(xì)胞不僅能分化為肝細(xì)胞和膽上皮細(xì)胞,當(dāng)分別移植到胰腺和十二指腸時(shí),還能跨組織分化為胰腺細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞,表明肝干細(xì)胞在適當(dāng)?shù)奈h(huán)境中能被誘導(dǎo)分化為內(nèi)胚層的其他組織細(xì)胞,目前,還未見(jiàn)有跨胚層分化的直接例證。,卵圓形細(xì)胞異常分化或分化突然停止有可能(kěn233。ng)發(fā)生肝細(xì)胞癌。,第二十三頁(yè),共五十一頁(yè)。,骨骼肌干細(xì)胞,肌肉的生長(zhǎng)、更新和修復(fù)是由衛(wèi)星細(xì)胞(x236。bāo)(satellite cells)介導(dǎo)的,一般認(rèn)為這就是骨骼肌干細(xì)胞。,近年的研究表明,從肌肉分離的干細(xì)胞不僅(b249。jǐn)能分化出肌肉,還能產(chǎn)生血液細(xì)胞成分。,骨骼肌干細(xì)胞不僅(b249。jǐn)存在于骨骼肌組織,而且具有分化的可塑性,甚至跨越胚層分化為肝細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞。,第二十四頁(yè),共五十一頁(yè)。,成體干細(xì)胞的體外培養(yǎng)(p233。iyǎng)和特性,骨髓(ɡǔ suǐ)間質(zhì)干細(xì)胞,造血(z224。o xu232。)干細(xì)胞,神經(jīng)干細(xì)胞,第二十五頁(yè),共五十一頁(yè)。,骨髓(ɡǔ suǐ)間質(zhì)干細(xì)胞 (MSC),近年的研究(y225。njiū)已表明間質(zhì)干細(xì)胞(MSC)能向軟骨、骨、脂肪、造血基質(zhì)和神經(jīng)元樣等細(xì)胞分化,使其首選為組織工程中的種子細(xì)胞。,最初,用含血清的完全培養(yǎng)基或無(wú)血清化學(xué)限定性培養(yǎng)液使孵化(fūhu224。)4.5日齡雞胚肢芽的骨髓MSC原代培養(yǎng)獲得成功。,隨后,大鼠、人和兔的骨髓MSC原代和繼代培養(yǎng)也有進(jìn)展。,第二十六頁(yè),共五十一頁(yè)。,大鼠骨髓MSC細(xì)胞(x236。bāo)體外培養(yǎng),取大鼠股骨,Tyrode`s液洗滌(xǐd237。)干凈,用注射器吸10ml含血清的DMEM-LG培養(yǎng)液,將針頭插入除去骨骺后的股骨(gǔgǔ)一端的骨髓腔,注入培養(yǎng)液,從骨的另一端收集,反復(fù)抽吸,打散成細(xì)胞懸液,調(diào)節(jié)有核細(xì)胞密度至5107個(gè)/ml,接種到直徑為10mm的培養(yǎng)皿中,37℃,5%CO2,每隔3-4天換液一次,一般經(jīng)2周左右可形成一些較大的細(xì)胞克隆,第二十七頁(yè),共五十一頁(yè)。,體外生長(zhǎng)(shēngzhǎng)特性,原代培養(yǎng)(p233。iyǎng)物中多為成纖維樣細(xì)胞,紅細(xì)胞在此培養(yǎng)(p233。iyǎng)液中不能存活,而且不貼壁,通過(guò)換液而洗除。,MSC中混雜的巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞,造血細(xì)胞等,由于它們的貼壁黏附能力不同,通過(guò)調(diào)整胰蛋白酶-EDTA的消化時(shí)間,保證(bǎozh232。ng)在短暫消化時(shí)間內(nèi),使MSC與培養(yǎng)皿底脫離,而其他細(xì)胞仍貼附于培養(yǎng)皿底,從而使MSC在傳代期間進(jìn)一步得到純化。,第二十八頁(yè),共五十一頁(yè)。,MSC生長(zhǎng)(shēngzhǎng)呈長(zhǎng)梭形,成索密集排列。,鑒定(ji224。nd236。ng)包括人在內(nèi)的MSC的直接標(biāo)志物SH2+、SH3+、CD44+、CD71+、CD94+、CD124+、CD14-、CD34-等。,還可通過(guò)檢測(cè)它們成骨和成軟骨能力(n233。ngl236。)予以鑒定。,第二十九頁(yè),共五十一頁(yè)。,造血(z224。o xu232。)干細(xì)胞,胚胎發(fā)育(fāy249。)中最早出現(xiàn)造血功能的組織是卵黃囊。,胎兒出生前,胚胎肝臟是主要的造血組織,內(nèi)含較多的造血干細(xì)胞,人胚發(fā)育至6個(gè)月后,骨髓組織造血功能(gōngn233。ng)逐漸明顯,而肝臟的造血功能(gōngn233。
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