血清中提取igm方法和蛋白連接方法(編輯修改稿)
2024-11-17 22:17 本頁面
【文章內容簡介】 就改變了蛋白質的溶解度。（5）溫度：鹽析時溫度要求并不嚴格，一般可在室溫下操作。血清蛋白于25℃時較0℃更易析出。但對溫度敏感的蛋白質，則應于低溫下鹽析。（6）蛋白質沉淀后宜在4℃放3小時以上或過夜，以形成較大沉淀而易于分離。三、冷酒精沉淀法，調節(jié) (177。)冷卻到0℃。在激烈攪拌的條件下，加預冷的酒精（20℃）到最終濃度為20%保持在5℃。產生的沉淀A含大多免疫球蛋白?！?0mol/L NaCl溶液（冷）中，產生的沉淀（B），包括大部分的IgA和IgM，IgG在上清液內。（B）可按下述方法進一步分離出IgA和IgM的混合物：將沉淀（B）懸浮在0℃ 水中，調節(jié) ，離心去除不溶的蛋白?！? 。然后加冷酒精到最終濃度為10%，保持在–2℃或3℃低溫，所得的沉淀（BB）主要含IgA和IgM。（一）材料 1．血清 2．葡聚糖凝膠G200 3．（－HCl+）。（二） 操作方法 90cm層析柱，用葡聚糖凝膠G200裝柱，平衡后，直接加血清樣品10ml或硫酸銨粗提制品，洗脫液洗脫，分管收集，測OD280值，第一峰即為IgM。將第一峰的數(shù)管混合，濃縮、鑒定。不同動物，IgG分離的條件和產量略有不同，見下表。從沉淀（B）可按下述方法進一步分離出IgA和IgM的混合物：將沉淀（B）懸浮在0℃ 水中，離心去除不溶的蛋白。~。然后加冷酒精到最終濃度為10%，保持在2℃或3℃低溫，所得的沉淀（BB）主要含IgA和IgM。表 從幾種動物和人血清沉淀A分離IgM的條件 物 種pH沉淀條件IgG產量酒精濃度（%）離子強度人15.
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