20xx年醫(yī)學專題—干細胞-成體干細胞(編輯修改稿)
2024-11-14 19:22 本頁面
【文章內容簡介】 能性。,第二十一頁，共五十一頁。,肝干細胞的鑒定(ji224。nd236。ng),肝干細胞本身缺乏特異性標志(biāozh236。)，分離和鑒定帶來了困難。,雙潛能的肝干細胞(x236。bāo)同時表達肝細胞(x236。bāo)和膽上皮細胞(x236。bāo)的標志物，細胞(x236。bāo)角蛋白CK7和CK19為膽上皮細胞的特異性標志；,白蛋白(ALB)、甲胎蛋白(AFP)和肝代謝酶細胞色素P450可 作特異性標志物；,細胞角蛋白CK8和CK18在肝實質細胞和膽上皮細胞都有表達。,肝干細胞一般除了其特有的形態(tài)學外，常結合上述特有標志，通過免疫組織化學、流式細胞檢測和原位雜交等方法予以鑒定。,第二十二頁，共五十一頁。,肝干細胞的可塑性,雙潛能卵圓形細胞不僅能分化為肝細胞和膽上皮細胞，當分別移植到胰腺和十二指腸時，還能跨組織分化為胰腺細胞和腸上皮細胞，表明肝干細胞在適當(sh236。d224。ng)的微環(huán)境中能被誘導分化為內胚層的其他組織細胞，目前，還未見有跨胚層分化的直接例證。,卵圓形細胞異常(y236。ch225。ng)分化或分化突然停止有可能發(fā)生肝細胞癌。,第二十三頁，共五十一頁。,骨骼肌干細胞,肌肉的生長、更新和修復是由衛(wèi)星細胞(x236。bāo)（satellite cells）介導的，一般認為這就是骨骼肌干細胞。,近年的研究表明，從肌肉分離的干細胞不僅能分化出肌肉，還能產生(chǎnshēng)血液細胞成分。,骨骼肌干細胞不僅存在于骨骼肌組織，而且具有分化的可塑性，甚至(sh232。nzh236。)跨越胚層分化為肝細胞和神經細胞。,第二十四頁，共五十一頁。,成體干細胞的體外培養(yǎng)(p233。iyǎng)和特性,骨髓(ɡǔ suǐ)間質干細胞,造血(z224。o xu232。)干細胞,神經干細胞,第二十五頁，共五十一頁。,骨髓(ɡǔ suǐ)間質干細胞 （MSC）,近年的研究已表明間質干細胞（MSC）能向軟骨、骨、脂肪、造血基質和神經元樣等細胞分化，使其首選為組織工程(gōngch233。ng)中的種子細胞。,最初(zu236。chū)，用含血清的完全培養(yǎng)基或無血清化學限定性培養(yǎng)液使孵化4.5日齡雞胚肢芽的骨髓MSC原代培養(yǎng)獲得成功。,隨后，大鼠、人和兔的骨髓MSC原代和繼代培養(yǎng)也有進展。,第二十六頁，共五十一頁。,大鼠骨髓MSC細胞(x236。bāo)體外培養(yǎng),取大鼠股骨，Tyrode`s液洗滌(xǐd237。)干凈,用注射器吸10ml含血清的DMEM－LG培養(yǎng)液，將針頭插入除去骨骺后的股骨一端(yīduān)的骨髓腔，注入培養(yǎng)液,從骨的另一端收集，反復抽吸，打散成細胞懸液,調節(jié)有核細胞密度至5107個/ml，接種到直徑為10mm的培養(yǎng)皿中,37℃,5%CO2,每隔3－4天換液一次，一般經2周左右可形成一些較大的細胞克隆,第二十七頁，共五十一頁。,體外生長(shēngzhǎng)特性,原代培養(yǎng)物中多為成纖維樣細胞，紅細胞在此培養(yǎng)液中不能存活，而且(233。r qiě)不貼壁，通過換液而洗除。,MSC中混雜的巨噬細胞、單核細胞，造血細胞等，由于(y243。uy)它們的貼壁黏附能力不同，通過調整胰蛋白酶－EDTA的消化時間，保證在短暫消化時間內，使MSC與培養(yǎng)皿底脫離，而其他細胞仍貼附于培養(yǎng)皿底，從而使MSC在傳代期間進一步得到純化。,第二十八頁，共五十一頁。,MSC生長呈長梭形，成索密集(m236。j237。)排列。,鑒定包括(bāoku242。)人在內的MSC的直接標志物SH2＋、SH3＋、CD44＋、CD71＋、CD94＋、CD124＋、CD14－、CD34－等。,還可通過檢測(jiǎn c232。)它們成骨和成軟骨能力予以鑒定。,第二十九頁，共五十一頁。,造血(z224。o xu232。)干細胞,胚胎發(fā)育中最早出現(xiàn)造血(z224。o xu232。)功能的組織是卵黃囊。,胎兒(tāi 233。r)出生前，胚胎肝臟是主要的造血組織，內含較多的造血干細胞，人胚發(fā)育至6個月后，骨髓組織造血功能逐漸明顯，而肝臟的造血功能逐漸減少。,出生后，造血細胞主要存在于紅髓內。,第三十頁，共五十一頁。,紅髓：脾臟白髓周圍的區(qū)域，包
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